TrMYB308基因的克隆及在苦荞毛状根中的功能分析

论文摘要

MYB类转录因子广泛参与调控植物的生长发育过程,对植物次生代谢也具有重要调控作用。前期研究以V型紫斑白三叶为材料,通过RNA-Seq技术,筛选出与类黄酮合成相关的转录因子TrMYB308。在此基础上从V型紫斑白三叶中克隆出TrMYB308基因,该基因的ORF全长为921 bp,编码306个氨基酸。亚细胞定位结果表明,TrMYB308定位于细胞核。多序列比对和系统发育分析表明,TrMYB308属于典型的R2R3-MYB转录因子,且该蛋白与红三叶TaMYB308和苜蓿MtMYB308等蛋白亲缘关系较近。表达特性分析结果表明,Tr MYB308基因在紫斑白三叶各个组织中均有表达,且其表达量受JA的诱导。在苦荞毛状根中异源表达TrMYB308,结果发现转基因根系中的类黄酮代谢途径部分关键酶基因（如FtF3H和FtFLS）的表达量明显增加;转基因根系总黄酮的含量明显高于对照组。基于以上结果,推测TrMYB308可能参与类黄酮次生代谢生物合成调控。本研究为荞麦类黄酮合成分子机制探索及荞麦品质改良提供了理论依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 研究材料
•   1.2 研究方法
•     1.2.1 TrMYB308基因克隆
•     1.2.2 目的基因序列分析
•     1.2.3 实时定量荧光PCR分析
•     1.2.4 亚细胞定位
•     1.2.5 转录激活活性分析
•     1.2.6 农杆菌介导的苦荞毛状根转化系统的构建及遗传转化
•     1.2.7 转基因毛状根的总黄酮含量分析
• 2 结果与分析
•   2.1 TrMYB308的克隆和序列分析
•   2.2 TrMYB308的亚细胞定位及转录激活验证
•   2.3 TrMYB308基因的表达特性
•     2.3.1 TrMYB308基因的组织表达特性
•     2.3.2 TrMYB308基因受MeJA诱导的表达分析
•   2.4 毛状根的诱导及转基因根系的鉴定
•   2.5 在苦荞毛状根中过表达TrMYB308对总黄酮积累的影响
•     2.5.1 转基因毛状根系的生长指数和总黄酮含量检测分析
•     2.5.2 转基因毛状根类黄酮合成途径关键酶基因的表达量分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 谈天斌,卢晓玲,张凯旋,丁梦琦,廖志勇,周美亮

关键词: 型紫斑白三叶,转录因子,类黄酮合成,次生代谢

来源: 植物遗传资源学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,农作物

单位: 温州大学生命与环境科学学院,中国农业科学院作物科学研究所

基金: 国家重点研发计划中欧政府间合作项目(2017YFE0117600),国家自然科学基金面上项目(31572457)~~

分类号: S517;Q943.2

DOI: 10.13430/j.cnki.jpgr.20190412003

页码: 1542-1553

总页数: 12

文件大小: 2394K

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