导读:本文包含了辐射增敏论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,敏感性,肺癌,地龙,射线,粒子,纳米。
辐射增敏论文文献综述
信瑞,田建国,姜民,曲丹华[1]（2019）在《干扰EZH2表达对B淋巴瘤Ramos细胞的辐射增敏作用及其机制研究》一文中研究指出目的探究干扰EZH2表达对B淋巴瘤Ramos细胞的辐射增敏作用及其机制。方法首先使用shRNA转染敲除淋巴瘤Ramos细胞EZH2表达,将细胞分为空白对照组、阴性shRNA组、shEZH2组。使用CCK-8法检测细胞增殖,克隆形成实验检测细胞放射增敏比(SERDO值比),流式细胞术观察细胞凋亡率和细胞周期分布,western bloting检测EZH2及NF-κB等相关蛋白表达。结果 shEZH2转染后,淋巴瘤Ramos细胞EZH2表达明显下调(P=0.004)。与阴性shRNA组相比,4Gyγ-射线辐射条件下,shEZH2组96h细胞存活率、12d克隆形成数目和24h细胞凋亡率均明显降低(P=0.003;P=0.027;P=0.029),多靶单击模型分析显示EZH2处理对Ramos细胞的细胞放射增敏比为1.73。流式细胞术显示,阴性shRNA组G2/M期占比为(17.94±2.17)%,shEZH2联合辐射组G2/M期占比为(39.43±3.69)%,G2/M期占比明显升高(P=0.019)。western bloting结果显示shEZH2组NF-kB及其靶基因蛋白p53和Bax表达均明显降低(P=0.008;P=0.025;P=0.014)。结论干扰EZH2表达能够增强B淋巴瘤Ramos细胞的辐射敏感性,其机制可能与调控细胞周期G2/M期细胞阻滞和NF-κB通路有关。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2019年12期）
李翡翡,李子厚,金晓东,吴爱国,陈卫强[2]（2019）在《氧化钆纳米粒子对A549肺癌细胞的辐射增敏效应研究》一文中研究指出采用氧化钆纳米粒子(GON),研究钆基纳米粒子对X射线和碳离子束的辐射增敏效应。首先,通过透射电镜观察材料粒径,使用DLS检测材料的水合半径及Zeta电位,并用紫外吸收谱证实GON在培养基中稳定性较好;研究发现钆(Gd)浓度为10.0μg/mL的GON对30 keV/μm碳离子束辐照水溶液产生的羟自由基的增强系数为1.13;GON对A549肺癌细胞和正常MRC-5肺细胞没有明显的毒性,且在人肺癌A549细胞中的摄取量随共培养浓度的增加而增加,在10.0μg/mL共培养浓度下,细胞摄入Gd的量为0.73 pg/cell;进一步采用克隆存活实验证明,GON的加入对X射线和碳离子辐照A549细胞所产生的损伤具有明显的增强,在10%的细胞存活水平下,GON对A549细胞在X射线及碳离子辐照下的辐射增敏分别达15.5%和10.1%。鉴于钆材料常被用于磁共振成像(MRI),所获得的GON有望作为X射线和碳离子的诊疗一体化材料。(本文来源于《原子核物理评论》期刊2019年03期）
何悦,肖会敏,康晓刚,李玙,郭军[3]（2019）在《地龙胶囊及其主成分对小鼠移植瘤S_(180)辐射增敏的研究》一文中研究指出目的观察地龙胶囊(DLC)及其主成分(MC,由尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷、鸟苷、色氨酸、尿嘧啶核苷、2′-脱氧肌苷和2′-脱氧鸟苷等组成)的体内抗肿瘤活性,探讨其体内抑瘤作用机制。方法①取DLC低、中和高剂量组以及MC1、MC2和MC3,对小鼠S_(180)肉瘤细胞实体瘤模型进行体内抑瘤及合用~(60)Co-γ射线放射增效实验,测定肿瘤质量、脾脏与胸腺质量等的变化,计算抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数,检测肿瘤中Bax和Bcl-2蛋白表达及小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量变化;②通过对荷瘤小鼠单核细胞吞噬系统(RES)进行实验,计算吞噬指数K及吞噬系数α对荷瘤小鼠迟发性免疫反应的实验,计算抑瘤率、脾脏指数和胸腺指数。