肝左、中叶胆管结扎联合二乙基亚硝胺构建胆管癌小鼠模型的研究

肝左、中叶胆管结扎联合二乙基亚硝胺构建胆管癌小鼠模型的研究

论文摘要

目的运用二乙基亚硝胺(DEN)联合肝左、中叶胆管结扎方法,制作可供研究、重复性高、模拟人胆管癌发生过程的小鼠模型。方法将120只6~7周龄Balb/c雄性小鼠制作成动物实验模型:DLD组(n=30,DEN+胆管结扎)、BLANK组(n=20,空白对照)、DEN组(n=20,仅DEN处理)、LMBDL组(n=30,胆管结扎)、DSO组(n=20,DEN+假手术)。分别于造模后0、2、4、8、12、16、20、24周时,记录和比较各组小鼠体质量、肝脏外观差异、存活率、成瘤率;采用苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学法检测各组成瘤结节或未成瘤小鼠肝脏组织中胆管上皮标志物AQP-1、CK19的表达,明确成瘤结节的细胞来源。结果 (1)BLANK组与LMBDL组小鼠的体质量差异无统计学意义(t=0.572,P=0.611),DEN组体质量显著低于BLANK组(t=3.382,P=0.002),DLD组体质量均低于DEN组及DSO组(t=2.022、2.331,P=0.019、0.021),单纯胆管结扎对小鼠体质量变化无显著影响,而DEN给药以及联合部分胆管结扎均对小鼠体质量产生影响。(2)DEN、DLD、DSO、LMBDL组的存活率与BLANK组相比,差异无统计学意义(P=0.058、0.013、0.025、0.692),胆管结扎手术与DEN不会增加小鼠死亡率。(3)BLANK、DEN、LMBDL组小鼠均未成瘤,DSO、DLD组的成瘤率分别为8.3%(1/12)和47.1%(9/17),DLD组的成瘤率高于其他四组(均P<0.01),各组均未见远处转移瘤,胆管结扎联合DEN可提高小鼠成瘤率。(4)CK19及AQP-1在DLD组小鼠成瘤结节中表达均为强阳性,结节为胆管细胞来源。结论低剂量DEN联合肝左、中叶胆管结扎可成功构建胆管癌模型,该模型具有操作简单、成瘤率及存活率高、符合人胆管癌发生发展过程等特点。

论文目录

  • 材料与方法
  •   一、材料
  •   二、动物模型制作及分组
  •   三、观察指标
  •   四、统计学处理
  • 结果
  •   一、各组小鼠体质量变化
  •   二、造模小鼠不同时间点的生存分析
  •   三、肝脏外观情况及成瘤率
  •   四、小鼠成瘤结节或肝脏组织中CK19、AQP-1的表达情况
  • 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张大伟,袁晓鹏,李海燕,李宗晏,梁浩,黄镇辉,蒋小峰,薛平

    关键词: 胆汁淤积,二乙基亚硝胺,胆管肿瘤,模型,动物

    来源: 中华普通外科学文献(电子版) 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 基础医学,肿瘤学

    单位: 广州医科大学附属第二医院肝胆外科,广州医科大学附属第五医院普通外科,中山大学附属第六医院乳腺外科

    基金: 国家自然科学基金资助项目(81602109,81602331),广东省科技计划项目(2016A020215216,2016A020215038),广州市科技计划项目(201707010469)

    分类号: R735.8;R-332

    页码: 430-434

    总页数: 5

    文件大小: 1710K

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