茉莉花芳樟醇生物合成关键基因的克隆与表达分析

论文摘要

芳樟醇是芳香植物的重要挥发性化合物之一,橙花叔醇/芳樟醇合酶基因（NES/LINS）是芳樟醇化合物生物合成的重要调控基因。该研究以茉莉花花瓣为材料,基于茉莉花花瓣转录组测序结果,分别采用RT-PCR和染色体步移技术,克隆获得NES/LINS基因的全长cDNA序列及其启动子序列,并应用SPEC-GC-MS和qRT-PCR技术检测茉莉花开放过程中芳樟醇化合物的相对含量及JsNES/LINS基因的表达水平,并分析JsNES/LINS在植物激素处理后的表达水平,为进一步揭示JsNES/LINS基因在茉莉花芳樟醇的生物合成调控中的作用提供理论依据。结果表明:（1）获得的JsNES/LINS基因（登录号为:MH513857.1）cDNA全长为1 843 bp,开放阅读框（ORF）全长为1 755 bp,编码584个氨基酸,为亲水性稳定蛋白;NCBI-BLAST分析显示,JsNES/LINS与油橄榄OeNES、金鱼草AmNES/LINS1和AmNES/LINS 2以及山茶花CsLINS的相似性分别为56%、54%、54%和50%。（2）亚细胞定位结果显示JsNES/LINS定位于细胞质中;获得了JsNES/LINS起始密码子上游1 141 bp启动子序列,PlantCare预测结果显示,该序列包含多种与植物激素和光照等响应相关的顺式作用元件。（3）GC-MS分析显示,芳樟醇化合物的相对含量在茉莉花未开放18:00时最低,半开放22:00时达到最大,随后呈下降趋势。（4）qRT-PCR结果显示,JsNES/LINS的相对表达量变化与芳樟醇化合物的相对含量变化趋势一致;经IAA、GA、ABA及MeJA处理后JsNES/LINS的表达量受到不同程度的诱导表达,其中MeJA的诱导作用最为明显,诱导作用由大至小分别为:MeJA>GA>ABA>IAA。研究推测,JsNES/LINS在芳樟醇化合物的生物合成过程中具有重要调节作用,且受植物激素调控表达。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 试验材料及处理
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 JsNEL/LINS 全长cDNA的扩增
•     1.2.2 JsNEL/LINS启动子的分离
•     1.2.3 PCR产物纯化回收及克隆
•     1.2.4 JsNEL/LINS的生物信息学分析
•     1.2.5 茉莉花开放过程中芳樟醇含量的测定
•     1.2.6 JsNEL/LINS基因的实时荧光定量分析
• 2 结果与分析
•   2.1 JsNEL/LINS基因的克隆及序列分析
•   2.2 JsNEL/LINS基因的生物信息学分析
•   2.3 启动子分离及顺式作用元件分析
•   2.4 JsNEL/LINS基因表达量分析
•     2.4.1 茉莉花开放过程中JsNEL/LINS的表达
•     2.4.2 JsNEL/LINS在不同植物激素处理后的表达分析
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈笛,陈雪津,郭永春,王鹏杰,岳川,陈桂信,叶乃兴

关键词: 茉莉花,芳樟醇,基因,启动子,表达分析

来源: 西北植物学报 2019年08期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,园艺

单位: 福建农林大学园艺学院茶学福建省高校重点实验室

基金: 福州市科技计划项目(2017N0018),福建省自然科学基金(2016J01110),福建农林大学科技创新专项基金(CXZX2018077)

分类号: Q943.2;S685.16

页码: 1344-1352

总页数: 9

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