猪瘟病毒RT-LAMP检测方法的建立及初步应用

论文摘要

为建立猪瘟病毒（CSFV）可视化逆转录环介导等温核酸扩增（RT-LAMP）快速检测方法,从GenBank下载不同基因亚型CSFV分离株全基因序列,通过引物设计, RT-LAMP反应体系优化,建立了检测CSFV的RT-LAMP方法。该方法特异性和敏感性好,对CSFV cDNA最低检测限量为1.0×10-7ng/μL,不能检测到非目标病毒核酸。对临床送检的100份疑似CSFV感染样品进行检测,检出13份CSFV阳性,其中10份和RT-PCR检测结果一致,另外3份的RT-PCR检测结果呈阴性,同时对比发现RT-LAMP方法的敏感性比常规RT-PCR方法高100倍。本研究为CSFV检测提供了可供选择的方法。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病毒株和临床样品
•   1.2 主要试剂
•   1.3 病毒核酸提取和cDNA合成
•   1.4 引物设计与合成
•   1.5 反应体系构建
•   1.6 扩增特异性及产物检测
•   1.7 特异性检测
•   1.8 敏感性检测
•   1.9 临床样品检测
• 2 结果
•   2.1 RT-LAMP检测方法的建立
•   2.2 扩增产物检测
•   2.3 特异性检测
•   2.4 灵敏性检测
•   2.5 临床样品检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王韦华,刘桂梅,吴奇强,郭抗抗

关键词: 猪瘟病毒,反转录环介导等温扩增,临床样品检测

来源: 中国动物检疫 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 渭南职业技术学院,渭南市动物疫病预防控制中心,西北农林科技大学动物医学院

基金: 陕西省农业科技创新转化项目(NYKJ-2015-021)

分类号: S852.651

页码: 68-75

总页数: 8

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