实时可视化LAMP快速检测高危亚型HPV病毒方法的建立

论文摘要

目的:建立实时可视化LAMP快速检测高危亚型人乳头瘤病毒的方法。方法:基于HPV病毒基因中的L1区保守序列,构建重组标准质粒。应用钙黄绿素作为可视化荧光染料,通过环介导等温扩增技术手段,检测结果可由肉眼观测和荧光检测信号来判读。结果:应用LAMP技术检测HPV病毒,大部分高危亚型的检测限可达到103copies/μL,其中HPV16,HPV33,HPV59,HPV73亚型灵敏度可达101copies/μL;15种高危亚型样品的检测结果显示不存在交叉反应,表明其特异性良好;针对318例临床样本,LAMP的阳性检出率达到79.56%(253/318),与反向杂交试剂盒检测结果基本持平。结论:本研究针对15种高危亚型HPV病毒,建立高效快捷的实时可视化LAMP检测方法,其临床样本符合率高达91.20%,因而具有广泛的市场推广前景和潜在的临床应用意义。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1．1材料
•   1．2引物设计
•   1．3病毒DNA模板提取
•   1．4实时可视化LAMP分析方法的建立
•   1．5实时可视化LAMP方法的特异性和灵敏度
•   1．6实际样品检测
• 2 结果与分析
•   2．1实时可视化LAMP体系优化
•   2．2实时可视化LAMP特异性
•   2．3实时可视化LAMP灵敏度
•   2．4临床样本检测结果的比对分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 俞焕腾,马骉,方结红,林委,张明洲

关键词: 计量,实时可视化,快速检测,人乳头瘤病毒

来源: 中国计量大学学报 2019年02期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅱ辑,基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,妇产科学,肿瘤学

单位: 中国计量大学生命科学学院,浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室

基金: 国家重点研发计划项目(No.2017YFF0210203,2018YFF0215205),浙江省公益性技术应用研究(分析测试)计划项目(No.LGC19C200006)

分类号: R737.33;Q503

页码: 248-254

总页数: 7

文件大小: 280K

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