链霉蛋白酶消化时长对气液相培养原代小鼠气道上皮细胞的影响

链霉蛋白酶消化时长对气液相培养原代小鼠气道上皮细胞的影响

论文摘要

目的观察链霉蛋白酶消化时长对气液相(ALI)培养原代小鼠气道上皮细胞(MTEC)数量、存活率及纯度的影响。方法从4组小鼠获得并培养的原代MTEC,分别进行链霉蛋白酶消化6、12、18、24h,比较4组细胞的数量、存活率及纯度。结果链霉蛋白酶消化6、12、18、24h,分别获得细胞(0.57±0.03)、(1.05±0.22)、(1.13±0.22)、(1.28±0.39)×105个,差异有统计学意义(P<0.05);细胞存活率分别为(97.65±2.26)%、(96.83±0.76)%、(93.46±2.32)%、(91.56±2.99)%,差异有统计学意义(P<0.05),其中6h组、12h组均明显高于18h组、24h组(均P<0.05);细胞纯度分别为(69.6±22.6)%、(90.4±5.1)%、(90.3±2.7)%、(88.7±1.9)%,差异有统计学意义(P<0.05),其中12h组、18h组均明显高于6h、24h组(均P<0.05)。结论 ALI培养原代MTEC时,链霉蛋白酶消化12h可获得最优的细胞数、细胞存活率及细胞纯度。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 培养基
  •   1.3 包被半渗透基底膜
  •   1.4 分离原代MTEC
  •   1.5 采集MTEC
  •   1.6 流式细胞术检测
  •   1.7 MTEC孵育
  •   1.8 ALI条件下诱导MTEC分化
  •   1.9 免疫组化染色
  •   1.1 0 气道上皮细胞的鉴定
  •   1.1 1 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 链霉蛋白酶消化不同时长获得的细胞数
  •   2.2 链霉蛋白酶消化不同时长细胞存活率比较
  •   2.2 链霉蛋白酶消化不同时长细胞纯度比较
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 高璇,徐菲,许先荣

    关键词: 上皮细胞,细胞培养方法,培养基,链霉蛋白酶,消化时长

    来源: 浙江医学 2019年13期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 浙江省立同德医院呼吸内科,浙江大学医学院附属第一医院内科病房

    分类号: R329.2

    页码: 1363-1366+1459

    总页数: 5

    文件大小: 2484K

    下载量: 102

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