氯霉素乙酰基转移酶论文_潘玉先,廖志勇,郝卫,车小燕

导读:本文包含了氯霉素乙酰基转移酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:氯霉素,病毒,基因,家蚕,核型,乙酰,抗体。

氯霉素乙酰基转移酶论文文献综述

潘玉先,廖志勇,郝卫,车小燕[1](2004)在《氯霉素乙酰基转移酶融合蛋白表达、纯化和鉴定》一文中研究指出目的对氯霉素乙酰基转移酶(Chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因进行表达和纯化。方法通过PCR扩增编码CAT氨基酸序列的基因片断,并将之克隆入pGEX-2T载体。IPTG诱导蛋白融合表达,产物经琼脂糖亲和层析树脂纯化。免疫印迹鉴定纯化蛋白的抗原性。结果筛选得到的重组子诱导后表达相对分子质量约为52 600的CAT融合蛋白。树脂纯化及酶切后均得到高纯度的蛋白样品。纯化蛋白能与抗CAT抗体特异结合。结论本研究获得了CAT基因的融合表达蛋白,并对其完成纯化,为制备抗血清和抗体打下基础。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2004年S1期)

高晨,侯星生,张福萍,周伟,袁育康[2](2002)在《氯霉素乙酰基转移酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立》一文中研究指出目的 建立氯霉素乙酰基转移酶 (chloramphenicolacetyltransferase ,CAT)双抗体夹心ELISA的实验室检测方法。方法 从质粒pBLCAT6经PCR扩增CAT基因序列 ,插入到原核表达质粒pGEX 2T中 ,在大肠埃希菌DH5α中诱导表达 ;以纯化的融合蛋白GST CAT为抗原免疫实验用兔 ,得到的CAT抗血清进行生物素标记 ,并在此基础上利用生物素链和亲和素放大系统建立双抗体夹心ELISA法。构建不同YY1结合位点突变的HPV16LCRCAT报道质粒 ,体外瞬时转染真核细胞 ,提取胞质蛋白 ,以建立的方法进行CAT表达检测。结果 SDS PAGE显示表达的GST CAT融合蛋白相对分子质量约为 5 40 0 0 ;制备的CAT抗血清可有效地识别原核及哺乳动物细胞表达的CAT蛋白 ;在不同启动子及调节序列的控制下 ,利用建立的CAT检测技术证明在瞬时转染的细胞中可诱导 2~ 8倍的CAT表达增强。结论 建立的双抗体夹心ELISA方法可敏感地反映上游序列的启动子活性 ,以及启动子调节序列变化对启动子活性的影响 ,使CAT作为报道基因的研究更为简单化(本文来源于《中华实验和临床病毒学杂志》期刊2002年01期)

莫志成,李晓燕,李宏帆,程小款,吴宁华[3](2001)在《竞争RT-PCR定量检测氯霉素乙酰基转移酶mRNA水平方法的建立及初步应用》一文中研究指出将特定基因转录调控序列克隆到氯霉素乙酰基转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因的上游并转染哺乳动物细胞是研究基因调控的主要策略之一.目前,检测CAT报告基因的方法主要是以酶活性反映目的基因调控片段转录水平.由于在真核细胞中存在翻译及翻译后调控,所以检测CAT报告基因的mRNA水平更直接反映特定基因的启动子活性.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集》期刊2001-09-01)

张耀洲,吴祥甫,李载平[4](1993)在《氯霉素乙酰基转移酶基因在家蚕核型多角体病毒P10基因启动子控制下的表达》一文中研究指出昆虫核型多角体病毒(NPV)P10基因属于晚期基因,为强启动子所控制,又是病毒复制所非必需的基因。我们对前报的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)P10基因,应用PCR技术进行ATG区定点突变,在ATG被突变的同时形成一个BglⅡ酶切位点,得到一个不含ATG的BmNPV P10基因启动子。将长为230bp的经突变后的BmNPV P10基因5’端(包括启动子所有特征)片段克隆进pMMTV·CAT质粒中,构建成一个CAT基因在BmNPV P10基因启动子控制下的pBmPl0·CAT瞬间表达质粒。该质粒通过转染进入经野生型BmNPV感染的BmN细胞中,CAT得以表达。证明BmNPV P10启动子是比较强的启动子,可以在BmN细胞表达外源基因,具备了作为表达载体启动子的特性。(本文来源于《病毒学报》期刊1993年04期)

氯霉素乙酰基转移酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的 建立氯霉素乙酰基转移酶 (chloramphenicolacetyltransferase ,CAT)双抗体夹心ELISA的实验室检测方法。方法 从质粒pBLCAT6经PCR扩增CAT基因序列 ,插入到原核表达质粒pGEX 2T中 ,在大肠埃希菌DH5α中诱导表达 ;以纯化的融合蛋白GST CAT为抗原免疫实验用兔 ,得到的CAT抗血清进行生物素标记 ,并在此基础上利用生物素链和亲和素放大系统建立双抗体夹心ELISA法。构建不同YY1结合位点突变的HPV16LCRCAT报道质粒 ,体外瞬时转染真核细胞 ,提取胞质蛋白 ,以建立的方法进行CAT表达检测。结果 SDS PAGE显示表达的GST CAT融合蛋白相对分子质量约为 5 40 0 0 ;制备的CAT抗血清可有效地识别原核及哺乳动物细胞表达的CAT蛋白 ;在不同启动子及调节序列的控制下 ,利用建立的CAT检测技术证明在瞬时转染的细胞中可诱导 2~ 8倍的CAT表达增强。结论 建立的双抗体夹心ELISA方法可敏感地反映上游序列的启动子活性 ,以及启动子调节序列变化对启动子活性的影响 ,使CAT作为报道基因的研究更为简单化

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

氯霉素乙酰基转移酶论文参考文献

[1].潘玉先,廖志勇,郝卫,车小燕.氯霉素乙酰基转移酶融合蛋白表达、纯化和鉴定[J].免疫学杂志.2004

[2].高晨,侯星生,张福萍,周伟,袁育康.氯霉素乙酰基转移酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J].中华实验和临床病毒学杂志.2002

[3].莫志成,李晓燕,李宏帆,程小款,吴宁华.竞争RT-PCR定量检测氯霉素乙酰基转移酶mRNA水平方法的建立及初步应用[C].中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集.2001

[4].张耀洲,吴祥甫,李载平.氯霉素乙酰基转移酶基因在家蚕核型多角体病毒P10基因启动子控制下的表达[J].病毒学报.1993

论文知识图

异源表达不同生物体冷激蛋白对氯霉转染不同细胞系氯霉素(-)myc-XBP1/pCAT3-promoter...(-)myc-XBP1/pCAT3-iNOSp共...包被抗体最适工作浓度的测定耐药菌的产生和传播Fig.1-3Theproduc...

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