结果①DLC低、中和高剂量组以及MC1、MC2和MC3组对小鼠S_(180)肉瘤的抑瘤率分别为36.32%,45.06%,52.03%,36.11%,36.26%和45.08%;合用放疗(RT)抑瘤率分别为64.6%,69.4%,73.3%,62.7%,62.4%和68.6%;②DLC高、中、低剂量组以及MC1、MC2和MC3组小鼠的吞噬指数K及吞噬系数α均显著增加,能有效提高荷瘤小鼠细胞免疫的水平;③DLC中、高剂量组和MC3组肿瘤组织中Bcl-2阳性表达低于模型组,而Bax阳性表达高于模型组;RT+DLC 3个剂量组以及RT+MC3组肿瘤组织中Bcl-2阳性表达显着低于模型组,而Bax阳性表达显着高于模型组;④DLC中、高剂量组以及RT+MC3组小鼠血清中TNF-α的含量大于模型组,5-Fu可增加荷瘤小鼠血清TNF-α含量,小于DLC高剂量组;RT+DLC中、高剂量组以及RT+MC3组小鼠血清中TNF-α的含量大于模型对照组,5-Fu组可增加荷瘤小鼠血清TNF-α的含量,小于DLC高剂量组。结论 DLC、MC1、MC2与MC3对小鼠S_(180)肉瘤的生长有明显的抑制作用,具有放射增敏效应,同时说明MC1、MC2和MC3可能是DLC的主要功效成分,其作用机制可能与免疫调节、促进TNF-α产生及调节Bcl-2/Bax凋亡通路有关。(本文来源于《西北药学杂志》期刊2019年05期）
李翡翡[4]（2019）在《非小细胞肺癌辐射敏感性特征分子及钆基纳米材料辐射增敏机制研究》一文中研究指出非小细胞肺癌(NSCLC)在全球均有较高的发病率和死亡率,尽管60%-70%的NSCLC病人均接受过放疗,但受辐射抗性等因素的制约,NSCLC放疗疗效不佳、预后较差。围绕着这些临床问题,本论文着重研究非小细胞肺癌的辐射抗性机制,探索通过诊疗一体化材料提高非小细胞肺癌对电离辐射的敏感性,并对诊疗一体化材料的辐射增敏机制进行探究。主要的研究内容包括:首先,基于分次辐照筛选所得、对X射线具获得性抗性的单克隆细胞系和亲本对照细胞,通过TMT标记和蛋白组学技术,探究NSCLC辐射抗性相关的特征分子。结果发现:所得5224个差异表达蛋白中以倍比变化2倍,且p<0.05筛选得到48个差异表达蛋白;其中CRIP2、ARHGDIB和PADI3的表达在A549-R11抗性细胞系中升高,且在mRNA和蛋白水平均得以验证;进一步的生物信息学分析可知CRIP2可作为有效的预测NSCLC放疗预后的分子标志物,也可能通过抑制凋亡和细胞周期,从而调控NSCLC辐射抗性;此外,CRIP2表达较高的病人可能更适用于重离子或质子束放疗。CRIP2等差异表达蛋白的探究可以为揭示辐射抗性的复杂机制提供基础,并有助于促进个性化医疗及精准放疗的发展。然后,以A549,NH1299和NH1650为研究对象,使用“多元醇法”合成的氧化钆纳米粒子GON,用以探究GON增强NSCLC细胞对X射线和重离子的辐射敏感性的效应及相关机制。结果表明:细胞存活率为10%时,GON对X射线和重离子的辐射增敏比分别为19.3%—26.3%和10.12%—19.6%。GON显着促进了羟自由基和ROS的产生,且呈辐照剂量和GON浓度依赖型增强;经自噬抑制剂3-MA相关实验发现无论是X射线还是重离子束辐照,GON均诱导3种NSCLC细胞发生了促死亡型的自噬;此外,GON也增强了A549和NH1650细胞的凋亡发生率。不同之处在于X射线与GON联合处理主要诱导了内质网应激等胞质内损伤;而GON与重离子联合处理主要引起DSB等细胞核损伤。GON相关增敏机制的探究,有望为诊疗一体化材料的临床使用提供实验基础。基于“辐射抗性”特征分子和“辐射增敏”相关机制的探究,本论文研究工作为提高临床放疗的靶标性和有效性、临床上治疗射线的选择、以及临床的诊疗一体化提供了实验依据。(本文来源于《中国科学院大学(中国科学院近代物理研究所)》期刊2019-06-01）
蔺兴遥,刘炳涛,马晓辉,张扬,陈卫强[5]（2019）在《和厚朴酚对非小细胞肺癌细胞的辐射增敏效应》一文中研究指出研究了和厚朴酚(HNK)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549和H1299对低线性能量转移(LET)X射线和高LET碳离子的辐射增敏效应。首先用CCK-8检测了HNK对A549和H1299细胞的生长抑制情况,发现20μmol/L的HNK处理对细胞的生长抑制作用较弱。用该浓度HNK预处理细胞2 h后给予不同剂量X射线或碳离子的照射,克隆存活法检测细胞的辐射敏感性,Annexin-PI双染法检测细胞凋亡,γH2AX焦点法检测DNA的双链断裂(DSB)损伤。实验结果显示:与X射线相比,NSCLC细胞对碳离子更敏感,HNK预处理仅对碳离子照射有辐射增敏作用;与碳离子单独照射相比,HNK预处理联合碳离子照射诱导了更明显的细胞凋亡;在照射后24 h,HNK预处理联合碳离子照射引起的细胞γH2AX焦点阳性率维持在较高水平,而X射线照射没有这些效应。实验结果表明,HNK预处理抑制了NSCLC细胞DNA的DSB修复,诱导了细胞凋亡的发生,从而提高了细胞对碳离子的辐射敏感性。(本文来源于《原子核物理评论》期刊2019年01期）
