导读:本文包含了重组表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:病毒,甘薯,酵母,层析,蛋白,转染,细胞。
重组表达论文文献综述
张迅轶,尹喆,沈智君,冯云,杨敏[1]（2019）在《重组pcDNA3.0-FGF10的构建及其转染人间充质干细胞的生物学表达》一文中研究指出目的构建成纤维细胞生长因子10(FGF10)的载体pcDNA3.0-FGF10,观察FGF10在体内外的生物学作用。方法人早胚组织总RNA,扩增得到人FGF10cDNA片段并将其插入载体pcDNA3.0中,构建成pcDNA3.0-FGF10重组真核表达载体。将其转染入人胚源间充质干细胞(MSC),得到pcDNA3.0-FGF10-MSC。利用免疫荧光、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western-blot等方法鉴定转染效果。结果成功构建能持续稳定表达目的蛋白FGF10的重组质粒表达载体pcDNA3.0-FGF10-MSC。结论成功构建并转染质粒载体,为观察FGF10在体内外的生物学作用提供了实验工具。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2019年24期）
李恩广,郭宝太,杨雪,朱虹,王晶珊[2]（2019）在《甘薯羽状斑驳病毒和褪绿矮化病毒重组双CP融合基因的原核表达和抗血清的制备》一文中研究指出由褪绿矮化病毒(SPCSV)和羽状斑驳病毒(SPFMV)协生共侵染引起病毒病(SPVD)是甘薯最严重的病害之一。为了建立一种高效的甘薯病毒病SPVD检测体系,本研究构建了SPCSV和SPFMV重组双CP基因的原核表达载体pET22b-SPVD-CP,该重组菌在20℃条件下经IPTG诱导,获得了68kDa的融合蛋白(重组双CP)。利用高纯度重组双CP为抗原免疫家兔,获得了SPVD的抗血清,间接ELISA检测显示抗体稀释度在1∶512K的范围内,制备的抗体与抗原具有较强的结合活性。本研究结果为利用重组CP作抗原大量制备SPVD抗体奠定了基础。(本文来源于《青岛农业大学学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
刘朋,徐宏军,王麒文,王永恒,董婷婷[3]（2019）在《口服表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的重组枯草芽胞杆菌对母猪乳源性免疫力的影响》一文中研究指出[目的]通过给母猪口服表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白的重组枯草芽胞杆菌以评估其产生的乳源性免疫力,从而为仔猪提供相应的保护。[方法]分别给母猪口服2 mL重组枯草芽胞杆菌(1×10~9 CFU·mL~(-1))和肌肉注射2 mL灭活PEDV疫苗(1×10~7 TCID_(50)·mL~(-1)),产后1 d收集相应的样品。首先检测了乳汁中特异性SIgA及乳汁细胞中特异性IgA,然后对口腔和鼻腔分泌物中特异性SIgA和细胞因子(INF-γ和TGF-α)的水平进行了检测;最后评估乳汁中的中和抗体滴度。[结果]口服重组枯草芽胞杆菌后乳汁中SIgA及其乳汁细胞中IgA特异性抗体水平显着提高(P<0.05,P<0.01),同时乳汁及其乳汁细胞中INF-γ和TGF-α的水平也显著提高(P<0.05,P<0.01);鼻腔和口腔分泌物中特异性SIgA显着增加(P<0.05,P<0.01);口服重组枯草芽胞杆菌的母猪乳汁中和抗体滴度为1∶128,而肌注组母猪为1∶64。[结论]口服表达PEDV S蛋白的重组枯草芽胞杆菌可提高母猪乳汁中体液免疫和细胞免疫水平,为预防新生仔猪PED的发生提供充足的乳源性免疫力。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2019年06期）
欧兰香,陈振,王佳颖,解光宁,王岩[4]（2019）在《重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备》一文中研究指出目的构建重组人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的原核表达质粒,制备重组人Lp-PLA2,并通过免疫诱导获得人Lp-PLA2的单克隆抗体。方法以人cDNA文库为模板,通过PCR的方法获得PLA2G7基因的编码区序列,并与原核表达载体pET32a进行连接,构建原核表达质粒,转化大肠杆菌Rostta(DE3)。通过在30℃0.2mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)条件下诱导蛋白表达,经过纯化获得重组人Lp-PLA2;免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体;并通过酶联免疫吸附试验法测定效价,检测抗体特异性。结果通过NotⅠ和SalⅠ双酶切及测序证实原核表达质粒构建成功;经纯化得到47×103左右的蛋白,与Lp-PLA2抗体进行蛋白免疫印迹法杂交呈阳性,表明已得到重组人Lp-PLA2。通过对小鼠免疫,最终获得单克隆抗体,效价为1∶2×106,与纤维蛋白原、C-反应蛋白无交叉反应。结论成功获得重组人Lp-PLA2,并制备得到了效价较高的单克隆抗体,为后续Lp-PLA2检测试剂盒的开发奠定了基础。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2019年22期）
