银杏种子糖蛋白的SDS-PAGE分离及N-糖链的质谱分析

论文摘要

利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离了银杏种子中的糖蛋白组分,进一步用氨水催化释放N-糖链,并采用电喷雾离子质谱（ESI-MS）及在线液相色谱-质谱联用（LC-UV-MS/MS2）等技术对胶条上释放的N-糖链进行了定性定量分析.结果表明,从银杏种子中分离得到11种糖蛋白,共检测到11条N-糖链,包括高甘露糖型（4. 88%）和复杂型（95. 12%） 2种类型,其中分子量为21000,36000和50000的糖蛋白所释放的核心α-1,3-岩藻糖和β-1,2-木糖修饰的N-糖链所占比率较高,分别为68. 23%,64. 37%和75. 09%.本研究对进一步研究银杏糖蛋白功能具有重要意义.

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 试剂与仪器
•   1.2 实验过程
•     1.2.1 银杏总蛋白的分离与纯化
•     1.2.2 银杏总蛋白N-糖链的释放
•     1.2.3 银杏蛋白N-糖链的标记
•     1.2.4 银杏蛋白胶条中N-糖链的释放
•     1.2.5 ESI-MS分析
•     1.2.6 在线LC-UV-MS/MS2分析
• 2 结果与讨论
•   2.1 银杏总蛋白的SDS-PAGE电泳分离与鉴定
•   2.2 银杏总蛋白N-糖链的ESI-MS及在线LC-UV-MS/MS2分析
•   2.3 蛋白凝胶N-糖链的ESI-MS分析

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李成,王承健,晋万军,韩健利,杨梅芳,郜茜,黄琳娟,王仲孚

关键词: 银杏糖蛋白,糖苷酶,氨水催化,电喷雾离子质谱

来源: 高等学校化学学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学

单位: 西北大学生命科学学院,西北大学食品科学与工程学院

基金: 国家自然科学基金(批准号:31670808,31600647),陕西省教育厅自然科学专项项目(批准号:16JK1782),西北大学校内基金(批准号:15NW18)资助~~

分类号: O629.73;O657.63

页码: 69-75

总页数: 7

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