李博雅[6]（2019）在《MiR-615-3p对黑色素瘤的增殖抑制和辐射增敏作用的研究》一文中研究指出黑色素瘤具有恶性程度高、生长迅速、预后差等特点,近年来其发病率和死亡率急剧上升,引起较广泛的社会关注。放射治疗是恶性肿瘤治疗的主要手段之一,也是晚期黑色素瘤的主要治疗方法,但治疗中常易出现放疗耐受性增加,直接影响黑色素瘤的治疗效果,如何降低黑色素瘤的放疗耐受并研究其可能存在的相关机制关系到患者的预后生存,对临床治疗意义重大。MicroRNA(miRNA)是一类广泛存在于真核生物长度约为22个核苷酸的小分子单链RNA,目前已知的miRNA最广泛的功能是通过其种子序列识别靶基因mRNA 3’-UTR上的结合位点,抑制其靶基因的表达。研究发现miRNA能调节人类近1/3的基因,miRNA的基因调控作用也是一个复杂的网络状结构,目前越来越多的研究表明miRNA与肿瘤的进展有着密切的关系,并且部分miRNA在肿瘤的放射治疗中也发挥重要作用。研究表明,miR-615-3p可影响多种肿瘤的发生发展,发挥抑制肿瘤的作用,但在黑色素瘤中的作用及其机制仍不清楚,并且其对黑色素瘤放疗疗效的影响尚未见报道。目的:研究miR-615-3p对黑色素瘤A375细胞生物行为的影响,发掘miR-615-3p发挥作用潜在的靶基因,以及miR-615-3p在黑色素瘤细胞放射治疗中发挥的作用及其相关的分子机制。方法:过表达或抑制黑色素瘤A375细胞内miR-615-3p的表达水平,CCK-8法及RTCA测定A375细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移能力;检测细胞克隆集落形成;流式细胞术检测细胞周期。利用Starbase数据库预测miR-615-3p可能作用的靶基因,qRT-PCR及Western blotting法筛选并验证。将A375细胞稳定过表达或抑制miR-615-3p表达水平,48 h后给予5 Gy X射线辐射,RTCA实时监测细胞增殖,Western blotting法检测细胞内DNA损伤及凋亡相关蛋白的表达。结果:1.A375细胞内miR-615-3p过表达后,细胞增殖率降低,细胞迁移能力下降,克隆集落形成减少,细胞周期阻滞增加且主要发生于G1期;抑制细胞内miR-615-3p表达后,细胞增殖率及细胞迁移能力升高,克隆集落形成增加,细胞周期阻滞降低。2.对Starbase数据库预测结果进行验证,结果显示SPIN1蛋白与miR-615-3p可能存在作用关系,过表达miR-615-3p后,SPIN1的mRNA及蛋白表达水平明显降低,而抑制miR-615-3p则引起SPIN1的蛋白表达水平升高。3.过表达A375细胞内miR-615-3p水平并给予X射线辐射后,导致细胞增殖呈时间依赖性下降,DNA损伤相关蛋白γH2AX表达水平升高,凋亡相关蛋白Bax及caspase-3表达升高;抑制细胞内miR-615-3p水平并给予射线辐射后,细胞增殖升高,γH2AX、Bax及caspase-3蛋白表达水平均下降。结论:miR-615-3p可抑制黑色素瘤A375细胞的增殖、迁移、克隆形成,并导致细胞周期阻滞;SPIN1蛋白可能是miR-615-3p作用的潜在靶基因,miR-615-3p可经抑制SPIN1的表达影响细胞增殖;miR-615-3p对A375细胞具有辐射增敏作用,可促进辐射所致的细胞DNA损伤及凋亡发生。(本文来源于《兰州大学》期刊2019-03-01）
李颖,周群,王义善,杨桂青[7]（2018）在《黑蒜提取液对宫颈癌HeLa细胞移植瘤辐射增敏及保护机制研究》一文中研究指出目的:观察黑蒜提取液对宫颈癌He La细胞移植瘤辐射增敏及保护机制。方法:通过构建宫颈癌He La细胞小鼠皮下移植瘤模型,并将其随机分成4组,空白对照组、γ照射组、黑蒜组、黑蒜+γ照射组。将其分别用生理盐水、γ射线照射、黑蒜提取液、黑蒜提取液联合γ射线照射来进行处理,然后对各组移植瘤生长的速度进行观察。实验完成后,将参与实验的小鼠处死,除去瘤体后,称量小鼠的体质量,通过计算得到肿瘤生长抑制率。称量胸腺和脾脏质量,计算胸腺指数与脾脏指数。计算Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞刺激指数、外周血白细胞计数个数。通过紫外分光光度计法检测各组小鼠血清中超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)及过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力变化。结果:与γ照射组及空白对照组比较,黑蒜提取液+γ照射组小鼠移植瘤生长速度得到有效抑制(P <0. 