导读:本文包含了条件性基因敲除小鼠论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,小鼠,细胞,条件,系统,胰岛,蛋白。
条件性基因敲除小鼠论文文献综述
胡乐,刘文,张武锔,张月[1]（2019）在《条件性骨细胞Tsc1基因敲除小鼠的初步研究》一文中研究指出目的构建骨细胞Tsc1基因条件性敲除小鼠,并进行表型鉴定,为进一步研究TSC1在骨细胞中的作用奠定基础。方法利用Tsc1~(flox/flox)和DMP1-Cre~+转基因小鼠进行饲养和杂交;对繁殖产生的第1代小鼠进行基因型鉴定,获得Tsc1~(flox/-)DMP1-Cre~+,待其成年后,同Tsc1~(flox/flox)小鼠合笼,得到第2代小鼠,通过PCR鉴定出基因型为Tsc1~(flox/flox)DMP1-Cre~+;此为本实验所需要构建模型小鼠。应用H-E染色、光学显微镜观察10周龄小鼠骨细胞的改变。结果 2种转基因小鼠繁殖产生的第2代小鼠基因型符合孟德尔遗传定律,交配后获得Tsc1~(flox/flox)DMP1-Cre~+小鼠。Tsc1基因通过Cre/loxP系统被成功敲除。结论该方法成功构建可以在骨细胞条件性敲除Tsc1基因的小鼠,并进行敲除后鉴定。(本文来源于《广东医学》期刊2019年18期）
袁清照,谢金阳,刘星婧,袁栎,王尧[2]（2019）在《条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠的构建及鉴定》一文中研究指出目的:构建条件性胰岛β细胞钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase,CASK)基因敲除小鼠,为研究CASK基因在糖尿病发生中的机制提供动物模型。方法:将CASKloxp/-雌鼠与CASKloxp/Y雄鼠杂交,获得基因型为CASKloxp/loxp雌鼠、CASKloxp/Y雄鼠;再让条件性胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶雄鼠与CASKloxp/loxp雌鼠杂交获得CASKloxP/YMIP-Cre雄鼠和CASKloxP/-MIP-Cre雌鼠。CASKloxP/YMIP-Cre基因型小鼠即为本实验所需要构建的模型小鼠。小鼠生后1～2周剪尾,通过PCR鉴定小鼠基因型,4～5周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导Cre重组酶表达后,利用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹技术验证CASK基因敲除效果。结果:从引进这两种小鼠开始,繁殖10个月,共获得基因型为CASKloxP/YMIP-Cre的雄鼠28只,PCR结果证实小鼠基因型符合CASKloxP/YMIP-Cre。实时荧光定量PCR、蛋白质印迹结果显示CASKloxP/YMIP-Cre小鼠胰岛CASK表达量明显下降。结论:利用Cre/loxp系统,成功构建了条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠,为在动物水平研究CASK基因在糖尿病发病机制中的作用提供了研究平台。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2019年09期）
王红,孙鹏,王岩,张武锔,张晟[3]（2019）在《成骨细胞条件性FKBP8基因敲除小鼠模型构建》一文中研究指出目的建立成骨细胞条件性FKBP8基因敲除小鼠模型、为研究FKBP8基因在骨质疏松症中的作用机制提供动物模型。方法设计基因敲除策略,获得纯合子小鼠和野生型对照小鼠。提取鼠尾DNA,PCR扩增之后琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型。提取小鼠原代成骨细胞蛋白质,利用Western blot技术检验FKBP8基因的表达。结果成功构建成骨细胞条件性FKBP8小鼠敲除模型,PCR结果显示基因型为BGLAP-Cre/FKBP8flox/flox,Western blot结果显示FKBP8基因蛋白表达敲除效果明显。结论基于Cre/loxp重组酶系统,成功构建出FKBP8基因敲除鼠,为探究FKBP8在骨质疏松症的作用机制提供动物模型。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2019年08期）
