傅佳罗永标张旭明叶晶晶张伟军陈仙明(通讯作者)
(浙江海翔川南药业有限公司浙江台州317016)
【摘要】目的：建立联苯双酯原料药残留溶剂的测定方法。方法：采用DB-624毛细管色谱柱、顶空进样法，以FID检测。结果：甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、DMF分别在3.0～4524、2.5～7554、1.3～954、3.0～90和17.7～1326ppm范围内线性关系良好，甲醇回收率在96.72%～104.77%之间，乙醇回收率在96.46%～103.97%之间，二氯甲烷回收率在94.31%～104.39%之间，氯仿回收率在94.63%～101.00%之间，DMF回收率在88.23%～112.94%之间。结论：所建立方法专属性好,简便准确,可用于联苯双酯原料药残留溶剂的限度检查。
【关键词】气相色谱法联苯双酯残留溶剂甲醇乙醇二氯甲烷氯仿DMF
【中图分类号】R927【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2014）13-0349-02
联苯双酯是治疗病毒性肝炎和药物性肝损伤引起转氨酶升高的常用药物。以往认为它具有保护肝细胞，增加肝脏的解毒功能的药理作用。尤其是其降酶作用，效果明显，且毒性低，副作用小。《中国药典》2010年版[1]收载了该原料药，没有规定残留量的检查。本生产工艺中使用了有机溶剂甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿和DMF，本文参考文献[2-4]采用顶空气相色谱法对联苯双酯原料药进行检测，结果准确可靠。
1仪器与试药
1.1仪器安捷伦7890A气相色谱仪，7697A顶空进样仪
1.2试药联苯双酯(浙江海翔川南药业有限公司，批号：20130415、20130416、20130417)。甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、DMF和DMSO均为色谱纯试剂。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：DB-624毛细管柱(30m×0.53mm×3m)；气化室：250℃；检测器：250℃；起始温度：40℃，保留5min，以5℃/min升温至90℃，再以30℃/min升温至240℃，保持5min；氮气流速：4.0mL/min；顶空炉温：105℃，平衡时间：20min。
2.2溶液配制
2.2.1空白溶液：(二甲基亚砜：水=4：1)的混合溶液。
2.2.2标准溶液：准确称取300mg甲醇、500mg乙醇、60mg二氯甲烷、88mgDMF、6mg氯仿置于盛有50mL混合溶液的10OmL容量瓶中，以混合溶液稀释至刻度，混匀作为贮备液；准确移取10mL贮备溶液于100mL容量瓶中，以混合溶液稀释至刻度，混匀。准确移取5mL于20mL顶空瓶中，密塞，即得标准溶液。
2.2.3样品溶液：准确称取1g样品于10mL容量瓶中，以混合溶液稀释至刻度，混匀。准确移取5mL于20mL顶空瓶中，密塞，即得样品溶液。
2.3专属性试验进样空白溶液、标准溶液，空白对检测无干扰，各溶剂峰间的分离度均大于1.5，见图1。
1：甲醇2：乙醇3：二氯甲烷4：氯仿5：DMF
2.4精密度试验分别进样空白溶液1份、标准溶液6份，依法测得甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿和DMF峰面积RSD分别为0.9%、0.9%、1.3%、1.1%、2.8%。
2.5定量限和最小检测限根据稀释法，稀释各溶剂峰的信噪比约为10，测得甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿和DMF的定量限(LOQ)分别为3.0ppm、2.5ppm、1.3ppm、3.0ppm、17.7ppm；稀释后各溶剂峰的信噪比约为3，即得各溶剂的最小检测限(LOD)分别为0.9ppm、0.8ppm、0.4ppm、0.4ppm、5.3ppm。
2.6线性试验移取贮备溶液配制成浓度分别为LOQ、50%、80%、100%、120%、150%规定限度的线性标准溶液，依次进样一份空白溶液，三份各线性标准溶液。以溶液浓度为x轴，溶液峰面积为y轴分别计算线性方程及相关系数。本方法中甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿和DMF分别在3.0～4524、2.5～7554、1.3～954、3.0～90和17.7～1326ppm范围内线性关系良好。结果见表1。
表1各溶剂曲线方程及相关系数
2.7回收率试验配制三份供试品溶液，另外分别配制标准规定限度的50%、100%和150%溶液各三份，每份标准规定限度溶液分别配制成三份系列加入试验溶液。依次进样空白溶液一针、供试品溶液三针、标准溶液三针、各加入试验溶液九针。结果甲醇回收率在96.72%～104.77%之间，乙醇回收率在96.46%～103.97%之间，二氯甲烷回收率在94.31%～104.39%之间，氯仿回收率在94.63%～101.00%之间，DMF回收率在88.23%～112.94%之间，表明该方法准确度良好。
2.8样品检测连续检测三批联苯双酯原料药样品，结果见表2。
表2联苯双酯原料药残留溶剂检测结果
3讨论
3.1溶剂的选择本品几乎不溶于水，待测样品中有二氯甲烷、氯仿和DMF，既有不溶于水的，也有沸点高的，还有限度低的，故采用混合溶剂；保证样品能溶解且各溶剂灵敏度高，回收率好。
3.2色谱柱的选择根据本产品残留溶剂的种类特点，采用DB-624色谱柱已能满足实验要求。
3.3耐受性试验在稍调整分析条件情况下，如分别轻微改变柱流速、柱温和顶空进样器的炉温、顶空瓶平衡时间等，进标准溶液一针，各溶剂分离度均能达到要求，说明该分析方法仍然有效。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：二部.2010版.北京：中国医药科技出版社，2010：922
[2]龚爱琴.顶空毛细管气相色谱法测定氟苯尼考中残留溶剂[J].海峡药学，2011，23(7)：79-81
[3]梁丽娟，黄薇.气相色谱法测定瑞格列奈原料药的有机溶剂残留量[J].天津药学，2012，24(5)：6-8
[4]浦尤彬，沈勇建，何燕.顶空毛细管气相色谱法测定富马酸喹硫平中残留溶剂[J].检验医学与临床，2011，08(17)：2061-2062