05);与空白对照组比较,γ照射组胸腺及脾脏指数明显降低,黑蒜组及黑蒜+γ照射组胸腺及脾脏指数升高(P <0. 05),与γ照射组比较,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠胸腺及脾脏指数升高(P <0. 05);γ照射组淋巴细胞刺激指数(1. 257 2±0. 238 0),黑蒜提取液+γ照射组淋巴细胞刺激指数(1. 826 1±0. 301),可见黑蒜提取液可显着促进脾淋巴细胞增殖反应;与空白对照组比较,γ照射组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现下降趋势,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现上升趋势(P <0. 05),与γ照射组比较,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现上升趋势(P <0. 05)。结论:黑蒜提取液对He La细胞移植瘤具有辐射增敏作用,通过增强免疫功能,提高外周血白细胞计数和机体抗氧化能力,以提高对机体的辐射保护作用。(本文来源于《中医学报》期刊2018年10期）
郭佳铭[8]（2018）在《MPLA辐射防护作用及ACSL6敲除放射增敏研究》一文中研究指出研究背景:随着电离辐射的日益广泛应用,开发低毒高效的辐射防护剂迫在眉睫。近年来,NF-κB逐渐成为辐射防护领域的研究热点,对其激活可诱发细胞多种促存活事件,对正常组织产生辐射防护作用。然而,激活NF-κB还可引发炎症因子爆发、肿瘤细胞能量代谢改变等诸多反应。因此,如何驾驭NF-κB使其发挥对正常组织的辐射防护作用,避免其副作用,增强肿瘤放疗效果,引起了我们的研究兴趣。研究表明,通过TLRs受体激活NF-κB可以很好地实现这一目的。因此,本课题第一部分围绕新型TLR4激动剂MPLA对小鼠多器官辐射损伤防护效应及机制展开了研究。此外,还针对MPLA对肿瘤细胞放射敏感性的影响进行了检验。在第二部分中,则主要围绕IR对癌细胞NF-κB相关代谢关键酶ACSL家族的影响、Acsl6在调节肿瘤放疗敏感性方面的重要作用及其分子机制、MPLA联合敲除Acsl6基因提高肿瘤细胞放射敏感性等几个方面展开了深入研究。研究目的:1.明确MPLA体内外辐射防护效应2.探索MPLA辐射防护作用的分子机制3.检测MPLA对肿瘤细胞放射敏感性的影响4.对癌细胞照后不同ACSL同工酶转录水平变化进行筛选5.验证Acsl6敲除提高肿瘤细胞放射敏感性的作用6.探究Acsl6敲除放射增敏机制7.初步验证MPLA联合ACSL6敲除可提高肿瘤放疗效果研究方法:1.细胞培养与处理:采用HUVEC,L02,RAW264.7,LLC和RM9细胞。MPLA给药实验于IR前12小时加药(1μg/ml用DMSO溶解),对照组给予相应剂量DMSO。2.实验动物:动物实验采用6—8周龄的野生型C57BL/6小鼠,TLR4(-/-)小鼠以及TRIF突变型小鼠(TRIF~(mutant))。MPLA给药以生理盐水溶解,剂量为1μg/mouse,0.1ml/mouse,方式为灌胃强饲,时间为IR前12h。3.γ射线照射:第一部分采用海军军医大学辐照中心Co~(60)-γ射线照射源;第二部分采用美国德州大学西南医学中心放射肿瘤学部分子放射生物学系~(137)Cs-γ射线照射源。4.细胞活力检测:采用CCK-8法检测细胞活力。5.凋亡检测:采用Annexin V/PI双染法以流式细胞术检测细胞凋亡。6.细胞周期检测:应用PI单染法检测,FlowJo软件分析。7.动物取材:照后不同时间点处死小鼠,分离组织,制作单细胞悬液。8.彗星电泳实验:采用玻片双层凝胶法以中性细胞电泳进行。9.Western Blot:参照WB实验一般流程进行。10.ELISA实验:采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测小鼠血清细胞因子。11.组织学检测:采用石蜡切片+H&E染色法对动物组织进行组织学检测。12.p65、γ-H2AX免疫荧光分析:主要步骤:制作细胞爬片、施加处理因素、固定、穿膜、封闭、孵育一抗二抗、封片、观察分析。13.NF-κB荧光素酶检测:经过构建NF-κB基因与荧光素酶基因的融合质粒,转染后以荧光素酶报告基因检测试剂盒进行检测。14.克隆形成实验:所有克隆形成实验均采用直径为6cm的细胞培养皿进行细胞培养、血球计数板进行细胞计数(以确保细胞分散良好)、先铺板后照射、无水乙醇固定、结晶紫染色、Oxford Optronix细胞群落计数器自动计数(确保计数客观)、SigmaPlot 13.0分析作图(LQ模型拟合生存曲线)。