李德款,张航,聂艳桃,李成,梁洪[5]（2019）在《重组人凝血因子Ⅸ在CHO细胞中的表达和纯化》一文中研究指出目的在CHO细胞中表达并纯化人凝血因子Ⅸ(human coagulation factorⅨ,hFⅨ)。方法将高表达hFⅨ的CHO细胞株在摇瓶中用无血清培养基进行批次培养和补料批次培养,收获补料批次培养上清,通过阴离子交换层析进行纯化,测定纯化产物的蛋白浓度及hFⅨ活性,并进行SDS-PAGE分析。结果批次和补料批次培养表达的hFⅨ活性分别高达0. 62和14. 45 IU/mL。纯化后的h FⅨ比活性高达157. 19 IU/mg。SDS-PAGE分析表明重组CHO工程细胞株能正确表达hFⅨ。结论成功在CHO细胞中表达并纯化了高比活性的重组hFⅨ蛋白,为进一步研制重组FⅨ药物奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年11期）
王文伟,蔡蓓蓓,仝光杰,王蓓,楼觉人[6]（2019）在《重组人乳头瘤病毒33型L1病毒样颗粒的表达、纯化及免疫原性评价》一文中研究指出目的利用毕赤酵母表达人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)33型L1病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),评价其在小鼠体内的免疫原性。方法构建HPV33 L1表达质粒,电转化毕赤酵母,筛选高表达菌株,15 L发酵罐发酵,离子交换和凝胶体积排阻层析分离纯化HPV33 L1 VLPs,纯化后样品免疫小鼠,采用假病毒中和试验检测小鼠免疫后血清中和抗体滴度。结果质粒HPV33 L1-pPIC3. 5K经双酶切及测序鉴定证明构建成功;毕赤酵母表达产物经Western blot分析,可见相对分子质量约56 000的目的条带;透射电镜下可见直径约60 nm的病毒样颗粒;纯化后的HPV33 L1 VLPs纯度可达95%以上;0. 4和0. 04μg HPV33 L1 VLPs免疫后小鼠血清中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为3 200和566,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论利用毕赤酵母成功表达了HPV33 L1 VLPs,并具有良好的免疫原性。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年11期）
唐国毅,商雨,李林涛,任助,李丽[7]（2019）在《表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组耐热新城疫病毒株的鸡胚传代研究》一文中研究指出新城疫和禽流感严重危害世界养禽业,对其防控在我国主要依赖疫苗接种。课题组前期获得了一株可表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组耐热新城疫病毒rTS-HA株。进一步对其鸡胚传代特性进行研究,旨在分析重组新城疫病毒在传代过程中的热稳定性和外源基因表达稳定性。将其在SPF鸡胚传至18代,每隔4代耐热选育1次,取中间代次毒株,测定其增殖效价、鸡胚最小致死剂量的平均死亡时间(mean death time,MDT),同时设置未耐热选育的对照。结果表明,通过耐热选育将rTS-HA株传至第18代后,其增殖滴度未发现显着变化,MDT均大于120 h,表明毒力无返强现象,但其耐热性有显着提升,而未进行耐热选育的鸡胚传代株的耐热特性显着下降。动物试验结果表明,耐热选育后毒株的免疫效果较初代毒株也有明显的提升。以上结果表明重组新城疫病毒rTS-HA株需要进行耐热选育传代,才能保持其耐热特性,同时其免疫原性也有一定的提升,可作为新城疫和禽流感二联耐热基因工程活疫苗的候选毒株。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年11期）
曾龙[8]（2019）在《硝普钠联合冻干重组人脑利钠肽对顽固性心力衰竭临床疗效及血清炎性因子表达的影响》一文中研究指出目的观察冻干重组人脑利钠肽结合硝普纳对顽固性心衰患者的疗效及血清炎性因子表达的影响。方法将某院心内科在2017年9月～2018年12月期间收治的60例顽固性心力衰竭患者随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组:对患者采用硝普纳治疗;观察组:患者在对照组治疗的基础上联合冻干重组人脑利钠肽进行治疗。比较两组患者干预后的疗效和血清炎性因子表达情况。结果经过干预,观察组患者总有效率为83.33%,显着高于对照组63.33%,差异有统计学意义(P <0.05),且观察组患者的NT-proBNP、LVEDd水平均低于对照组,观察组患者的LVFF水平高于对照组,叁指标差异均有统计学意义(P <0.05),此外,观察组患者的血清炎性因子水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论硝普钠联合冻干重组人脑利钠肽对顽固性心衰有优异的临床疗效。(本文来源于《中国处方药》期刊2019年11期）
