氯喹抑制寨卡病毒在vero细胞中感染复制的实验研究

论文摘要

目的探究氯喹对寨卡病毒在vero细胞上感染复制的抑制效果,寻找一种可预防和治疗寨卡病毒感染的药物。方法寨卡病毒分别感染用不同浓度（0、5、10和20μmol/L）的氯喹预处理的对数生长期vero细胞,然后通过显微镜观察、免疫荧光、免疫印迹分析等方法检测氯喹对寨卡病毒基因表达和复制的抑制作用。结果显微镜观察发现,与无寨卡病毒感染的细胞相比,分别加入5、10和20μmol/L的氯喹处理寨卡病毒感染的vero细胞72 h后发现,细胞脱落、死亡等现象逐渐消失,寨卡病毒的致细胞病变效应明显减弱。间接免疫荧光结果显示,感染复数（MOI）=1的寨卡病毒感染vero细胞48 h后,几乎所有细胞都被染成红色,显示E抗原阳性,随着氯喹浓度的增加,荧光强度逐渐减弱,当加入20μmol/L的氯喹后,荧光基本消失了,氯喹很好地抑制了寨卡病毒E蛋白的表达,且这种抑制效应具有剂量依赖性。免疫印迹法检测显示,用MOI=1的寨卡病毒感染vero细胞48 h后,在细胞中能够检测到NS5蛋白的表达,而随着氯喹加入浓度的增加,寨卡病毒NS5蛋白的表达逐渐降低,特别是当氯喹的浓度达到20μmol/L后,抑制效果更明显。qRT-PCR结果显示,5μmol/L的氯喹即可抑制上清中病毒产量的90%（P<0.01）。结论氯喹能够抑制寨卡病毒在vero细胞中的感染和复制,表明氯喹可作为一种治疗寨卡病毒感染的潜在药物。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病毒株与细胞株
•   1.2 主要药品与试剂
•   1.3 感染复数 （multiply of infection, MOI） 的测定
•   1.4 细胞病变观察 （cytopathic effect, CPE）
•   1.5 免疫荧光 （immunofluorescence assay, IFA） 检测黄病毒抗原
•   1.6 免疫印迹 （Western-blot） 分析
•   1.7 上清中病毒产量的测定
•   1.8 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 氯喹对寨卡病毒感染vero细胞后致细胞病变效应的抑制作用
•   2.2 氯喹对寨卡病毒感染vero细胞后E蛋白表达的抑制作用
•   2.3 氯喹对寨卡病毒感染vero细胞后病毒NS5蛋白表达的抑制作用
•   2.4 氯喹对寨卡病毒感染vero细胞后上清中病毒产量的抑制作用
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 姚向阳,黄璐,徐雪,况二胜

关键词: 寨卡病毒,氯喹,复制,细胞

来源: 热带医学杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 中山大学中山医学院人类病毒学研究所,江门市妇幼保健院

基金: 广东省科技计划项目(2014A020210005)

分类号: R373

页码: 409-412+421+528

总页数: 6

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