15.qRT-PCR实验:主要步骤:总RNA抽提、逆转录cDNA、实时荧光定量PCR。16.Acsl6 KO细胞的构建:我们以CRISPR Cas9技术构建KO细胞系,最后经过有限稀释法筛选稳定敲除了目的基因的细胞株。17.Acsl6 KO Rescue细胞株构建:首先构建含有FLAG和Acsl6 cDNA的质粒,经过转化、克隆筛选、质粒扩增与鉴定,将得到目的质粒转染进入LLC细胞,用G418进行施压、筛选,最后以WB进行蛋白鉴定。18.细胞糖酵解检测:采用Cayman的L-Lactate检测试剂盒,通过比色法检测细胞外L-乳酸的水平进而反映细胞糖酵解程度。19.ROS检测:本实验主要采用了CM-H2DCFDA试剂盒进行ROS标记染色,并以流式细胞术检测荧光信号来反应待测细胞ROS水平。20.AVOs染色细胞自噬检测:采用吖啶橙染色法标记酸性自噬小体、裂解小体等,结合荧光显微镜拍照以及流式细胞仪定量的方法完成。21.统计分析:应用Excel、SPSS 21对数据进行统计分析,以GraphPad Prism 6、SigmaPlot 13.0进行绘图。两组间比较用两独立样本的t检验进行,P值小于0.05认为其具有统计学意义。研究结果:一、MPLA辐射防护作用及机制研究1.MPLA可以有效减轻IR所致细胞凋亡,促进细胞照后DNA损伤修复凋亡检测发现MPLA显着降低了IR引起的细胞凋亡;而细胞周期检测显示MPLA有效降低了IR导致的G2/M期周期阻滞;彗星电泳实验显示MPLA有效减少了IR所致细胞核拖尾程度,且OTM和TM值均显着降低。2.MPLA对照后小鼠体内造血系统的辐射防护作用IR引起了小鼠骨髓空虚化且损伤程度呈进行性加重,骨髓有核细胞计数于照后第叁天显着降低,而MPLA明显改善了这些损伤情况。同时,MPLA提高了照后小鼠B220~-且CD34~+骨髓细胞的比例。3.MPLA对小鼠脾脏具有TLR4依赖的辐射防护作用IR引起了小鼠脾脏白髓面积、数目明显缩小,而MPLA能够有效增加其白髓范围;脾细胞凋亡检测结果显示,MPLA能够明显降低辐射引发的脾细胞凋亡率,并且有效扭转了IR引发的脾细胞CD4~+/CD8~+比例失调。然而,这些MPLA对脾脏的辐射防护效果并未出现在TLR4-/-小鼠中,说明了该效应依赖TLR4而发挥。4.MPLA可减轻小鼠的睾丸、小肠辐射损伤,提高照后动物生存率MPLA显着改善了睾丸、小肠的组织学辐射损伤;且有效提高了不同致死剂量、不同照射方式下的动物生存率。5.MPLA的辐射防护作用依赖于TLR4我们以TLR4-/-小鼠为研究对象,发现MPLA未能扭转IR对骨髓、脾脏等造成的组织学损伤,不能改善骨髓有核细胞、脾细胞等的辐射损伤,说明MPLA的辐射防护作用依赖于TLR4受体而发挥。6.MPLA激活TLR4后启动MAPK信号通路(p38途径)并且提高了NF-kB p65核转位及其转录活性通过WB实验,我们发现MPLA促进了IKK-β的磷酸化,而免疫荧光实验显示MPLA诱导了明显的NF-κB p65核转位,与此同时,荧光素酶检测提示MPLA显着提高了细胞内NF-κB转录水平。7.MPLA主要通过Myd88介导TLR4信号通路转导以RAW264.7为研究对象,通过siRNA分别敲低TRIF以及Myd88基因,检测细胞凋亡。MPLA显着降低了IR引起的WT及TRIF KD细胞的凋亡率,而对Myd88KD细胞无保护作用。此外,通过对TRIF~(mutant)小鼠组织学检测发现,MPLA仅部分改善了IR造成的骨髓细胞缺失,而对脾脏组织结构损伤无影响。8.MPLA可改善IR引起的高炎性状态以及Th1/Th2免疫失衡以ELISA法检测不同处理组小鼠血清细胞因子含量。结果显示,MPLA+IR组中IL-6及TNF-α水平相对于IR组显着降低;进一步研究发现,MPLA能够改善IR造成的小鼠Th1/Th2免疫失衡。9.MPLA对LLC、RM9辐射敏感性的影响以LLC、RM9为研究对象,通过平板克隆形成实验检测MPLA对癌细胞辐射敏感性的影响。结果显示,MPLA均未增加两种肿瘤细胞辐射抗性。二、ACSL6对肿瘤细胞放射敏感性的影响及其分子机制研究1.ACSL系列同工酶对肿瘤细胞放射生物学反应的影响筛选通过qRT-PCR的手段分别对LLC及RM9 IR之后ACSL五种同工酶基因转录水平进行检测,发现只有Acsl6基因在IR之后48h显着上调;对于LLC,IR之后24h即出现了Acsl6的明显增高。2.构建Acsl6敲除细胞系利用CRISPR Cas9技术对LLC、RM9细胞成功进行了Acsl6基因的敲除以及稳定敲除细胞株的筛选。