导读:本文包含了免疫抗病相关基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,免疫,舌鳎,亚历山大,大菱鲆,多态性,对虾。
免疫抗病相关基因论文文献综述
邢贺飞[1]（2015）在《半滑舌鳎抗病相关SNP标记的筛选及两种免疫相关基因的克隆与初步分析》一文中研究指出半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)是我国特有的名贵海水养殖鱼类,其味道鲜美、口感爽滑、营养丰富,深受广大消费者喜爱,极具市场经济价值和养殖开发潜力。然而,高密度、集约化的养殖模式以及环境污染等原因,致使半滑舌鳎腹水、烂鳍、烂尾等细菌性疾病日益突出,严重制约了半滑舌鳎工厂化养殖产业的发展。将传统选择育种模式与分子标记辅助选择育种技术相结合,有利于半滑舌鳎抗性品系的培育,单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)被认为是一种极具应用前景的分子标记技术。本文以半滑舌鳎为研究材料,克隆了半滑舌鳎两种免疫相关基因Nramp和IL-10,并进行了初步分析研究;利用直接测序法筛选了Nramp基因抗病相关的SNP分子标记,以期为半滑舌鳎抗性品系培育提供技术支持。主要研究结果如下:1.半滑舌鳎免疫相关基因的克隆与初步分析研究利用c DNA末端快速扩增技术,对半滑舌鳎天然抗性相关巨噬细胞蛋白(Natural resistance associated macrophage protein,Nramp)和白细胞介素10(Interleukin 10,IL-10)基因分别进行了克隆,并对其序列结构进行了分析研究。随后,对半滑舌鳎Nramp和IL-10基因感染哈维氏弧菌前后转录组水平的表达分析进行研究;并对半滑舌鳎IL-10基因原核表达进行了初步探索。1)半滑舌鳎Nramp基因克隆与表达分析Nramp属于膜整合转运蛋白,具有抑制胞内寄生菌侵染、调节巨噬细胞抗菌活性等作用。本研究克隆了半滑舌鳎Nramp基因的c DNA序列,该基因全长3717bp,具有16个外显子,其中开放阅读框(open reading frame,ORF)为1677 bp,所编码蛋白含有558个氨基酸,该蛋白具有Nramp家族的典型特征:包括10个跨膜区(transmembrane,TM)、1个由20个氨基酸残基组成的胞质内转运蛋白特征结构域(consensus transport motif,CTM)。半滑舌鳎Nramp基因其ORF末端有1个类似于脊椎动物Nramp2中的铁反应控制蛋白结合位点(iron-responsive regulatory-protein-binding sites,IRE)。半滑舌鳎Nramp与其他14个物种的Nramp氨基酸序列同源性在63~91%之间,系统进化分析表明,半滑舌鳎Nramp和所有鱼类Nramp聚集为一簇,与其他物种Nramp2的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析表明,Nramp基因在半滑舌鳎脾脏和肾脏中的表达量最高,而在肌肉和性腺中的表达量最低;在哈维氏弧菌感染后的半滑舌鳎肾脏、脾脏和肝脏中表达量呈升高趋势,而在鳃中则表现为下调趋势。2)半滑舌鳎IL-10基因克隆与原核表达IL-10是一种具有广泛作用的细胞因子,其主要功能是抑制和终止炎症反应。本研究克隆了半滑舌鳎IL-10基因的c DNA序列,该基因全长935 bp,具有5个外显子,其ORF为561 bp,所编码蛋白含有186个氨基酸,包含4个保守的半胱氨酸残基构成2对二硫键,该蛋白具有IL-10家族的特征序列:G-X2-KA-X2-[D,E]-X-D-[ILV]-[FLV]-[FILMV]-X2-[ILMV][EKQR]。半滑舌鳎IL-10与其他15个物种的IL-10氨基酸序列同源性在27~62%之间,系统进化分析表明,半滑舌鳎IL-10与红鳍东方鲀、大西洋鳕、欧洲鲈鱼和青斑河豚的亲缘关系最近,聚集为一支;而在高等动物中与原鸡的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析表明,半滑舌鳎IL-10 m RNA主要在肝脏、心脏、皮肤和肠中表达;在哈维氏弧菌感染后的肝脏和鳃中表达量呈下调趋势,而脾脏则表现为升高趋势。根据半滑舌鳎IL-10的c DNA序列设计表达引物,利用p EASY原核表达载体试剂盒(p EASY-E1 Expression Kit)构建重组表达质粒,经测序正确后,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导重组质粒蛋白表达;聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测显示重组融合蛋白在分子量约21 k D处有明显目的表达条带,与预测分子量大小一致,且主要以不可溶的包涵体形式存在;Western Blot检测发现多克隆抗体可与半滑舌鳎IL-10重组融合蛋白有效结合。