刘奠忠1(1泸州医学院附属中医院检验科646000)
邹红敏（通讯作者）2(2内江市资中县疾病预防控制中心641200)
【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)2-0395-02
【摘要】目的研究在全自动生化分析仪影响生化检验质量因素。
我院先后购买了2台日立全自动生化分析仪分别为日立7020和日立7080，几年来，我们严格按照仪器使用说明书安装和运行，保证使用环境符合要求，并严格操作规程，加强对仪器的保养和维护，提前发现和及时排除问题，充分有效地利用仪器资源。经过多年的实践、操作和观察，发现我院全自动生化分析仪在使用中存在许多影响质量的问题，下面就我们的使用体会和同行们共同探讨交流。
1K因素校正问题
在一些酶法测定的检验中，如果按使用试剂说明书中提供的K因素设为参数测定，往往测得的结果与校正血清值或室间质评回报结果相差较大。如我科用的谷丙转氨酶试剂，根据说明书给出的K值为4180，测定的结果经我们与标准值或室间质评回报结果相比对相差达30％，因此我们认为K值4180为－标准条件下的理论值在不同的仪器上是存在一定差别的，必须予以校准。理论计算：ALT(U/L)=△A/min×4180，理论计算K＝4180。我们采用朗道校正品进行校正：ALT实测值＝△A/min×K理论值（4180）；ALT理论值＝△A/min×K修正值；K待修正值＝（ALT理论值／ALT实测值）×K理论值（4180）＝nK理论值。经K值修正n倍后我们参加的卫生部室间质评结果非常理想，因此我们认为该法简便易行，且可以同时排除诸多系统误差。如若将一定区域的几个实验室结果进行比较，采用该法校正仪器K值，那么该区域的几个实验室结果比较一致，有利于实验室间测定结果的相互认可，减少患者在不同医院的重复检查，也利于减少由于测定结果的不同导致的医患纠纷。
2标准校正问题
2.1任何一台全自动生化分析仪的工作中测定的每一个项目都离不开一个或多个已知其含量的参照物(我院CK－MB除外)，这一参照物就是我们日常工作中使用的校准品。我科使用的是朗道校正品，干粉状态2℃～8℃可保存至有效期，稀释后立即分装成150μl～200μl存放在-20℃环境下，可使用至有效期。但在使用中发现了几次因为人为因素导致用其校准的系数测得的样品严重偏离了正常人均值，将该校准品当样品测量后发现多项目偏离了其靶值的20%以上，经查明原来该校准品的保存中存在问题(多次反复冻融，并在室温下多次开盖检测，TBIL和DBIL下降显著，部分项目因多次暴露，水分蒸发导致结果增高)，但一次Mg的校准值偏离太大应引起操作人员的重视。用其中一份当样品测定校准的所有项目后发现其他项目均正常，而Mg为0.55mmol/L(靶值：1.10mmol/L)，后用5份测定发现Mg的批内变异率均值>25%。经多次校准后再反测发现Mg的重复性存在严重问题，经反复试验发现：试剂的稳定性存在严重问题，质控的实测值逐渐下降，每天校准都不能让校准品的回测值接近靶值的95%，开瓶30天的试剂空白吸光度值就大于或接近了0.832。我院日立7020自动生化分析仪使用的单试剂，其方法为终点法，用靶值为1.10mmol/L的校准品刚校准后即用该同一管校准品作为样品检测，测得5次均值为1.21mmol/L(偏高21.89%)，经查阅仪器上Mg校准后的K系数为8421，1.12/8421得Mg的单位时间内计算吸光度变化值仅为0.000133，是7080生化项目中最小的。作者认为太小的吸光度变化是导致该项目重复性太差的根本原因，通过增大样品/试剂的比值来提高吸光度变化值，提高样品吸光度变化值与仪器本身吸光度变化值的比值，减小因仪器系统误差导致的吸光度改变对样品测量的重复性的影响，但事实上因为试剂自身的不稳定导致的吸光度变化值下降到接近仪器因系统误差所产生的吸光度变化值时，通过增大样品/试剂的比值来提高某项目的重复性是不能解决问题的。Mg更换新试剂后，再校准，再将该校准品当样品测定，当天其CV值能控制在5%以内，与试剂供应商联系得知Mg试剂的稳定性存在严重问题，是其方法学存在缺陷，建议在Mg试剂不用时即时将其密闭并闭光保存在2℃～8℃环境下，并经常校准可得到克服。实践证明，以上建议让Mg试剂的稳定性能得到较短时间内的稳定，但给工作带来了不少的麻烦。
2.2校准不要轻易进行当质控出现失控时，不要草率决定立即进行校准，因为导致质控失控的原因是多方面的，包括质控品批号出错，质控品吸水稀释，水分蒸发浓缩、见光分解(TBIL、DBIL)和试剂更换出错或添加试剂出错。作者常将校准品当样品测定，如果其值基本上与靶值一致，可以排除试剂、供水水质和仪器的问题，只有在质控上找原因，反之，我们可以重新开一瓶新的校准品，用其作为样品来测量，一方面可以了解校准品的稳定性和使用者稀释操作是否很精确，实践证明朗道校准品在其有效期内，用双蒸水复溶后立即分装并密闭存放在－20℃环境下是十分稳定的。如果出现了个别项目偏差太大，建议更换新试剂后再测定校准品；如果结果不理想，请查仪器分析参数是否被改动；如果分析参数正常，可能是试剂的批间差太大，建仪即时校准。校准品不得反复冻融,因为在反复的冻融过程中难免影响其值的稳定，TBIL、DBIL可能因见光而下降，部分项目可能因水分蒸发而升高。校准品复溶时水质问题不容忽视，最好采用双蒸蒸馏水溶解。
