基于UHPLC-MS/MS分析痕量芥子气染毒血样中血红蛋白加合物

论文摘要

芥子气可以与血红蛋白的组氨酸侧链发生反应,生成芥子气暴露染毒的生物标志物。本研究建立了定性、定量检测痕量芥子气暴露染毒人血红蛋白加合物的方法。采用2-氯乙基乙基硫醚（2-CEES）染毒的血红蛋白溶液作为内标,用链霉蛋白酶对芥子气-珠蛋白加合物进行酶解,经PPL柱固相萃取纯化以及苄氧羰基氯（Cbz-Cl）衍生,使用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）进行分析检测。经过优化实验条件,最终选择链霉蛋白酶的酶解温度55℃,酶解时间10.0 h,使用3.0 mL 5%甲醇水溶液淋洗,1.0 mL 50%甲醇水溶液洗脱,Cbz-Cl衍生时间30 min。结果表明,在10.0～1 000μg/L线性范围内,线性关系良好（R2>0.997）,准确度为89.8%～113%,精密度（RSD）不高于12.4%,检出限（LOD）为10.0μg/L（S/N>5）。该方法采用2对离子对进行确证,有助于痕量芥子气暴露染毒的溯源性分析,与传统酸解法相比,该方法样品处理时间短,反应条件温和、操作简单,且灵敏度可提高约150倍。

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 主要仪器与装置
•   1.2 主要材料与试剂
•   1.3 实验条件
•     1.3.1 色谱条件
•     1.3.2 质谱条件
•   1.4 注意事项
•   1.5 标准曲线溶液及质量控制样品的配制
•   1.6 内标溶液的制备
•   1.7 样品制备
•     1.7.1 珠蛋白提取
•     1.7.2 链霉蛋白酶酶解与固相萃取
•     1.7.3 Cbz-Cl衍生
• 2 结果与讨论
•   2.1 质谱条件的优化
•   2.2 链霉蛋白酶酶解
•   2.3 固相萃取条件的优化
•   2.4 Cbz-Cl衍生
•   2.5 2-CEES染毒血红蛋白溶液作为内标
•   2.6 专一性考察
•   2.7 线性曲线与检出限
•   2.8 准确度与精密度考察
•   2.9 稳定性考察
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈博,于惠兰,刘石磊,刘昌财,梁龙辉,杨旸,吴姬娜,李晓森

关键词: 芥子气,人血红蛋白,组氨酸加合物,酶解,衍生,超高效液相色谱串联质谱

来源: 质谱学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

专业: 化学,临床医学,药学

单位: 国民核生化防护国家重点实验室,防化研究院分析化学实验室

分类号: O657.63;R446.1;R99

页码: 305-313

总页数: 9

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