马铃薯类糖基转移酶基因StKOB1的克隆与功能分析

论文摘要

糖基转移酶通过参与多种物质糖基化修饰在植物抗逆胁迫方面发挥重要作用。为了解糖基转移酶基因在马铃薯晚疫病抗性中的作用,从马铃薯栽培种‘合作88’中克隆类糖基转移酶基因StKOB1,分析了该基因的表达特性及功能。通过实时定量PCR技术,分析StKOB1受晚疫病菌（Phytophthora infestans）、水杨酸、茉莉酸甲酯及乙烯利诱导表达模式,利用基因瞬时表达和病毒诱导的基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）技术在本氏烟草中超量表达和沉默该基因,然后进行晚疫病抗性鉴定。结果表明,StKOB1蛋白结构域包含1个跨膜结构域（27～47 aa）,1个糖基转移酶功能域（115～381 aa）。StKOB1基因受晚疫病菌和茉莉酸甲酯诱导表达。瞬时超量表达StKOB1基因未能增强植物抗病性,但与对照植株相比,Nb KOB1沉默植株的抗病性显著降低。上述结果说明StKOB1参与晚疫病抗性调控。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•     1.1.1 试剂与材料
•     1.1.2 主要仪器
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 植物生长和晚疫病菌培养
•     1.2.2 StKOB1基因克隆及序列分析
•     1.2.3 St KOB1基因在P.infestans侵染下的表达分析
•     1.2.4 StKOB1基因在水杨酸、茉莉酸甲酯、乙烯利处理下的表达分析
•     1.2.5 VIGS载体构建及烟草转化
•     1.2.6 St KOB1表达载体构建及瞬时超量表达
•     1.2.7 P.infestans离体叶片接种、病斑面积统计
•     1.2.8 台盼蓝染色
• 2 结果与分析
•   2.1 St KOB1基因序列及同源性分析
•   2.2 St KOB1基因的表达特性分析
•   2.3 Nb KOB1基因的沉默效率分析
•   2.4 Nb KOB1沉默的烟草植株晚疫病抗性的鉴定
•   2.5 St KOB1的瞬时超量表达及晚疫病抗性的鉴定
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 白易平,刘晶,雷朝霞,唐唯,王洪洋

关键词: 马铃薯,晚疫病,本氏烟草,病毒诱导基因沉默

来源: 中国农业科技导报 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,农作物

单位: 云南师范大学生命科学学院,云南师范大学马铃薯科学研究院

基金: 云南省应用基础研究计划青年项目(2015FD015),国家自然科学基金项目(31660503)资助

分类号: S532;Q943.2

DOI: 10.13304/j.nykjdb.2018.0550

页码: 16-24

总页数: 9

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