从Wnt通路抑制因子表观遗传修饰调控研究重楼皂苷Ⅶ抗结直肠癌机制

论文摘要

目的从Wnt通路抑制因子表观遗传修饰调控研究重楼皂苷Ⅶ（PPLVⅡ）抗结直肠癌机制。方法实验分三组,空白对照组、结直肠癌模型组和PPLVII治疗组。采用TUNEL法检测小鼠的细胞凋亡情况,TOPglow/FOPglow TCF试剂盒用于检测Wnt信号传导途径活性,应用双抗体夹心法ELISA（sandwich ELISA）检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、Bax、Bcl-2以及Cdk-4、Cdk-6、Cyclin D1和p21的表达,用免疫蛋白印迹检测细胞中的β-连环蛋白,实时荧光定量PCR检测干细胞相关基因OCT4、SOX2、c-Myc和TCF4的表达,检测lgG、β-catenin和H3k9Ac与MMP-9启动子的结合。结果 TUNEL免疫组织化学分析与对照组相比,PPLVII诱导肿瘤细胞凋亡;PPLVII治疗后cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-9和Bax表达增加,而Bcl-2则降低,差异有统计学意义（P <0.05）;Cyclin D1、CDK-4、CDK-6表达下降,而p21表达上调,差异有统计学意义（P <0.01）;PPLVII干预治疗后检测治疗组的TOP/FOP比率降低,差异有统计学意义（P <0.05）;在PPLVII进行干预治疗后β-连环蛋白灰度值下降,差异有统计学意义（P <0.05）;PPLVII进行干预治疗后OCT4、SOX2、c-Myc和TCF4相关基因的表达下调,差异有统计学意义（P <0.05）。结论重楼皂苷Ⅶ干预治疗通过降低Wnt通路抑制因子的表达对结直肠癌有一定的改善和治疗作用。

论文目录

• 资料与方法
•   一、实验动物
•   二、建立结直肠癌小鼠模型和分组
•   三、观测指标及方法
•     1.
•     2. TUNEL免疫组织化学分析：
•     3. 免疫蛋白印迹分析检测β-连环蛋白的表达：
•     4. 应用双抗体夹心法ELISA（sandwich ELISA）检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、Bax、Bcl-2以及Cdk-4、Cdk-6、CyclinD1和p21的表达：
•     5. 流式细胞仪检测相关蛋白变化：
•     6. TOP/FOP检测：
•     7. 实时荧光定量PCR检测OCT4、SOX2、c-Myc和TCF4相关基因的表达：
•   四、统计学分析
• 结果
•   一、TUNEL免疫组织化学分析
•   二、PPLVII影响细胞凋亡相关蛋白的表达
•   三、PPLVII影响细胞周期相关蛋白的表达
•   四、TOP/FOP测定Wnt信号通路活性
•   五、β-连环蛋白灰度值检测结果
•   六、PCR相关基因表达检测结果
• 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈鸣旺,高舒影,刘海光,唐清珠,罗宏标

关键词: 结直肠肿瘤,通路抑制因子,重楼皂苷

来源: 中华结直肠疾病电子杂志 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 郴州市第一人民医院肛肠外科

分类号: R735.35

页码: 574-579

总页数: 6

文件大小: 1349K

下载量: 120