合成抗原论文_张海棠,王晓斐,职爱民,王亚楠,王自良

导读:本文包含了合成抗原论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:抗原,抗体,免疫,霉素,毒素,羰基,黄曲霉。

合成抗原论文文献综述

张海棠,王晓斐,职爱民,王亚楠,王自良[1](2019)在《B族黄曲霉毒素抗原合成设计及特异性、广谱性抗体制备与特性分析》一文中研究指出为制备B族黄曲霉毒素(BGAFs)特异性强、广谱性好的抗体,本研究根据黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的分子结构和活性位点,采用肟化活泼酯法(OAE)、氨甲基化法(MOA)、混合酸酐法(MA)、半缩醛法(SA)、环氧化物法(EP)和烯醇醚衍生物法(EED)6种方法合成BGAFs人工抗原AFB_1-BSA,并通过UV和SDS-PAGE进行鉴定;采用AFB_1-BSA免疫新西兰白兔制备多克隆抗体(AFB_1 pAb),间接ELISA检测AFB_1 pAb效价,间接竞争ELISA(icELISA)分析其敏感性,交叉反应试验(CR)分析其特异性和广谱性。结果表明,AFB_1-BSA合成成功,在BGAFs抗原合成的6种方法中OAE效果最好,AFB_1与BSA的分子结合比为8.46∶1;AFB_1 pAb的间接ELISA效价为1∶(1.28×10~4),IC_(50)为10.32μg·L~(-1),与AFB_2、AFG_1、AFG_2、AFM_1、AFM_2的CR分别为75.21%、44.13%、14.72%、16.36%、1.44%。本研究制备出了高效价、敏感、特异、广谱的AFB_1 pAb,为BGAFs免疫检测方法的建立奠定了物质和技术基础。(本文来源于《核农学报》期刊2019年12期)

常向彩,马明,冉丹丹[2](2019)在《酸性红73人工抗原的合成与鉴定》一文中研究指出为进一步制备酸性红73新型人工抗原,试验采用N,N-羰基二咪唑(CDI)法合成酸性红73的免疫原和包被原,经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定偶联成功,酸性红73与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OA)的偶联比分别为9∶1和5∶1。免疫后所得兔源多克隆抗体,采取双向琼脂扩散实验和方阵滴定法确定包被抗原和抗体的最适工作浓度分别为1∶4 000、1∶8 000。(本文来源于《贵州畜牧兽医》期刊2019年04期)

司艳芳,岳锋,李鹏,郭东光,朱艳平[3](2019)在《西马特罗完全抗原的合成和多克隆抗体的制备》一文中研究指出西马特罗(Cimaterol,CIM)也叫做喜马特洛,塞曼特罗。属于β-受体激动剂的一种,临床上可以治疗支气管炎等疾病,但过量服用会引起人体中毒。西马特罗属于苯胺型β-受体激动剂中的一种。极性中等,k Pa值在9.5左右,多为白色晶体结构[1]。通常能溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇等溶剂。不同的PH值也会影响其溶解状态。目前国内外一些无良养殖场将其添加在猪饲料中,以增加猪肉蛋白质量,减少脂肪量。研究目的:鉴于免疫学检测技术的特点,ELISA现在被作为初步筛选一些药物残留的检测方法。利用ELISA检测时,抗体质量的好坏与否对检测结果至关重要,然而得到特异性高的抗体又取决于高质量的免疫原。针对我国的食品安全问题,迫切的需要一种快捷简便的药残检测体系,为食品检测体系的健全提供支持。材料方法:影响人工抗原免疫原性的主要因素包括载体蛋白的性质、半抗原的分子空间结构、间隔臂的长度和分子结合比等[2]。对于带有氨基的半抗原与载体蛋白的偶联一般采用重氮化法、戊二醛和EDC法,有研究证实,重氮化法适用于芳香胺而GA法适合于脂肪胺的报道[3]。本研究根据CIM的结构综合各种方法的利弊之后采用重氮化法进行完全抗原的合成。用UV、SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS叁种方法同时鉴定。用偶联成功的西马特罗-牛血清白蛋白(CIM-BSA)完全抗原,抗原50ug/只,与佐剂等体积乳化至"油包水"的状态,然后通过采用背部皮下多点注射的方法注射入兔子体内。先后进行叁次免疫,每次免疫间隔14-16天。在第叁次免疫后的第10天左右进行耳缘静脉采血。采用ELISA的方法对兔子血清效价进行检测。用包被液稀释偶联成功的西马特罗-鸡卵清白蛋白(CIM-OVA)至5ug/ml,加入至相应的酶标板,100ul/孔,4度包被过夜,次日用PBST洗板叁次并排干,用5%脱脂奶粉封闭2h以上。相同的方法洗板,排干后将取得的血清倍比稀释加入对应的孔,37℃条件下静置孵育0.5h后相同的方法洗板,排干后加入1:5000的羊抗兔-Ig G(HRP),最后加入TMB显色液,每孔100ul,用2MH2So4溶液终止显色反应,放在酶标仪中读数,以OD450约为1.00对应孔的血清的最大稀释倍数作为判断多抗血清效价的依据。结果:成功合成了完全抗原并采用叁种方法验证,免疫动物后获得了效价为1:204800的血清。说明此次成功的制备了完全抗原并达到了良好的免疫效果。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27)