3质控问题
质控分为室内质控和室间质控。室间质控主要目的是了解不同实验室在对同一样品的测量是否产生一致的结果，来了解不同室验室在仪器的参数设置、校准、保养、操作、试剂的保存、试剂的质量等方面是否存在问题。室内质量控制是各实验室为了监测和评价本室工作质量，以决定常规检验报告能否发出所采取的一系列检查、控制手段，旨在检测和控制本室常规工作的精密度，并检测其准确度的改变，提高本室常规工作中批间和日间标本检测的一致性。我院检验科在质控方面也发现了不少问题。
3.1质控品靶值偏离的问题我院检验科一直使用朗道生化质控品，在使用过程中多次发现其靶值存在一定的问题，主要表现在一盒新的质控品刚开始使用就发现部分项目值与商家提供的靶值和范围值严重偏离，这一问题的原因也许是由于质控品出厂前定值、保存条件、运输条件、测定条件等原因造成的。作者在校准和试剂质量得到保证的前提下将出现以上情况的质控品每一支作多次检测，一是观察每一支之间值的差异是否可以接受，如果每一支之间值的差异可以接受，就注意测定每一个项目多次测定的均值是否接近其质控品的靶值，如果明显偏离了其靶值，作者认为以本室测定的均值作为质控的靶值更为客观。
3.2质控品不稳定的问题质控品不稳定的问题部分是可以克服的，但如果是由于质控品本身的问题就很难克服。作者在前面已经谈到，质控品吸水稀释、水分蒸发浓缩、见光分解(TBIL、DBIL)是可以得到克服的：做到在温度为－20℃保存；每天开机前先将质控品混匀取样，每天必须更换；取样后即时将质控品放回低温闭光环境中。如果是由于质控品个别批号的质量存在问题，我们可以通过更换新批号的质控品来克服；如果多批号质量存在问题，建议更换更优质的质控产品。
4仪器报警问题
工作中我们发现有同志只注意电脑接受的数据，而忽视核对仪器打印出的检验结果附带的报警信息。如ALT检查时电脑接受到的检查为6U/L,而仪器打印出6U/L的同时附带的报警ABS,此类原因除脂血，溶血等导致本底引起吸光度超限外。更应引起高度重视的是ALT活性过高所致，经我们稀释重测结果为887U/L，因此在报告检验结果前必须注意查看报警信息。此问题特别容易在检验结果在正常参考范围内时而忽视。
5生化仪的维护和保养问题
全自动生化仪的维护和保养包括开机前各种清洗液的装载、每日光度计检测、每周杯空白测定、每日关机前全面清洗。
5.1在日常工作发现不少检验人员只管使用全自动生化仪，对其各方面的维护和保养并不重视，常常出现清洗容器中无清洗液的现象，导致清洗工作名存实无或清洗不彻底。
5.2每日光度计检测是了解仪器光源灯的状态，日立7020、7080其值超过16000或较前一天明显下降，建议即时更换光源灯，否则其生化报告质量无法保障。
5.3每周杯空白测定必不可少，仪器供应商明确提醒了当杯空白值大于±800时必须即时更换新杯，可以发现近1周来仪器每日清洗是否到位。我院曾发生因未清洗直接关机导致部分杯空白值从几十上升到四百多，经清洗后又降为几十，说明每日清洗是十分重要和必要的。
5.4每日关机前全面清洗不可忽视，因为关机后杯中残留物会很牢固地附着在杯壁上，严重影响杯空白。
5.5生化生化仪加样背卡死的问题加样背加样品时突然卡死停机，此故障多半是由于仪器使用一段时间后，由于污渍黏附在加样背上部，当加样针下探到最下部时容易造成加样臂卡死导致停机，遇此情况应先关机，然后稍加用力向上提起（切忌左右摇摆），擦拭干净，重新抹上适量润滑机油即可。
5.6全自动生化仪驱动器问题使用频率较高易出现故障，应急时可不使用，只是结果不能存储在数据盘上，但并不影响其他工作，如此时拷贝系统参数磁盘，可直接在计算机上拷贝。平时也应注意驱动器的清洁保养以及采用更优质的磁盘。
5.7全自动生化仪偶然误差问题
经我们长期使用发现甘油三脂（TG）测定最易发生偶然误差，导致测定结果偏高，可能是发应杯或试剂针清洗不清洁或试剂间的相互干扰所致，所以对TG测定值过高，但无脂血，溶血的标本应特别注意及时复查。
6生化仪供水的水质问题
仪器工作时蒸馏水的质量和水路的畅通至关重要。蒸馏水的质量对离子Ca,Mg等影响较大；而水路的畅通是避免交叉感染的关键。我院曾因水的电阻值接近1兆欧时出现多项目不稳定，每天校准均不能解决重复性问题。因此水质对检测结果的影响一定要引起大家的重视，一些单位领导不知道水电阻值对生化检验的重要性，一味地强调节约，结果导致大量试剂因水质太差而被污染，损失远远大于水机消耗品更换的开支，由于水质问题产生了大量的报告质量问题，是值得我们反思的。水路的畅通则需要坚持每日、每周、每月的日常维护和保养，尤其水冲洗不畅时应注意三个过滤网的清洁和冲洗。