2.半滑舌鳎免疫相关基因抗病分子标记筛选为筛选半滑舌鳎候选基因Nramp和TLR-9抗病相关的SNP标记,利用直接测序法对233个半滑舌鳎个体(死亡个体68个,存活个体165个)进行了抗病相关SNP标记筛选。首先构建了死亡和存活个体基因池(死亡个体和存活个体各20个),并利用引物对其进行初步扫描;对在死亡和存活个体基因池中初步筛选到的SNP位点,用构成死亡和存活个体基因池的40个个体进行第一次单个体验证;对于在第一次个体验证中差异显着的SNP位点在剩余193个个体中进行第二次单个体验证。结果显示,在TLR-9中初步筛选到3个SNP位点,而在Nramp中筛选到15个SNP位点;经第一次单个体验证发现,TLR-9基因的3个SNP位点在死亡和存活个体中无显着性差异,而Nramp基因中有1个SNP-g.3125位点在存活和死亡个体中呈显着性差异;对Nramp基因SNP位点进行第二次单个体验证发现,半滑舌鳎Nramp基因中的SNP-g.3125等位基因(G)和基因型(GG)与半滑舌鳎抗鳗弧菌疾病呈极显着相关性(P﹤0.01)。因此,Nramp基因该SNP位点可作为半滑舌鳎抗病育种的一个潜在的遗传标记位点,为半滑舌鳎抗性品系培育的遗传分子标记提供基础研究资料。(本文来源于《上海海洋大学》期刊2015-05-20）
梁忠秀,李健,刘萍,李吉涛,赵法箴[2]（2013）在《塔玛亚历山大藻对中国明对虾免疫相关基因表达和抗病力的影响》一文中研究指出以一株能产生麻痹性贝毒(Paralytic Shellfish Poison,PSP)的赤潮甲藻塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense,ATHK株)为研究对象,研究了其对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)免疫相关基因(TLR和Relish基因)表达和抗病力的影响。结果表明:200 cells·mL-1塔玛亚历山大藻胁迫72~144 h,中国明对虾的肝胰腺、鳃和血淋巴的TLR和Relish基因表达或被显着抑制(P<0.05),或恢复至海水对照组的水平(P>0.05);而1000 cells·mL-1藻中对虾鳃组织和血淋巴的上述基因表达在48~144 h被显着抑制(P<0.05),肝胰腺的表达在72~144 h被显着抑制(P<0.05)。塔玛亚历山大藻胁迫下投喂感染WSSV的病虾后,加藻的感染组和未加藻的感染组的中国明对虾虽然都在第3 d时检测到阳性结果,7 d内累积死亡率为100%,但同一时间点加藻组的累积死亡率高于未加藻组。塔玛亚历山大藻胁迫6 d后的中国明对虾,经鳗弧菌(Vibrio anguillarum)人工急性感染后,两个加藻组在同一取样时间点的累积死亡率高于未加藻的海水对照组,且随着藻浓度升高而有升高的趋势。研究表明塔玛亚历山大藻可影响中国明对虾TLR和Relish基因表达,从而影响机体的抗病力。(本文来源于《农业环境科学学报》期刊2013年11期）
赵颂,朱弘焱,于百平,宋衡元,苏玉虹[3]（2012）在《猪抗病基因Mx1第14外显子多态性与免疫性能的相关分析》一文中研究指出为分析辽宁种猪群体Mx1基因多态性与免疫性能之间的关系,提取猪耳组织DNA,采用PCR-RFLP技术分析荷包猪、大白猪的Mx1基因多态性,通过双抗体夹心酶联免疫分析(ELISA)方法对两个种群中IFN-α、IL-4、SIgA的水平进行分析,显示:Hin6Ⅰ酶切仅检测到荷包猪存在AA、AB、BB叁种基因型,基因型频率为0.681 4、0.061 9、0.256 6;荷包猪群体免疫数据整体高于大白猪群体,且波动范围大。结果表明:荷包猪与大白猪Mx1基因频率存在差别,荷包猪群体免疫水平高于大白猪,且携带更多Mx1基因的抗病性基因型。本研究为辽宁种猪资源保存、品种选育和开发利用提供了科学依据。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2012年02期）
杨海玲,曾勇庆,王慧[4]（2010）在《猪抗病和免疫相关候选基因的研究进展》一文中研究指出通过育种选择提高猪的抗病性,不仅可以为我们提供品质更优良的肉产品;还可以最大限度地减小因疫病给养猪业带来的经济损失。尤其是近年来,随着病害造成的危害和损失越来越严重,抗病育种研究成为各国育种学家倍加关注的焦点。猪的基因组计划和遗传连锁图谱的发展以及DNA分子标记密度的增加,使许多控制猪经济(数量)性状的QTL逐渐被发现,并显示出巨大的应用前景。本文概述了猪抗病性或免疫相关候选基因的研究进展,综述了动物抗病育种研究的现状、存在问题与前景。(本文来源于《猪业科学》期刊2010年01期）