何丹,刘媛,李先保,龚航,王丽[4](2019)在《微囊藻毒素LR免疫原及包被抗原的合成与鉴定》一文中研究指出微囊藻毒素LR(MC-LR)分子量小于1 000 u,为半抗原,需要与载体蛋白偶联后才能刺激免疫应答用于抗体制备。本研究利用碳二亚胺法将MC-LR分别与钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,获得免疫抗原(MC-KLH)和包被抗原(MC-BSA)。采用紫外扫描光谱、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)等3种方法对2种人工抗原进行鉴定,并对小鼠进行免疫。用间接非竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)和竞争ELISA测定了抗血清效价和敏感度。结果表明,紫外扫描光谱法可观察到2种人工抗原的紫外吸收谱与载体蛋白相比发生改变。通过SDS-PAGE法可以观察到MC-BSA分子量比BSA增大。另外质谱法测定的MC-BSA的相对分子量为76 515.84,计算得到的MC-LR与BSA的偶联比为10∶1。MC-KLH免疫小鼠后,抗血清效价最高达到1∶32 000倍,MC-LR对鼠多抗血清的抑制中浓度(I_(50))为0.53μg/mL。成功合成了MC-LR的免疫原和包被原为其单克隆抗体的制备奠定了基础。还比较了3种鉴定方法的适用性和优缺点,为其他人工抗原的鉴定方法提供了有益的参考。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年09期)