颜倩倩,陶妍,李雯,谢晶,钱韵芳[9]（2019）在《鲤鱼c型溶菌酶在毕赤酵母中的重组表达及其抑菌活性》一文中研究指出c型溶菌酶是鱼类在先天性免疫机制中抵抗细菌感染的关键性免疫蛋白。鲤鱼(Cyprinus carpio)c型溶菌酶具有鱼类c型溶菌酶的基本特征:N端含有信号肽;C端成熟肽中的Glu35和Asp51构成酶的活性位点,并含有8个保守的半胱氨酸残基。本研究通过反转录PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)获得鲤鱼c型溶菌酶成熟肽的c DNA,该序列全长381 bp,编码由127个氨基酸残基组成的成熟肽;通过PCR在其5'端添加限制性内切酶XhoⅠ位点和6×His标签、3'端添加XbaⅠ位点;获得的目的基因,即鲤鱼c型溶菌酶基因(common carp c-type lysozyme, CLYc),与表达载体pPICZαA连接后电转至毕赤酵母(Pichia pastoris) X-33,通过高浓度博来霉素筛选高拷贝酵母转化子;在29℃、250 r/min条件下,使用1.5%甲醇诱导表达120 h,表达上清液经固化金属离子亲和层析(immobilized metal affinity chromatography, IMAC)纯化,获得分子量为15.4 kD的重组蛋白,表达量约为40 mg/L;Western blot分析和MALDI-TOF/TOF质谱鉴定表明该重组蛋白为预期的目的重组蛋白CLYc。抑菌试验证明,含重组CLYc的培养上清液对革兰氏阳性的单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)以及革兰氏阴性的大肠杆菌(Escherichia coli)和副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)具有明显的抑菌活性;纯化的重组CLYc对单增李斯特菌、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌和副溶血性弧菌显示了相同的最小抑菌浓度。本研究结果为鱼类来源的天然抗菌剂的开发和生产提供了技术途径。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年11期）
李晗,臧佳辰,谭晓怡,夏小雨,王震宇[10]（2019）在《牡蛎重组铁蛋白GF1的原核表达、分离纯化及表征》一文中研究指出铁蛋白可形成纳米笼结构,并可作为功能性纳米材料。在本研究中,从牡蛎的内脏中提取铁蛋白基因GF1,成功克隆后转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,纯化和表征。使用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱法分离纯化牡蛎铁蛋白。铁蛋白亚基的分子量为19972 Da(聚丙烯酰胺凝胶电泳),铁蛋白分子量为480 kDa(非变性凝胶电泳)。利用胰蛋白酶进行胶内酶解,使用NanoLC-Q-TOF-MS鉴定铁蛋白,并通过圆二色谱法分析其二级结构,通过动态光散射和透射电子显微镜表征铁蛋白的纳米笼结构。基于人铁蛋白重链氨基酸序列对牡蛎铁蛋白进行同源建模,构建其叁维结构。本研究为铁蛋白自组装和生物功能活性的研究提供了理论基础。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2019-11-13）
重组表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
由褪绿矮化病毒(SPCSV)和羽状斑驳病毒(SPFMV)协生共侵染引起病毒病(SPVD)是甘薯最严重的病害之一。为了建立一种高效的甘薯病毒病SPVD检测体系,本研究构建了SPCSV和SPFMV重组双CP基因的原核表达载体pET22b-SPVD-CP,该重组菌在20℃条件下经IPTG诱导,获得了68kDa的融合蛋白(重组双CP)。利用高纯度重组双CP为抗原免疫家兔,获得了SPVD的抗血清,间接ELISA检测显示抗体稀释度在1∶512K的范围内,制备的抗体与抗原具有较强的结合活性。本研究结果为利用重组CP作抗原大量制备SPVD抗体奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组表达论文参考文献
[1].张迅轶,尹喆,沈智君,冯云,杨敏.重组pcDNA3.0-FGF10的构建及其转染人间充质干细胞的生物学表达[J].检验医学与临床.2019
[2].李恩广,郭宝太,杨雪,朱虹,王晶珊.甘薯羽状斑驳病毒和褪绿矮化病毒重组双CP融合基因的原核表达和抗血清的制备[J].青岛农业大学学报(自然科学版).2019
[3].刘朋,徐宏军,王麒文,王永恒,董婷婷.口服表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的重组枯草芽胞杆菌对母猪乳源性免疫力的影响[J].南京农业大学学报.2019
[4].欧兰香,陈振,王佳颖,解光宁,王岩.重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备[J].国际检验医学杂志.2019
[5].李德款,张航,聂艳桃,李成,梁洪.重组人凝血因子Ⅸ在CHO细胞中的表达和纯化[J].中国生物制品学杂志.2019
[6].王文伟,蔡蓓蓓,仝光杰,王蓓,楼觉人.重组人乳头瘤病毒33型L1病毒样颗粒的表达、纯化及免疫原性评价[J].中国生物制品学杂志.2019
[7].唐国毅,商雨,李林涛,任助,李丽.表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组耐热新城疫病毒株的鸡胚传代研究[J].动物医学进展.2019
[8].曾龙.硝普钠联合冻干重组人脑利钠肽对顽固性心力衰竭临床疗效及血清炎性因子表达的影响[J].中国处方药.2019
[9].颜倩倩,陶妍,李雯,谢晶,钱韵芳.鲤鱼c型溶菌酶在毕赤酵母中的重组表达及其抑菌活性[J].农业生物技术学报.2019
[10].李晗,臧佳辰,谭晓怡,夏小雨,王震宇.牡蛎重组铁蛋白GF1的原核表达、分离纯化及表征[C].中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集.2019
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