辽宁碱蓬SlNAC4转录因子的基因克隆及原核表达

辽宁碱蓬SlNAC4转录因子的基因克隆及原核表达

论文摘要

辽宁碱蓬(Suaeda liaotungensis)是一种典型的盐生植物,存在着耐盐适应的复杂机制,本研究根据辽宁碱蓬转录组测序结果,利用反转录PCR、RACE技术获得了辽宁碱蓬SlNAC4转录因子基因的cDNA序列。根据测序结果和生物学信息分析,SlNAC4基因(GenBank登录号:KJ933531)全长1450 bp,其中开放阅读框为996 bp,编码331个氨基酸,含有NAM结构域。将其编码区与表达载体pGEX-4T-1相连接,转化到Rosetta菌株中,在大肠杆菌中成功表达出了SlNAC4蛋白。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 植物材料
  •     1.1.2 质粒和菌株
  •     1.1.3 实验试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 实验方法
  •     1.2.1 RNA提取及cDNA合成
  •     1.2.2 SlNAC4基因EST序列验证
  •     1.2.3 SlNAC4基因3′RACE 扩增
  •     1.2.4 SlNAC4基因的克隆
  •     1.2.5 SlNAC4基因的生物信息学分析
  •     1.2.6 原核表达SlNAC4蛋白
  • 2 实验结果
  •   2.1 辽宁碱蓬叶片总RNA提取
  •   2.2 SlNAC4基因EST序列验证
  •   2.3 SlNAC4基因 3′RACE
  •   2.4 SlNAC4基因的克隆
  •   2.5 SlNAC4基因的生物信息学分析
  •   2.6 原核表达SlNAC4蛋白
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 柳凯,宿明星,王宏飞,李秋莉

    关键词: 转录因子,基因克隆,原核表达

    来源: 中国野生植物资源 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 辽宁师范大学生命科学学院辽宁省植物生物技术重点实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(31340052),辽宁省教育厅项目(L201683655)

    分类号: Q943.2

    页码: 35-39

    总页数: 5

    文件大小: 1174K

    下载量: 110

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