论文摘要
菊粉酶是一类能够将菊粉水解成果糖和低聚果糖的酶,它广泛应用于糖浆和果糖的工业生产.为了深入研究菊粉酶的结构与功能特征,我们解析了马克斯克鲁维酵母ATCC12424的外切菊粉酶INU1的晶体结构.通过毕赤酵母SMD1168(his4,pep4)对INU1进行了分泌表达,其体积酶活达到了1 671U/mL.使用阴离子交换柱对INU1进行纯化并结晶解析了结构,INU1的晶体属于空间群I4122,晶胞参数a=b=c=172.65,在上海同步辐射光源其衍射分辨率为2.8,一个非对称单位中有两个INU1分子以面对面方式堆积成二聚体.INU1的晶体结构与GH32(糖苷水解酶32)家族其他蛋白一致,主要由N端保守的5个β螺旋桨结构域和C端不保守的β夹层结构域组成.氨基酸序列和晶体结构对比显示,INU1的催化位点为Asp53,Asp182和Glu238.这个晶体结构为菊粉酶INU1的进一步改造以适应工业化生产提供了基础.
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 李龙,苏晓琴,方自安,周峻岗,胡小健,吕红
关键词: 菊粉酶,外切菊粉酶,菊粉,马克斯克鲁维酵母,晶体结构
来源: 复旦学报(自然科学版) 2019年04期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 复旦大学生命科学学院,上海工业微生物工程技术研究中心
基金: 国家重点基础研究发展计划(2013AA102803,2014AA021301),上海市科学技术委员会项目(13DZ2252000)
分类号: Q55
DOI: 10.15943/j.cnki.fdxb-jns.2019.04.010
页码: 482-488
总页数: 7
文件大小: 5467K
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