徐冰[5](2019)在《基于前列腺膜抗原的肿瘤靶向喜树碱前药设计、合成及活性评价》一文中研究指出研究背景与目的:癌症是严重威胁人类健康和生命的重大疾病之一,其致病因素复杂、发病率和死亡率高。化疗仍是目前临床治疗恶性肿瘤的主要手段之一。常规的化疗药大多存在靶向性差、毒副作用大、生物利用度低和耐药性的缺陷,从而导致临床疗效不佳且患者生存质量差。因此寻找新型靶向抗肿瘤药物具有非常大的临床价值和意义。喜树碱是一种从中药喜树中分离得到的天然抗肿瘤生物碱,其在体内外对胃癌、结直肠癌和膀胱癌等多种恶性肿瘤均表现出较好的抗肿瘤效果,以喜树碱为母体开发了多种临床应用广泛的广谱抗癌药物,但该类药物靶向性差,在临床上常引起呕吐、腹泻、骨髓抑制以及出血性膀胱炎等一系列毒副反应,此外该类药物还存在水溶性差和稳定性差的缺陷。前列腺膜抗原(Prostate specific membrane antigen,PSMA)是位于前列腺上皮细胞表面的Ⅱ型跨膜糖蛋白。研究表明其在前列腺组织和多种非前列腺实体瘤的血管内皮细胞特异性表达,在正常组织中不表达。此外PSMA还具有叶酸水解酶(FOLH)、谷氨酸竣肽酶Ⅱ(GCPⅡ)及N-乙酰基化α-连接的酸性二肽酶(NAALA-Dase)等多种蛋白酶的活性,PSMA是目前肿瘤诊断和肿瘤抗血管治疗的良好靶点和研究热点。本研究在前药原理的指导下,首次以PSMA的特异性水解寡肽底物作为肿瘤靶向配体,设计并合成一系列肿瘤靶向喜树碱前药;利用体外肿瘤细胞模型、重组人PSMA和体内裸鼠移植瘤模型,系统地评价前药的体内外抗肿瘤活性、靶向性和毒性,以期获得高效、低毒、靶向性强、作用机制明确且有临床应用前景的新型喜树碱先导化合物,同时为其它细胞毒类药物的二次开发提供一个新的思路。研究内容:本研究在前药原理指导下,以PSMA的特异性水解底物Asp-Glua*Glu*Glu*Glu(WT-H)、Asp-Glu*Glu*Asp-Glu(HT-H)和Glu*Glu*Glu*Asp-Glu(HT-J)(“*”表示γ-谷酰基连接;“-”表示α-谷酰基连接)作为肿瘤靶向配体,将其与喜树碱20位羟基通过不同的连接片段连接,设计并合成12种全新的水溶性肿瘤靶向喜树碱前药CPT-X;同时为了更好地研究前药的PSMA靶向性,我们合成8种前药CPT-X的PSMA代谢产物CPT-MX;采用PSMA过表达的人前列腺癌LNCaP-FGC(PSMA+)细胞和多种PSMA阴性表达的肿瘤细胞(MCF-7、HepG2、Hela、PC-3和DU145)和人正常肝细胞(L02)评价CPT-X和CPT-MX的细胞毒活性和PSMA靶向性;采用流式细胞分析和激光共聚焦显微镜进一步验证前药CPT-W12的细胞毒选择性和PSMA靶向性;利用重组人PSMA和人乳腺癌细胞MCF-7裸鼠移植瘤模型,采用高效液相色谱法和小动物活体成像系统,评价前药CPT-W12的体外靶向释放和体内靶向分布特性;采用BALB/c小鼠评价前药CPT-W12在小鼠体内的药代动力学特性;采用人乳腺癌细胞MCF-7裸鼠移植瘤模型评价前药CPT-W12的体内抗肿瘤活性和安全性;采用免疫组化研究前药CPT-W12对肿瘤组织中Ki-67、Caspase-3、Bcl-2和MMP-2蛋白表达情况的影响,探讨其可能的抗肿瘤作用机制。研究结果:(1)成功设计并合成了 12种全新的水溶性肿瘤靶向喜树碱前药CPT-X和8种PSMA水解产物CPT-MX。(2)体外细胞毒活性和PSMA靶向性研究表明前药CPT-X对各种肿瘤细胞均表现出一定的增殖抑制活性,但活性显着低于原药CPT;大部分前药CPT-X对PSMA过表达的人前列腺癌细胞LNCaP-FGC的增殖抑制活性显着强于PSMA阴性表达的肿瘤细胞MCF-7、PC-3、DU145、HepG2和Hela,同时对人正常肝细胞LO2毒性较低,表现出较好的细胞毒选择性和PSMA靶向性;流式细胞分析和激光共聚焦荧光观察进一步验证了前药CPT-W12良好的细胞毒选择性和PSMA靶向性,其能显着诱导LNCaP-FGC(PSMA+)细胞凋亡,而对HepG2(PSMA-)凋亡诱导活性较弱;同时CPT-W12能够有效地在LNCaP-FGC(PSMA+)细胞内聚集,而在HepG2(PSMA-)聚集较少。(3)体内外稳定性、靶向性和初步药代动力学研究表明前药CPT-W12具有较好的PSMA敏感性和缓冲盐稳定性,其能被rh PSMA特异性水解;CPT-W12还具有良好的体内靶向性,其能有效地在肿瘤部位聚集和滞留;与喜树碱相比,其体内半衰期显着延长。(4)体内抗肿瘤活性评价表明前药CPT-W12对人乳腺癌细胞MCF-7裸鼠移植瘤具有明显的抑制作用;低剂量CPT-W12(110mg·kg-1)、中剂量CPT-W12(30mg·kg-1)和高剂量CPT-W12(60mg·kg-1)组肿瘤抑制率分别为51.67%、57.78%和65.00%,中剂量CPT-W12组抑瘤率和阳性药伊立替康组(10mg·kg-1)相当,高剂量CPT-W12组抑瘤率优于伊立替康组。血液生化和组织病理学研究发现前药CPT-W12能显着降低喜树碱的肾毒性,即使CPT-W12给药剂量达到伊立替康的6倍,仍未发现明显的系统毒性。(5)体内抗肿瘤机制研究表明前药CPT-W12可以有效降低Ki-67和Bcl-2蛋白表达水平,升高Caspase-3蛋白的表达水平,抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡;此外CPT-W12还能通过降低MMP-2的表达,抑制肿瘤的转移和肿瘤血管的新生。研究结论:本论文以PSMA作为靶点,在前药原理的指导下,成功设计并合成了12种肿瘤靶向的水溶性喜树碱前药CPT-X;前药CPT-X在体外表现出较强的细胞毒选择性、PSMA靶向性和稳定性;同时CPT-X在体内具有较强的抗肿瘤活性、肿瘤靶向性和安全性,其能有效地在肿瘤部位聚集并发挥抗肿瘤作用,其抗肿瘤活性与阳性药伊立替康相当,但是无明显的系统毒性;前药CPT-X成功克服喜树碱水溶性、稳定性及靶向性差的缺陷,同时显着延长了喜树碱的半衰期。本研究证明了基于PSMA的肿瘤靶向前药设计策略是有效、可行的,本研究有望为传统细胞毒药物的研发提供一个新思路,特别是中药中的一些难溶性的细胞毒药物;同时有望为临床乳腺癌等实体瘤的治疗提供一种新的分子靶向药物。(本文来源于《北京中医药大学》期刊2019-05-01)

