氨基载体共价结合固定化海洋假丝酵母脂肪酶

氨基载体共价结合固定化海洋假丝酵母脂肪酶

论文摘要

共价结合法是重要的工业酶固定化方法,利用稳定的共价键固定化工业酶,在载体和酶间形成多点共价连接,可以制备稳定性较好的固定化酶,更具有实际应用价值。利用氨基载体共价结合固定化海洋假丝酵母脂肪酶,采用较为廉价的戊二醛进行辅助交联,通过单因素和正交试验,确定最佳固定化条件为:25℃、pH5. 0、0. 1%戊二醛、0. 25g载体、交联0. 5h、固定化1h、加酶量为800U,最终得到的固定化酶酶活达到83. 01U/g。固定化脂肪酶的最适pH较游离酶向碱性方向偏移,最适反应温度提高10℃,固定化酶的热稳定性和酸碱稳定性比游离酶好且重复使用性和储存稳定性明显优于游离酶。同时发现交联剂是制备固定化脂肪酶的重要因素,因此探索新型交联剂对于固定化效果的提高具有重要意义,为海洋假丝酵母脂肪酶的固定化工艺技术和工业应用奠定了良好基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 氨基载体固定化海洋假丝酵母脂肪酶
  •     1.2.2 脂肪酶酶活测定方法
  •     1.2.3 脂肪酶固定化条件优化
  •     1.2.4 固定化酶与游离酶的酶学性质表征及比较
  • 2 结果与分析
  •   2.1 固定化酶交联及固定化条件确定
  •     2.1.1 载体量对固定化效果的影响
  •     2.1.2 温度对固定化效果的影响
  •     2.1.3 pH对固定化效果的影响
  •     2.1.4 戊二醛体积分数对固定化效果的影响
  •     2.1.5 交联时间对固定化效果的影响
  •     2.1.6 固定化时间对固定化效果的影响
  •   2.2 固定化条件正交试验
  •   2.3 固定化酶与游离酶的酶学性质比较
  •     2.3.1 最适反应温度
  •     2.3.2 最适反应pH
  •     2.3.3 热稳定性
  •     2.3.4 酸碱稳定性
  •     2.3.5 操作稳定性
  •     2.3.6 储存稳定性
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 朱衡,林海蛟,张继福,张云,孙爱君,胡云峰

    关键词: 氨基载体,脂肪酶,戊二醛,共价交联,固定化酶

    来源: 中国生物工程杂志 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 中国科学院南海海洋研究所中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室,中国科学院大学,广东省中医院

    基金: 广东省海洋渔业科技攻关与研发方向项目(A201701C12),中国科学院战略性先导科技专项(XDA11030404),中国科学院“科学”号高端用户项目(KEXUE2018G05),广东省自然科学基金(2018A030313151)资助项目

    分类号: Q814.2

    DOI: 10.13523/j.cb.20190710

    页码: 71-78

    总页数: 8

    文件大小: 279K

    下载量: 364

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