3.Acsl6 KO显着降低了肿瘤细胞IR之后克隆形成能力以LLC、LLC KO1、LLC KO3、RM9以及RM9 KO为研究对象,行克隆形成实验检测细胞的放射敏感性变化。结果显示,所有基因敲除组细胞克隆形成能力明显降低。4.Acsl6 KO参与LLC细胞Warburg效应的调节利用比色法检测了细胞外L-乳酸含量,以反映细胞的有氧糖酵解水平。实验结果显示,将Acsl6敲除之后,LLC在IR之后2h、24h的乳酸水平显着降低。然而,RM9细胞并未出现此现象。5.Acsl6 KO活化了LLC中能量代谢调控因子AMPK,但对RM9未产生明显影响AMPK可以负向调节Warburg效应,二者之间存在着紧密联系。我们以WB实验检测AMPK在各细胞株的磷酸化情况,发现在未照射或者10Gy照后,LLC KO1细胞在24h、48h时AMPKα磷酸化水平都显著上调,而此现象未出现在RM9细胞中。6.Acsl6 KO增加了γ-H2AX焦点的形成我们以LLC、LLC KO1、RM9、RM9 KO等细胞株为研究对象,行γ-H2AX免疫荧光实验。Acsl6敲除后使LLC、RM9核内γ-H2AX焦点数目都显着增加,反映了其DNA损伤修复能力的降低。7.Acsl6 KO通过AMPK-P53通路提高癌细胞内P53磷酸化水平及总P53浓度WB结果显示,Acsl6敲除后显着提高了LLC、RM9内P53磷酸化水平。IR提高了LLC中P53磷酸化水平,而敲除组细胞中升高更为明显,P53总量也显着上升;升高的磷酸化P53均可被ATM抑制剂KU-55933所阻断,而后者反而增加了AMPK的磷酸化水平。8.Acsl6 KO提高了LLC及RM9细胞内的ROS水平ROS检测发现LLC KO1和RM9 KO组CM-H2DCFDA波峰发生了明显的右偏移,其量化结果也显示敲除组细胞内ROS水平较WT组显着增高。9.Acsl6 KO促进了LLC细胞周期G1阻滞细胞周期检测发现敲除Acsl6基因后显着提高了LLC在IR之后16h、24h及32h的G1周期阻滞水平,而在2h和8h未发现显着差异。同时,我们发现这一现象并未出现在RM9中。10.Acsl6 KO增加了LLC及RM9的细胞自噬水平首先通过WB检测了各组细胞IR后LC3Ⅰ-Ⅱ的转化水平。实验显示Acsl6 KO提高了两种细胞的自噬水平,但以LLC更为迅速(IR后24h)。随后,行AOVs染色对细胞自噬进一步研究,得到了趋势一致的结果。11.Acsl6 KO基因回转细胞系的构建及其放射敏感性研究我们成功构建了Acsl6基因敲除回转的LLC KO Rescue2细胞株,行克隆形成实验,结果显示将Acsl6基因回转到敲除细胞株之后,其照后克隆形成能力显着回升。12.MPLA联合敲除Acsl6对LLC放射敏感性的影响以LLC及LLC KO1为研究对象,分别以DMSO、MPLA处理,IR后进行克隆形成实验,结果显示LLC KO1+MPLA组克隆形成能力最弱。研究结论:基于激活NF-κB而发挥辐射防护作用的TLRs激动剂在放射生物学领域已经得到了广泛重视,同时也是本室长期关注、重点研究的课题之一。本课题分为两个部分,分别对MPLA辐射防护作用及ACSL6敲除放射增敏进行了研究:第一部分中,我们首次发现并证实了新型TLR4激动剂MPLA能够有效发挥多器官低毒高效的辐射防护作用,并且较为明晰地揭示了其所依赖的“TLR4-Myd88-MAPK(p38)-NF-κB-纠正TH1/Th2、炎症因子调节”信号通路。此外,我们初步证明了MPLA直接作用于癌细胞不增加其辐射抗性。第二部分中,首次发现了IR能够诱发癌细胞Acsl6基因转录特异性上调;而敲除该基因之后,显着增加了癌细胞的放射敏感性;进一步研究发现,ACSL6调控癌细胞放射敏感性机制与Warburg效应、ROS、自噬、G1阻滞及DNA损伤修复通路等紧密相关;并且,MPLA联合敲除ACSL6基因提高肿瘤放疗效果展现了良好的前景,提供了诸多新型分子靶点。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2018-05-01）
刘静姝[9]（2018）在《薏苡仁酯对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞生物学行为的影响及放疗增敏作用》一文中研究指出第一部分:薏苡仁酯对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞生物学行为的影响目的:探讨薏苡仁酯(coixenolide,CXL)对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞增殖、凋亡及迁移的等生物学行为的影响,为下一步研究CXL以何种机制作用于鼻咽癌细胞提供理论及实验依据。