H3N2亚型犬流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立及应用

论文摘要

为了快速诊断H3N2亚型犬流感病毒（CIV）感染,根据H3N2亚型CIV的M和HA基因序列,设计了3组LAMP引物,优化反应条件,建立了H3N2亚型CIV的RT-LAMP检测方法。结果表明,RT-LAMP方法能在63℃恒温条件下,在45min内完成扩增,通过反应管中预加的荧光染料颜色的变化实现目视化判定。该方法对犬的常见病原无交叉反应,具有较好特异性;灵敏度是常规RT-PCR方法的100倍。该方法操作简单、快速灵敏、特异性强,适合现场应用,对H3N2亚型CIV的检测具有实际的应用价值。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 毒株
•     1.1.2 主要试剂及仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 引物的设计与合成
•     1.2.2 检测引物的筛选
•     1.2.3 RT-LAMP反应条件的优化
•     1.2.4 RT-LAMP特异性试验
•     1.2.5 RT-LAMP灵敏度试验
•     1.2.6 自制RT-LAMP检测试剂盒目视化效果验证
•     1.2.7 RT-LAMP方法的应用
• 2 结果
•   2.1 引物的设计与合成
•   2.2 检测引物的筛选
•   2.3 RT-LAMP反应条件的优化
•   2.4 RT-LAMP特异性试验
•   2.5 RT-LAMP灵敏度试验
•   2.6 自制RT-LAMP检测试剂盒目视化效果验证
•   2.7 RT-LAMP方法的应用
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 秦海斌,温海,贺星亮,宋珍华,朱骞,包喜军,蒿阳,张艳龙

关键词: 亚型犬流感病毒,环介导等温扩增,检测

来源: 动物医学进展 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 公安部南京警犬研究所/警犬技术公安部重点实验室

基金: 十三五国家重点研发计划项目(2016YFC0800310),公安部科技强警基础工作专项项目(2015GABJC32)

分类号: S852.65

DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.04.002

页码: 9-15

总页数: 7

文件大小: 2969K

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