PAX6通过PI3K/AKT信号通路抑制mESCs增殖的研究

论文摘要

目的探讨PAX6对小鼠胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）增殖的影响及其机制。方法用过表达PAX6慢病毒重组质粒载体感染mESCs,上调mESCs中PAX6的表达;采用CCK8检测PAX6对mESCs增殖的影响;采用流式细胞仪检测PAX6对mESCs周期的影响;采用葡萄糖生化试剂盒和ATP检测试剂盒分别检测mESCs葡萄糖和ATP含量;Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-P70S6K、P70S6K、GLUT1的表达。结果慢病毒重组质粒载体感染后,PAX6过表达组mESCs较对照组PAX6表达增加,细胞增殖受到抑制,并出现G1期阻滞（二倍体含量百分率55.54±1.00%vs 41.12±0.63%,P<0.05）;与对照组比较,PAX6过表达减少mESCs中ATP（277.7±14.3 vs 804.4±13.4 umol/gprot,P<0.05）及葡萄糖含量（2.55±0.16 vs 5.16±0.15 mmol/L,P<0.05）;与对照组相比,PAX6过表达组、PAX6过表达+BKM120组和BKM120组的p-PI3K,p-AKT,p-P70S6K,GLUT1蛋白表达量显著降低。结论 PAX6可通过抑制PI3K/AKT信号通路的活性,减少mESCs中的ATP及葡萄糖含量,从而抑制mESCs的增殖。

论文目录

• 材料与方法
•   1 材料
•   2 方法
•     2.1 mESCs的体外培养及鉴定
•     2.2 PAX6的过表达
•     2.3 免疫荧光法检测蛋白表达
•     2.4 Western blot检测蛋白表达水平
•     2.5 细胞增殖
•     2.6 流式细胞术检测细胞周期
•     2.7 细胞ATP及葡萄糖含量检测
•     2.8 统计学分析
• 结 果
•   1 细胞培养与鉴定
•   2 PAX6对细胞增殖的影响
•     2.1 PAX6的过表达
•     2.2 PAX6对mESCs增殖的影响
•     2.3 流式细胞术检测PAX6对mESCs周期的影响
•   3 PAX6干扰能量代谢作用
•     3.1 PAX6对mESCs中ATP和葡萄糖含量的影响
•     3.2 PAX6抑制PI3K/Akt信号通路作用
• 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王姣,胡蓉,高杰,丁玲,李红,苏敏

关键词: 胚胎干细胞,增殖

来源: 中国病原生物学杂志 2019年08期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 贵州医科大学组织胚胎学教研室

基金: 贵州省优秀青年科技人才培养对象专项资金项目(黔科合人字[2015]07号),贵州省科技计划项目(课题)(黔科合支撑[2017]2970),贵州省普通高等学校科技拔尖人才支持计划项目(黔教合KY字[2017]071)

分类号: R329.2

DOI: 10.13350/j.cjpb.190810

页码: 914-920

总页数: 7

文件大小: 5565K

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