王婷婷,卜歆,李金奎,王娜,邱意开[4]（2019）在《DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析》一文中研究指出目的应用Cre/Lox P系统复制盘状结构域受体2(DDR2)在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2~(i?EC)(DDR2~(flox/flox),Cdh5-Cre/ER~(T2)),并分析其在肝脏中的表型。方法复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)打靶,通过聚合酶链反应(PCR)+脱氧核糖核酸(DNA)印迹法鉴定筛选阳性ES细胞,将阳性的ES细胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠。将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠回交得到F0杂合子,F0代杂合小鼠自交筛选获得F1代DDR2~(flox/flox)小鼠,该小鼠与Cdh5-Cre/ER~(T2)小鼠杂交,通过子代自交获得DDR2在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除(DDR2~(flox/flox),Cdh5-Cre/ER~(T2))小鼠。他莫昔芬诱导血管内皮细胞上DDR2基因敲除,对小鼠进行表型分析。结果获得DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠DDR2~(i?EC)(DDR2~(flox/flox),Cdh5-Cre/ER~(T2)),DDR2~(i?EC)小鼠出生时符合孟德尔遗传定律,发育良好,他莫昔芬诱导敲除小鼠血管内皮细胞DDR2基因表达后,小鼠出现自发性肝纤维化及黄体血管新生障碍等表型。结论成功复制DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型。血管内皮细胞DDR2缺失能导致自发性肝纤维化。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2019年21期）
刘天喜,宋琼,许国双,刘永鑫[5]（2019）在《X-盒结合蛋白1条件性基因敲除小鼠模型的建立》一文中研究指出目的建立可进行条件性敲除X-盒结合蛋白1(Xbp1)基因的flox杂合子小鼠。方法通过ET-clone的方法构建基于cre-loxp系统和FLP-frt系统的条件性基因打靶载体。载体线性化后电转JM8A3 ES细胞,经G418和Ganc筛选获得抗性ES细胞克隆。经长片段PCR鉴定获得正确同源重组的阳性克隆。阳性ES细胞经克隆扩增后,注射入C57BL/6J小鼠的囊胚中,获得嵌合鼠,筛选出高比例嵌合小鼠与野生型C57BL/6J小鼠交配后获得阳性F1代小鼠,并分别进行PCR和测序鉴定。结果成功构建打靶载体,共获得144个抗性ES细胞,克隆经长片段PCR鉴定,共获得4个正确同源重组的阳性克隆。获得4只阳性F1代小鼠,经测序鉴定正确。Xbp1基因flox杂合子小鼠表型无明显异常。结论成功构建了条件性敲除Xbp1基因的flox杂合子小鼠,为未来研究器官或组织特异性的Xbp1生物学作用奠定了基础。(本文来源于《中华肾病研究电子杂志》期刊2019年01期）
李昊,师建辉,魏纯纯,麻献华,陈玉霞[6]（2019）在《碳水化合物反应元件结合蛋白条件性基因敲除小鼠模型的建立及鉴定》一文中研究指出目的建立转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)的条件性基因敲除小鼠模型,为研究ChREBP的体内生物学功能提供技术手段。方法和结果利用Cre/loxP基因打靶策略,通过构建基因打靶载体和基于胚胎干细胞(ES细胞)的基因同源重组,在ChREBP基因第8外显子的两侧分别引入loxP位点;将打靶成功的ES细胞显微注射至小鼠囊胚,然后植入假孕雌鼠子宫获得嵌合鼠,进一步获得可种系传代的ChREBP?ox/+小鼠;将ChREBP?ox/+小鼠与Alb-Cre小鼠交配,获得ChREBP的肝脏特异性基因敲除小鼠。结论建立了ChREBP条件性基因敲除小鼠模型,为揭示不同组织中ChREBP的生理功能和病理学意义提供了重要手段。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊2019年02期）