余华,叶健强,严玉宝,谢晶,胡娟[6](2019)在《恩拉霉素人工抗原合成工艺的优化》一文中研究指出为制备恩拉霉素(Enramycin)抗体及建立恩拉霉素残留检测方法提供参考,采用L9(34)正交试验设计优化恩拉霉素-牛血清白蛋白人工免疫抗原(Er-BSA)的合成工艺条件,通过紫外光谱对合成效果进行鉴定。结果表明:最佳合成反应条件为反应物质量比(mBSA∶mER)为1∶1,反应溶剂比(VPBS∶V二氧六环)为2∶1,pH 6.7和反应温度28℃,其合成物的偶联率为25.70。反应物质量比和反应温度是影响反应的主要因素。(本文来源于《贵州农业科学》期刊2019年04期)

叶健强,余华,康润敏,严玉宝,谢晶[7](2019)在《恩拉霉素人工抗原的合成与鉴定》一文中研究指出建立酶联免疫方法以检测食品中恩拉霉素的残留,采用戊二醛法,偶联半抗原恩拉霉素(Er)和载体牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA),制备人工免疫抗原和人工包被抗原,分别为Er-BSA和Er-OVA。经紫外光谱鉴定,在紫外270~280 nm波长处得到Er-BSA和Er-OVA特征性偶联吸收峰。试验结果表明人工合成的2个人工抗原均偶联成功。人工免疫抗原和人工包被抗原的偶联比均达到26∶1,为进一步制备抗血清和酶联检测方法的建立奠定了基础。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2019年07期)

杨夕强,苏鹏辰,王冠蕾,曹克广[8](2019)在《几种新型二恶英半抗原的合成》一文中研究指出酶联免疫分析(ELISA)技术具有灵敏度高、操作简单及耗时少等特点,应用于二恶英类化合物的检测,可以解决目前通用的色谱/质谱联用法检测费用高、样品前处理繁琐、检测周期长等问题。相关研究表明,ELISA技术的关键是设计与目标分子在大小、形状(立体结构)和电子性能上尽量相似的半抗原分子。因此,设计并合成包含二苯并-对-二恶英类结构的二恶英半抗原是提高其灵敏度和准确性的关键。基于"二恶英半抗原中间体的合成研究",继续完成了二恶英成环关键步骤的反应条件探索,并且经水解最终得到4个未见报道的二恶英半抗原,同时对5个重要中间体、4个最终产物进行了核磁验证。(本文来源于《化学试剂》期刊2019年03期)