方法:采用 CCK-8 法检测不同浓度 CXL(0、0.5、1、5、10、20g/L)分别作用于CNE-2R和CNE-2细胞24 h,48 h,72 h后细胞活性的改变;通过DAPI染色法检测不同浓度CXL(0、1、5、10g/L)分别作用于CNE-2R和CNE-2细胞72h后细胞凋亡的形态学改变,通过流式细胞术检测不同浓度CXL(0、1、5、10g/L)作用72h后对CNE-2R和CNE-2细胞凋亡水平的影响;通过Transwell实验检测不同浓度CXL(0、1、5、10 g/L)作用72h后对CNE-2R和CNE-2细胞迁移能力的影响。结果:CCK-8法显示CXL呈剂量-时间依赖性的抑制CNE-2R(24 h,48 h,72h 的 IC50 分别为 273.20 g/L,10.88 g/L和 4.55 g/L)和 CNE-2(24 h,48 h,72 h 的 IC50 分别为 256.60 g/L,5.44 g/L 和 2.43 g/L)的细胞活性;DAPI染色显示CXL组细胞中可见染色质边集、浓缩并分割为块状;与对照组相比,流式细胞术显示CXL作用于CNE-2R[(4.51±0.09)vs(11.68±3.54),p<0.05]和 CNE-2[(5.27 ± 0.14)vs(15.68 ± 2.76),p<0.05]细胞凋亡率均明显增加;Transwell实验显示CXL呈剂量依赖性显着抑制了 CNE-2R和CNE-2细胞的迁移能力。结论:该研究表明CXL可抑制同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞CNE-2R和CNE-2增殖和迁移的能力,同时能够诱导其凋亡,以上作用效应均呈剂量依赖性改变。第二部分:薏苡仁酯作用于同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞对线粒体通路蛋白表达的影响目的:探讨CXL诱导同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞凋亡的作用机制与线粒体通路凋亡蛋白表达的关系。为CXL抗鼻咽癌作用提供了理论及实验依据。方法:验证CXL分别作用于CNE-2R和CNE-2细胞0,24 h,48 h,72 h后,通过Western blot法检测细胞内相关凋亡基因Bax、Bcl-2、Caspase-9、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP 的蛋白表达水平以及 Bcl-2/Bax 比值。结果:Western blot 法显示,CXL 组 Bax、Caspase-9、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP蛋白表达量较对照组均显着增加(p<0.05),Bcl-2蛋白表达量显着降低(p<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(p<0.001);结论:CXL可能通过线粒体途径介导同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞的凋亡。第叁部分:薏苡仁酯对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞的放疗增敏作用目的:探讨CXL对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞放疗增敏的影响,为进一步逆转鼻咽癌辐射抗性、寻找潜在放疗增敏剂提供了理论及实验依据。方法:浓度为0.1 g/L CXL分别作用于CNE-2R和CNE-2细胞24 h后,分别接受剂量为0、2、4、8Gy的X线照射剂量,通过克隆形成实验计算SF、采用Graphpad软件拟合单击多靶存活模型并绘制存活曲线,求出其特征性参数n、Do和Dq等,并通过所得参数计算出CXL分别作用于CNE-2R和CNE-2细胞的放射增敏比SER,分析CXL对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞放疗增敏的影响。结果:克隆形成实验显示,0.1 g/L CXL作用于CNE-2R和CNE-2细胞24h后,经过0、2、4、8Gy的X射线照射,实验组细胞的SF均较空白组低,建立单击多靶模型并绘制存活曲线显示,经过0、2、4、8Gy的X射线照射后CXL处理的实验组存活曲线较空白组的存活曲线降低,求出CNE-2R以及CNE-2细胞的特征性参数n、Do和Dq,通过所得参数计算出CXL作用于CNE-2R和CNE-2细胞的放射增敏比SER分别为1.55,1.37,提示CXL对CNE-2R和CNE-2细胞有显着的放射增敏作用。结论:CXL对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞具有放疗增敏的作用。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2018-05-01）