胡乐,李禹杨,柯志勇,张月,张武锔[7]（2019）在《肢芽间充质干细胞条件性FKBP38基因敲除小鼠模型的构建》一文中研究指出目的构建并鉴定条件性肢芽间充质干细胞FKBP38基因敲除小鼠,为研究FKBP38基因在骨发育及骨关节炎中的作用机制提供动物模型。方法将Prrx1-Cre小鼠与FKBP38~(flox/flox)交配繁殖出F1代小鼠,得到基因型为Prrx1-Cre(Fkbp38~(flox/+))小鼠;选基因型Prrx1-Cre(Fkbp38~(flox/+))的小鼠与FKBP38~(flox/flox)小鼠杂交获得F2代小鼠;基因型为Prrx1-Cre(Fkbp38~(flox/flox))的小鼠即为本实验所需要构建模型小鼠。3周龄鉴定小鼠基因型,4周龄时用Western blot验证FKBP38基因敲除效果。结果 F2代小鼠中包含基因敲除鼠,PCR结果显示基因型为Cre/FKBP38~(flox/flox),Western blot结果显示FKBP38基因敲除效果明显。结论基于Cre/loxp重组酶系统,繁殖出肢芽间充质干细胞FKBP38基因敲除鼠,为在动物水平上探究FKBP38在骨发育及骨关节炎的作用机制提供模型基础。(本文来源于《分子影像学杂志》期刊2019年01期）
熊毅,宫苹,伍颖颖[8]（2018）在《成骨细胞条件性FoxO1基因敲除糖尿病小鼠模型的建立》一文中研究指出目的建立成骨细胞条件性FoxO1基因敲除的糖尿病小鼠模型,并进行初步的表型研究。方法设计基因敲除策略,获得野生型和纯合小鼠。提取鼠尾组织DNA,经聚合酶链式反应(PCR)扩增后鉴定其基因型。分别提取小鼠原代成骨细胞mRNA和蛋白质,以及其他组织的mRNA,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot技术检验FoxO1的表达。在不同时间点监测小鼠体重、血糖,并进行胰岛素耐受实验。结果成功建立FoxO1基因敲除小鼠模型并诱发糖尿病,糖尿病小鼠从第2周开始体重明显低于正常小鼠。在糖尿病条件下,纯合小鼠血糖值明显低于野生型小鼠,其胰岛素敏感性明显高于野生型小鼠。结论成功建立了成骨细胞条件性FoxO1基因敲除小鼠模型;FoxO1基因敲除可改善糖尿病小鼠的高糖血症,可能是由于FoxO1基因敲除增加了糖尿病小鼠的胰岛素敏感性。(本文来源于《国际口腔医学杂志》期刊2018年02期）
李福兴,胡超,何薇,乔晓红,谢晓恬[9]（2018）在《血液系统条件性DNMT3B基因敲除小鼠的构建及鉴定》一文中研究指出目的构建可在血液系统中条件性敲除DNMT3B基因小鼠并进行鉴定,为研究DNMT3B基因的生物学功能及其在血液肿瘤疾病的作用机制提供动物模型。方法将引进的DNMT3B~(flox/flox)小鼠与Mx1-Cre~+小鼠进行杂交繁殖,得到基因型DNMT3B~(flox/+)Mx1-Cre~+及DNMT3B~(flox/+)Mx1-Cre~-两种子代,再用这两种子代杂交产生子代小鼠,通过PCR法鉴定子代小鼠的基因型;获得基因型为DNMT3B~(flox/flox )Mx1-Cre~+的小鼠,通过腹腔注射p I-p C共5次诱导DNMT3B敲除,然后用半定量PCR方法鉴定DNMT3B基因敲除情况。结果基因型鉴定确认在13只子鼠中有2只为DNMT3B~(flox/flox) Mx1-Cre~+,经p I-p C腹腔注射后,DNMT3B基因通过Cre/lox P系统被成功敲除。结论该方法成功构建可以在血液系统条件性敲除DNMT3B基因的小鼠,并进行敲除后鉴定。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2018年06期）
赖舒畅,邱鸿,王肖,潘道延,王桢钰[10]（2018）在《条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠构建及鉴定》一文中研究指出目的构建并鉴定条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为研究DEPTOR基因在糖尿病发生机制的研究提供动物模型。方法将引进的条件性胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶小鼠与DEPTOR~(loxp/loxp)小鼠进行杂交繁殖,并对子代进行基因型鉴定,获得基因型为DEPTOR~(loxp/-)Cre~(+/-)的小鼠;再让DEPTOR~(loxp/-)Cre~(+/-)的小鼠与DEPTOR~(loxp/loxp)小鼠杂交获得DEPTOR~(loxp/loxp)Cre~(+/-)小鼠;基因型为DEPTOR~(loxp/loxp)Cre~(+/-)的小鼠即为本实验所需要构建模型小鼠。3周龄时通过PCR法鉴定小鼠的基因型;8周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导Cre重组酶表达后,免疫荧光验证DEPTOR基因敲除效果。