论文摘要
目的:克隆中华绒螯蟹金属硫蛋白(metallothionein,MT)基因至真核表达载体,表达蛋白,为进一步研究中华绒螯蟹金属硫蛋白的结构和功能打下基础。方法:设计特异性引物,PCR扩增得到MT基因编码序列,定向克隆至带GFP标签的真核表达载体p EGFP-C1,双酶切及测序鉴定重组质粒后转染A549细胞,荧光观察及Western Blot检测目的蛋白表达情况。结果:通过双酶切和测序确认成功构建了中华绒螯蟹MT基因的真核表达载体;重组质粒转染A549细胞24 h后观察到了绿色荧光,细胞裂解物经过Western Blot检测到符合预期的MT-GFP融合蛋白特异性条带。结论:成功构建了中华绒螯蟹MT基因的真核表达载体,证实了该基因能在A549细胞中成功表达,为进一步研究MT的结构功能打下了基础。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 邓小亮,钟秋珍,付欣,洪玮,谭茵,马文康
关键词: 中华绒螯蟹,金属硫蛋白,表达
来源: 广州医科大学学报 2019年01期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学
单位: 广州医科大学生命科学学院
基金: 国家自然科学基金(81500043),广州医科大学校级资助项目(L1751002)
分类号: Q78
页码: 1-5
总页数: 5
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