Geobacillus thermodenitrificans α-半乳糖苷酶原核表达及其酶学性质

论文摘要

本文利用大肠杆菌原核表达系统对来源于Geobacillus thermodenitrificans的α-半乳糖苷酶编码基因进行了重组表达,并对该酶的酶学性质进行了研究。结果表明,该α-半乳糖苷酶的分子量为100～110 kDa,以p NPG为底物时,该酶的最适反应温度为70℃,最适pH6.0,且该酶具有较好的温度稳定性和pH稳定性; Hg+、Ag+、Cu2+离子能完全抑制α-半乳糖苷酶的活性,Fe3+、Mn2+、Zn2+等离子对α-半乳糖苷酶的活性具有不同程度的激活作用;以pNPG为底物测得该酶的米氏常数Km=10.04 mmol/L,最大反应速度Vmax=18.25μmol/min。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 重组菌的构建
•     1.2.2 重组蛋白的诱导表达
•     1.2.3 目的蛋白的纯化
•     1.2.4 酶活力的测定
•     1.2.5 酶学性质的测定
•       1.2.5. 1 最适温度及温度稳定性
•       1.2.5. 2 最适p H及p H稳定性
•       1.2.5. 3 不同金属离子对酶活性的影响
•       1.2.5. 4 动力学常数的测定
•   1.3 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 α-半乳糖苷酶的纯化结果
•   2.2 酶学性质的测定结果
•     2.2.1 最适反应温度
•     2.2.2 温度稳定性
•     2.2.3 最适pH
•     2.2.4 pH稳定性
•     2.2.5 金属离子及化合物对α-半乳糖苷酶的影响
•     2.2.6 α-半乳糖苷酶动力学常数的测定结果
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 石征宇,鲁晶娣,韦盘秋,伍时华,程谦伟,黎娅,易弋

关键词: 半乳糖苷酶,原核表达,酶学性质

来源: 食品工业科技 2019年10期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 广西科技大学生物与化学工程学院,广西糖资源绿色加工重点实验室(广西科技大学),广西高校糖资源加工重点实验室(广西科技大学)

基金: 国家自然科学基金(31660250),广西科学基金(2015GXNSFBA139068)

分类号: Q78;Q55

DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.10.030

页码: 179-183

总页数: 5

文件大小: 1318K

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