结果从引进这两种小鼠开始繁殖10个月,共获得基因型为DEPTOR~(loxp/loxp)Cre~(+/-)的小鼠10只,PCR结果证实小鼠的基因型符合DEPTOR~(loxp/loxp)Cre~(+/-)。免疫荧光结果提示敲除效果明显。结论利用Cre/loxp系统,本研究成功构建并鉴定了条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为在动物水平研究DEPTOR基因在糖尿病发病机制中的作用提供研究平台。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2018年04期）
条件性基因敲除小鼠论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建条件性胰岛β细胞钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase,CASK)基因敲除小鼠,为研究CASK基因在糖尿病发生中的机制提供动物模型。方法:将CASKloxp/-雌鼠与CASKloxp/Y雄鼠杂交,获得基因型为CASKloxp/loxp雌鼠、CASKloxp/Y雄鼠;再让条件性胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶雄鼠与CASKloxp/loxp雌鼠杂交获得CASKloxP/YMIP-Cre雄鼠和CASKloxP/-MIP-Cre雌鼠。CASKloxP/YMIP-Cre基因型小鼠即为本实验所需要构建的模型小鼠。小鼠生后1～2周剪尾,通过PCR鉴定小鼠基因型,4～5周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导Cre重组酶表达后,利用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹技术验证CASK基因敲除效果。结果:从引进这两种小鼠开始,繁殖10个月,共获得基因型为CASKloxP/YMIP-Cre的雄鼠28只,PCR结果证实小鼠基因型符合CASKloxP/YMIP-Cre。实时荧光定量PCR、蛋白质印迹结果显示CASKloxP/YMIP-Cre小鼠胰岛CASK表达量明显下降。结论:利用Cre/loxp系统,成功构建了条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠,为在动物水平研究CASK基因在糖尿病发病机制中的作用提供了研究平台。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
条件性基因敲除小鼠论文参考文献
[1].胡乐,刘文,张武锔,张月.条件性骨细胞Tsc1基因敲除小鼠的初步研究[J].广东医学.2019
[2].袁清照,谢金阳,刘星婧,袁栎,王尧.条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠的构建及鉴定[J].南京医科大学学报(自然科学版).2019
[3].王红,孙鹏,王岩,张武锔,张晟.成骨细胞条件性FKBP8基因敲除小鼠模型构建[J].中国实验诊断学.2019
[4].王婷婷,卜歆,李金奎,王娜,邱意开.DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析[J].中国现代医学杂志.2019
[5].刘天喜,宋琼,许国双,刘永鑫.X-盒结合蛋白1条件性基因敲除小鼠模型的建立[J].中华肾病研究电子杂志.2019
[6].李昊,师建辉,魏纯纯,麻献华,陈玉霞.碳水化合物反应元件结合蛋白条件性基因敲除小鼠模型的建立及鉴定[J].第二军医大学学报.2019
[7].胡乐,李禹杨,柯志勇,张月,张武锔.肢芽间充质干细胞条件性FKBP38基因敲除小鼠模型的构建[J].分子影像学杂志.2019
[8].熊毅,宫苹,伍颖颖.成骨细胞条件性FoxO1基因敲除糖尿病小鼠模型的建立[J].国际口腔医学杂志.2018
[9].李福兴,胡超,何薇,乔晓红,谢晓恬.血液系统条件性DNMT3B基因敲除小鼠的构建及鉴定[J].中国现代医学杂志.2018
[10].赖舒畅,邱鸿,王肖,潘道延,王桢钰.条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠构建及鉴定[J].实用医学杂志.2018
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