岳阳市岳阳楼区疾病预防控制中心414000
【摘要】目的：探讨性病病原微生物荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）联合检测意义。方法：选取我中心2014年5月-2015年5月收治的性病患者220例，分别采集男性尿道及女性宫颈分泌物标本，对其开展荧光定量聚合酶链式反应试验，分析试验结果。结果：NG（淋病奈瑟菌）、CT（沙眼衣原体）、UU（解脲脲支原体）、TP（梅毒螺旋体）、HSV（疱疹病毒）阳性率分别为14.09%、28.18%、58.64%、47.73%、34.55%，其中UU阳性率最高，TP阳性率次之，女性标本阳性率明显高于男性。结论：荧光定量聚合酶链式反应检测技术灵敏度高，对于早期病变的显示具有很强的优势，能够为临床诊断治疗等方面提供可靠的参考依据，临床检验人员应该加强对病原微生物的试验及动态监测，改善性病的治愈率。
【关键词】性病；病原微生物；荧光定量；聚合酶；链式反应；联合检测
性传播疾病大多数因NG、CT、UU、TP、HSV等病原微生物感染所致[1]，目前发病率呈逐年上升趋势，患者因考虑自尊问题通常接受一些非正规治疗，使得出现反复感染，有时还会引发输卵管炎、阴道炎、附睾炎及慢性前列腺炎等病，早期检测病原微生物进行对症治疗是关键所在，而常规的PCR检测措施往往灵敏度低，误差大[2]。不过近几年发展起来的FQ-PCR技术误差率低于10%，灵敏度高，污染小，发挥着越来越重要的作用。我中心探讨了性病病原微生物荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）联合检测的意义，现将结果报道如下。
1资料与方法
1．1一般资料
病例资料来源于我中心2014年5月-2015年5月收治的性病患者220例，其中男性85例，年龄19-59岁，平均年龄（37.4±4.6）岁。女性135例，年龄18-60岁，平均年龄（37.6±4.3）岁。所有患者均出现不同程度泌尿生殖道炎症反应，均有性生活史，男性患者临床主要表现为尿急、尿频、尿道灼热、尿痛症状，女性患者临床主要表现为分泌物增多、下腹不适、阴部瘙痒症状。
1．2方法
1.2.1采集男性患者标本
取男性尿道分泌物，尿道口的分泌物利用无菌棉球擦拭，患者自己挤压外生殖器，从尿道口插入无菌肉汤拭子约1-2cm，旋转2周停留20s左右后再将其取出置入配套无菌试管中即刻送检，保证取材前7天内患者未采取任何抗菌药治疗。
1.2.2采集女性患者标本
取女性宫颈分泌物，宫颈后暴露，宫颈口外的黏液利用无菌棉球将擦拭，从宫颈管内插入无菌肉汤拭子约2cm，旋转15s左右后取出，置入配套的无菌试管即刻送检。注意取材时勿接触阴道壁，保证取材前7天内患者未采取任何抗菌药物、阴道栓剂及冲洗剂治疗。
1.2.3检测方法
仪器选择MJopticon2型全自动荧光定量PCR扩增分析仪，为美国伯乐公司生产。试剂盒包括NG、CT、UU、TP、HSV。PCR操作步骤：标本进行常规处置之后，将其放入事先已经配置的PCR反应管，再设置阴性对照，置于全自动荧光定量PCR仪，严格参照操作说明书进行具体操作步骤与判断结果。
1．3统计学处理
数据均通过SPSS19.0软件处理，计量资料用t检验，计数资料用卡方检验，当P<0.05时表示数据间比较差异具有统计学意义。
2结果
2．1各种病原微生物阳性率的分析比较
性病病原微生物NG、CT、UU、TP、HSV中各阳性率分别为14.09%、28.18%、58.64%、47.73%、34.55%，其中UU阳性率最高，TP阳性率次之，女性标本阳性率明显高于男性。具体数据见表1。
3讨论
由于现代社会人们的思想越来越开放，性生活不洁现象也不断增多，由于许多人对正确的性生活缺乏应有的认识，缺乏对身体的保健，加之各种不良生活习惯等，使生理健康每况愈下，诱发性病，且不易治愈，给正常的生活、工作带来极大的不便。常规检测病原微生物手段有细菌培养、涂片、免疫技术[3]，但是这些方法缺点很多，如准确率低，误差大，周期久等，不易进行临床诊治工作的开展。近些年广泛发展应用的一种新型技术即荧光定量聚合酶链反应技术，结合PCR核酸高效扩增特性，探针杂交术定量准确，敏感度强，弥补了常规的PCR技术难以准确定量的不足，对人体伤害小。FQ-PCR能够融合荧光化学、目的基因为一体，检测整个阶段都为封闭条件，利用微机实时监测分析结果，不需要常规PCR技术长期的电泳处理，减少了由于扩增产物而带来的污染，进而避免出现的假阳性现象，数据结果更加准确可靠[4]。
另外，在上述NG、CT、UU、TP、HSV这些病原微生物检测中，发现女性阳性率均明显高于男性，主要是因女性特殊的泌尿生殖道结构，这些NG、CT、UU、TP、HSV更易进入女性生殖道，自身很难发现病原微生物感染[5]。而且大部分女性通常喜欢穿紧身裤，还有日常喜欢用护垫，使得阴部长期处于潮湿状态，极易繁殖生长病原体。女性一般比较害羞内向，出现轻微的症状通常不愿意去医院检查，待症状严重才意识到检查治疗，这些因素均会使女性患病率较男性更高。但因FQ-PCR技术成本相对较高，治疗费用增加，在基层医院的开展还受到限制[6]，但伴随我国医疗保险的完善及经济实力的不断发展，相信FQ-PCR检测技术的普及率将大大提高。
由此可知，对于性病病原微生物采取荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）联合检测效果明显，是一种安全无创的检测措施，有利于显示早期病变，改善患者生活质量，值得借鉴。
参考文献：
[1]樊卫，祁金友，陈平．FQ－PCR检测女性泌尿生殖道炎性反应患者解脲支原体合并感染情况分析[J].检验医学与临床，2011，08（08）：949－950．
[2]成浩，徐金水，吴建茹，等．江苏省男性HIV感染者/艾滋病患者中解脲脲原体和生殖支原体的检测分析[J].南京医科大学学报，2010，30（08）：1163－1165．
[3]赵宪文.621例泌尿生殖道支原体检测及耐药性分析[J].中国实用医刊，2014，（15）：96-97.
[4]王晓东，李凤焕.荧光定量聚合酶链式反应联合检测性病病原微生物[J].中国社区医师，2010，12（22）：187-188.
[5]SimonettiAC，MeloJH，deSouzaPR.Immunological'shostprofileforHPVandChlamydiatrachomatisacervicalcancercofactor[J].MicrobesandInfection，2009，11（04）：35-37.
[6]海燕.聚合酶链式反应与细胞培养在女性生殖道沙眼衣原体感染诊断中的比较分析[J].中国妇幼保健，2012，27（15）：2316-2317.