孟亮,陈松林,刘洋[5]（2009）在《大菱鲆脾脏cDNA文库构建、EST序列分析与免疫抗病相关基因的筛选》一文中研究指出以大菱鲆脾脏为材料,构建cDNA文库,通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析,共获得3 656个大菱鲆脾脏表达序列标签(EST)。经与GenBank数据库的序列比对后发现,1 891个EST代表了149个已知基因,其余1 765个EST为未知序列。这149个基因大致可分为6类:9个为细胞结构类(6.0%);26个为代谢类(17.5%);45个为细胞防御/免疫类(30.2%);43个为基因/蛋白质表达类(28.9%);16个为细胞信号转导/细胞交流类(10.7%);10个无法明确分类(6.7%)。鉴定的与免疫抗病相关重要基因主要有:CC/CXC趋化因子;主要组织相容性复合体(MHC)class I;αC3补体;天然杀伤细胞增强因子(NKEF);胸腺素β-4/β-12;干扰素诱导蛋白G ig1;白介素8受体;STAT4;热激蛋白70/90等。(本文来源于《水产学报》期刊2009年05期）
陈松林,徐美瑜,张玉喜,李伟,刘洋[6]（2005）在《海水养殖鱼类免疫相关功能基因的克隆及其在鱼类抗病育种中的应用潜力》一文中研究指出病害是限制水产养殖业可持续发展的关键因子。目前我国缺乏优良抗病养殖鱼类品种。基因转移、分子标记和基因标记等分子育种技术是培育抗病优良鱼类新品种的很有潜力的技术手段,已成为国际上的发展趋势。鱼类功能基因组技术的发展为筛选鱼类抗病相关功能基因和基因标记提供了机遇。本实验室近年来在海水养殖鱼类真鲷、牙鲆和大菱鲆免疫/抗病相关功能基因筛选与克隆方面开展了一些工作,通过文库筛选和同源克隆等技术,分离克隆了上述鱼类的抗菌肽hepcidin基因、天然抗性相关巨嗜蛋白(NRAMP)基因及主要组织相容性复合体(MHC)基因等免疫/抗病相关功能基因,进行了结构和进化分析;探讨了病原菌感染对上述基因表达的影响;研究了MHC基因的分子多态性及其与鱼体抗病力的关系,并对MHC等抗病相关功能基因在抗病分子育种中的应用前景进行了展望。(本文来源于《第二届中国动物学会比较内分泌学分会和发育生物学分会联合学术研讨会论文集》期刊2005-11-01）
免疫抗病相关基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以一株能产生麻痹性贝毒(Paralytic Shellfish Poison,PSP)的赤潮甲藻塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense,ATHK株)为研究对象,研究了其对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)免疫相关基因(TLR和Relish基因)表达和抗病力的影响。结果表明:200 cells·mL-1塔玛亚历山大藻胁迫72~144 h,中国明对虾的肝胰腺、鳃和血淋巴的TLR和Relish基因表达或被显着抑制(P<0.05),或恢复至海水对照组的水平(P>0.05);而1000 cells·mL-1藻中对虾鳃组织和血淋巴的上述基因表达在48~144 h被显着抑制(P<0.05),肝胰腺的表达在72~144 h被显着抑制(P<0.05)。塔玛亚历山大藻胁迫下投喂感染WSSV的病虾后,加藻的感染组和未加藻的感染组的中国明对虾虽然都在第3 d时检测到阳性结果,7 d内累积死亡率为100%,但同一时间点加藻组的累积死亡率高于未加藻组。塔玛亚历山大藻胁迫6 d后的中国明对虾,经鳗弧菌(Vibrio anguillarum)人工急性感染后,两个加藻组在同一取样时间点的累积死亡率高于未加藻的海水对照组,且随着藻浓度升高而有升高的趋势。研究表明塔玛亚历山大藻可影响中国明对虾TLR和Relish基因表达,从而影响机体的抗病力。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫抗病相关基因论文参考文献
[1].邢贺飞.半滑舌鳎抗病相关SNP标记的筛选及两种免疫相关基因的克隆与初步分析[D].上海海洋大学.2015
[2].梁忠秀,李健,刘萍,李吉涛,赵法箴.塔玛亚历山大藻对中国明对虾免疫相关基因表达和抗病力的影响[J].农业环境科学学报.2013
[3].赵颂,朱弘焱,于百平,宋衡元,苏玉虹.猪抗病基因Mx1第14外显子多态性与免疫性能的相关分析[J].畜牧与兽医.2012
[4].杨海玲,曾勇庆,王慧.猪抗病和免疫相关候选基因的研究进展[J].猪业科学.2010
[5].孟亮,陈松林,刘洋.大菱鲆脾脏cDNA文库构建、EST序列分析与免疫抗病相关基因的筛选[J].水产学报.2009
[6].陈松林,徐美瑜,张玉喜,李伟,刘洋.海水养殖鱼类免疫相关功能基因的克隆及其在鱼类抗病育种中的应用潜力[C].第二届中国动物学会比较内分泌学分会和发育生物学分会联合学术研讨会论文集.2005
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