何峰容,杨帆帆,李佳楠[9](2019)在《胭脂红酸人工抗原合成及多克隆抗体的制备》一文中研究指出为了快速高效检测食品中胭脂红酸含量,本研究通过羟基二咪唑法制备了胭脂红酸人工抗原;通过免疫新西兰大耳白兔获得了胭脂红酸抗血清,经硫酸铵沉淀法分离纯化获得抗胭脂红酸多克隆抗体;利用棋盘滴定法检测了抗体效价,并探究了溶液pH值、离子强度和有机溶剂对ELISA反应的影响,优化出最佳ELISA反应条件;在最佳反应条件下,建立了胭脂红酸的间接竞争ELISA抑制曲线。紫外光谱扫描结果显示,免疫抗原(CA-BSA)和检测抗原(CA-OVA)均与载体蛋白成功偶联;经分离纯化获得的胭脂红酸多克隆抗体效价为1:16000;检测抗原最佳浓度为1μg/m L、ELISA反应最适缓冲液为pH7.4、含50mmol/L Na~+且无甲醇的磷酸盐缓冲液;间接竞争ELISA标准曲线的线性范围为7.8~1150ng/mL,检测限为1ng/mL,灵敏度IC_(50)值为95.2ng/mL。本研究为开发CA快速检测试剂盒对食品中胭脂红酸含量的大量快速测定奠定了基础。(本文来源于《现代食品科技》期刊2019年03期)

徐誉,张小千,张晓晓,李劼,周霞[10](2019)在《类金属砷螯合物人工抗原的合成与鉴定》一文中研究指出为了合成砷元素人工免疫抗原及人工鉴定抗原,制备砷的多克隆抗体,建立ELISA快速检测方法,以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)为螯合剂,将砷与载体蛋白BSA和OVA偶联,制备人工免疫抗原As~(3+)-ITCBE-BSA和人工鉴定抗原As~(3+)-ITCBE-OVA;经核酸蛋白仪浓度的检测、紫外分光光度计扫描以及SDS-PAGE定性鉴定,用原子荧光光谱法检测抗原中As~(3+)的含量。结果显示:合成的As~(3+)-ITCBE-BSA和As~(3+)-ITCBE-OVA蛋白浓度分别为4. 692和5. 726 mg/mL;紫外扫描最大吸收峰发生偏移,电泳条带对于各自载体蛋白稍微滞后,均显示抗原合成成功; As~(3+)的含量分别为0. 254、0. 190 mg/mL,偶合率达到70. 67%和52. 81%。提示:抗原合成成功,可用于重金属砷多克隆抗体的制备。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2019年02期)

合成抗原论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为进一步制备酸性红73新型人工抗原,试验采用N,N-羰基二咪唑(CDI)法合成酸性红73的免疫原和包被原,经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定偶联成功,酸性红73与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OA)的偶联比分别为9∶1和5∶1。免疫后所得兔源多克隆抗体,采取双向琼脂扩散实验和方阵滴定法确定包被抗原和抗体的最适工作浓度分别为1∶4 000、1∶8 000。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

合成抗原论文参考文献

[1].张海棠,王晓斐,职爱民,王亚楠,王自良.B族黄曲霉毒素抗原合成设计及特异性、广谱性抗体制备与特性分析[J].核农学报.2019

[2].常向彩,马明,冉丹丹.酸性红73人工抗原的合成与鉴定[J].贵州畜牧兽医.2019

[3].司艳芳,岳锋,李鹏,郭东光,朱艳平.西马特罗完全抗原的合成和多克隆抗体的制备[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019

[4].何丹,刘媛,李先保,龚航,王丽.微囊藻毒素LR免疫原及包被抗原的合成与鉴定[J].江苏农业科学.2019

[5].徐冰.基于前列腺膜抗原的肿瘤靶向喜树碱前药设计、合成及活性评价[D].北京中医药大学.2019

[6].余华,叶健强,严玉宝,谢晶,胡娟.恩拉霉素人工抗原合成工艺的优化[J].贵州农业科学.2019

[7].叶健强,余华,康润敏,严玉宝,谢晶.恩拉霉素人工抗原的合成与鉴定[J].湖北农业科学.2019

[8].杨夕强,苏鹏辰,王冠蕾,曹克广.几种新型二恶英半抗原的合成[J].化学试剂.2019

[9].何峰容,杨帆帆,李佳楠.胭脂红酸人工抗原合成及多克隆抗体的制备[J].现代食品科技.2019

[10].徐誉,张小千,张晓晓,李劼,周霞.类金属砷螯合物人工抗原的合成与鉴定[J].畜牧与兽医.2019

论文知识图

的胞膜蛋白Figure2-4TheEnvelopeP...液相分析图两种完全抗原的质谱鉴定图在HepG2.2.15细胞株上使用对HBsAg专一...合成抗原SDS-PAGE电泳图4 合成抗原的 SDS-PAGE 图谱

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