猪β防御素3表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

论文摘要

根据Gen Bank上发表的猪β防御素3（p BD3）基因的序列,通过生物学软件预测其成熟肽序列。提取猪舌组织RNA,设计引物,通过PCR的方法扩增得到约150 bp的p BD3成熟肽基因序列,构建其原核表达载体p ETp BD3,并获得工程菌株BL21-pET-p BD3。IPTG诱导表达后,比对照多表达了1条约16 k D的蛋白条带,通过免疫蛋白印记说明所表达的蛋白为带有His·Tag的融合蛋白,证明p BD3成功表达。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株、质粒
•     1.1.2 主要试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 pBD3基因的分析
•     1.2.2 引物设计合成
•     1.2.3 猪β防御素3基因的克隆
•     1.2.4 克隆载体p GEM-T-fpBD3的构建和鉴定
•     1.2.5 表达载体p ET-p BD3的构建和鉴定
•     1.2.6 BL21-pET-pBD3工程菌的诱导表达
•     1.2.7 诱导表达蛋白的鉴定
• 2 结果与分析
•   2.1 全长p BD3基因的分析
•   2.2 fpBD3基因的扩增
•   2.3 克隆载体p GEM-T-fpBD3的构建和鉴定
•   2.4 表达载体p ET-p BD3的构建和鉴定
•   2.5 p BD3融合蛋白表达
•   2.6 p BD3融合蛋白表达鉴定
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵新豪,林夏清,张坤,王梦云,李春丽

关键词: 猪防御素,原核表达载体,表达

来源: 河南农业大学学报 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 河南农业大学牧医工程学院,郑州大学药学院

基金: 国家自然科学基金项目(31072015)

分类号: Q78;S852.4

DOI: 10.16445/j.cnki.1000-2340.2019.03.008

页码: 374-378+414

总页数: 6

文件大小: 2967K

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