董佳丽[10]（2018）在《虫草素对乳腺癌细胞辐射增敏作用及其机制的研究》一文中研究指出放射治疗是各种恶性肿瘤经典的治疗方法,但由于肿瘤辐射抗拒性等问题,影响着放疗的疗效和应用。为了寻找一个新颖有效的放射增敏剂,本文基于虫草素(Cordycepin)的抗肿瘤特性,旨在探讨虫草素对人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231辐射增敏的作用机制。MTT和克隆形成实验结果显示,虫草素对乳腺癌两种细胞系均有辐射增敏作用,能明显抑制细胞的增殖。为了探讨虫草素提高乳腺癌细胞辐射增敏的机制,我们采用流式细胞术进行分析,结果显示,虫草素可以提高电离辐射诱导的细胞凋亡能力。此外,辐照与虫草素联合处理组的活性氧(ROS)产生明显增多。通过免疫荧光检测组蛋白H2AX的磷酸化(γ-H2AX)水平,发现虫草素增加辐照诱导的γ-H2AX焦点的形成。通过实时定量荧光PCR方法以及蛋白免疫印迹试验,我们发现虫草素预处理的乳腺癌细胞系,辐照后其Nrf2的mRNA和蛋白水平显着降低,而且Nrf2的下游基因HO-1的mRNA水平变化与其趋势一致。此外,在体内实验的研究中,我们得出与体外实验一致的结果,即虫草素能够对乳腺癌细胞产生显着的辐射增敏作用以及降低Nrf2的蛋白表达水平。总之,这些结果均证实了虫草素通过Nrf2/HO-1/ROS信号轴提高对乳腺癌细胞系的辐射增敏作用。因此,我们的研究结果为虫草素在放射治疗中的功能和潜在机制提供了新的见解,并且虫草素在乳腺癌放疗临床实践中具有可观的应用潜力。目的研究3,3'-二吲哚甲烷(3,3-diindolylmethane,DIM)对2 Gy辐射损伤小鼠造血系统的保护作用。方法取雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组、照射组和照射+DIM组,每组10只小鼠。照射组和照射+DIM组小鼠接受2 Gy的137Cs γ-射线一次性全身照射。照射+DIM组小鼠在照射前30 min采用腹腔注射方法,注射浓度为75 mg/kg的DIM,对照组和照射组小鼠注射对照溶液。小鼠分别于受照后7 d和15 d每组处死5只,取外周血以测定血象,取骨髓细胞以测定有核细胞数、细胞内ROS水平以及克隆形成能力。结果与无辐照的对照组小鼠比较,照射组小鼠的外周血白细胞数量、血小板数量、骨髓有核细胞数目、粒单系集落形成单位、胸腺系数和脾脏系数显着下降,细胞内活性氧水平明显提高(P<0.05)。而且受照后7 d比15 d的辐射损伤效应更加严重。但是,腹腔注射DIM则明显地降低了辐照所诱导的小鼠辐射损伤效应(P<0.05)。结论DIM对于小鼠2Gy照射后造血损伤具有一定的保护作用,其作用可能是通过降低骨髓细胞中活性氧的水平。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2018-05-01）
辐射增敏论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
采用氧化钆纳米粒子(GON),研究钆基纳米粒子对X射线和碳离子束的辐射增敏效应。首先,通过透射电镜观察材料粒径,使用DLS检测材料的水合半径及Zeta电位,并用紫外吸收谱证实GON在培养基中稳定性较好;研究发现钆(Gd)浓度为10.0μg/mL的GON对30 keV/μm碳离子束辐照水溶液产生的羟自由基的增强系数为1.13;GON对A549肺癌细胞和正常MRC-5肺细胞没有明显的毒性,且在人肺癌A549细胞中的摄取量随共培养浓度的增加而增加,在10.0μg/mL共培养浓度下,细胞摄入Gd的量为0.73 pg/cell;进一步采用克隆存活实验证明,GON的加入对X射线和碳离子辐照A549细胞所产生的损伤具有明显的增强,在10%的细胞存活水平下,GON对A549细胞在X射线及碳离子辐照下的辐射增敏分别达15.5%和10.1%。鉴于钆材料常被用于磁共振成像(MRI),所获得的GON有望作为X射线和碳离子的诊疗一体化材料。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
辐射增敏论文参考文献
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