用蛋白组学技术鉴定肝细胞损伤大鼠血清中的差异蛋白

论文摘要

目的鉴定酮康唑（ketoconazole,KTZ）和四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）致大鼠肝细胞损伤后血清中的差异蛋白。方法选取7周龄Wistar雄性大鼠96只,随机分为KTZ组32只,对照组32只和CCl4组32只。KTZ组灌胃给予225 mg/kg的KTZ,每天1次,共2次。对照组灌胃给予等量生理盐水1次。CCl4组灌胃给予10 m L/kg的CCl4（V/V:30%） 1次。给药结束后4、24、48和72 h,麻醉动物取血,制备血清,肝用于制备病理切片。发生明显肝细胞损伤的KTZ组和CCl4组血清,以及对照组血清用于蛋白提取,然后采用双向凝胶电泳（twodimensional gel-electrophoresis,2-DE）联合质谱技术鉴定差异蛋白。结果给药结束后24 h,KTZ组和CCl4组动物的谷丙转氨酶（alanine transaminase,ALT）升高,差异具有统计学意义（P<0.05）,并伴有肝细胞病理学改变。与对照组相比,KTZ组和CCl4组共鉴定出载脂蛋白AI,血浆谷胱甘肽过氧化物酶,载脂蛋白E和维生素D结合蛋白等4种血清差异蛋白。结论鉴定出的4种差异蛋白可以作为肝细胞损伤的潜在生物标志物进一步研究。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 实验动物
•   1.2 主要试剂与仪器
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 药物配制、给药剂量、分组及解剖
•     1.3.2 外周血清和病理切片制作
•     1.3.3 血清蛋白提取
•     1.3.4 双向凝胶电泳
•     1.3.5 图像分析
•     1.3.6 酶解及质谱分析
•     1.3.7 数据库检索
•   1.4 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 ALT检测结果
•   2.2 病理检查结果
•   2.3 双向凝胶电泳结果
•   2.4 质谱鉴定结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 苗玉发,康慧君,王晓姝,李路路,曲哲,杨艳伟,张河战,李波

关键词: 酮康唑,四氯化碳,肝损伤,蛋白质组学,生物标志物,大鼠

来源: 中国比较医学杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 基础医学,消化系统疾病

单位: 中国食品药品检定研究院

基金: 国家“重大新药创制”科技重大专项基金资助项目(2018ZX09201017)

分类号: R575;R-332

页码: 45-51

总页数: 7

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