淡色库蚊抗吡丙醚及敏感种群解毒酶活性及其mRNA的表达差异

论文摘要

目的探讨2种解毒酶在淡色库蚊吡丙醚抗性中的作用及其相关基因mRNA表达量的差异。方法采用分光光度法测定羧酸酯酶（CarE）和谷胱甘肽硫转移酶（GSTs）的酶活性,采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）测定CarE及GSTs相关基因的相对表达量。结果淡色库蚊抗吡丙醚种群和敏感种群CarE和GSTs的最适底物分别为1-氯-2,4-二硝基苯（CDNB）和乙酸-2-萘酯（β-NA）。2个蚊虫种群CarE活力分别为3.998×10-2△OD/（mg protein·min）和3.010×10-2△OD/（mg protein·min）,两者差异有统计学意义（t=5.486,P<0.05）;GSTs酶活力分别为3.626×10-4和2.737×10-4nmol/（mg protein·min）,两者差异有统计学意义（t=3.899,P<0.05）。2个种群EST-2、GST1、GST2基因mRNA相对表达量差异无统计学意义（P>0.05）,EST-3基因mRNA相对表达量差异有统计学意义（P<0.05）。结论吡丙醚可能诱导淡色库蚊EST-3基因上调表达而增强了羧酸酯酶的解毒酶活性,GSTs酶活性升高与GST1和GST2基因没有关系。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试虫
•   1.2 试剂及仪器设备
•     1.2.1 主要试剂
•     1.2.2 主要仪器设备
•   1.3 淡色库蚊2种解毒酶活性测定
•     1.3.1 酶液制备
•     1.3.2 谷胱甘肽硫转移酶及羧酸酯酶活性测定
•     1.3.3 酶蛋白含量的测定
•   1.4 2种解毒酶mRNA表达量的差异
•     1.4.1 总RNA的提取
•     1.4.2 cDNA第一链的合成
•     1.4.3 酯酶基因及GSTs基因的引物设计
•     1.4.4 相关基因的实时荧光定量PCR检测
•   1.5 数据处理
• 2 结果
•   2.1 2个蚊虫种群CarE和GSTs的活力
•   2.2 2种蚊虫种群CarE和GST相关基因mRNA的表达量 （图1）
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘洪霞,刘曜,冷培恩

关键词: 淡色库蚊,吡丙醚,羧酸酯酶,谷胱甘肽硫转移酶

来源: 中华卫生杀虫药械 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 上海市疾病预防控制中心

基金: 上海市自然科学基金项目(编号:16ZR140666)

分类号: R384.1

DOI: 10.19821/j.1671-2781.2019.02.024

页码: 173-176

总页数: 4

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