河弧菌中群体感应系统相关基因及信号分子检测

论文摘要

[目的]本文旨在研究河弧菌在30和37℃条件下群体感应信号分子CAI-1、AI-2和N-酰基高丝氨酸内酯（AHL）的动态变化水平以及群体感应系统相关基因在不同来源河弧菌菌株中的分布及信号分子产生情况。[方法]制备待测菌株的无菌培养上清液,分别用群体感应信号分子CAI-1、AI-2和AHL特异性检测菌株MM920、BB170和KYC55上清液中相应的信号分子。PCR检测不同来源河弧菌中群体感应系统组成的相关基因。通过测定偶氮酪蛋白的方法检测HapA蛋白酶活性。[结果]在30和37℃的培养条件下,河弧菌参考菌株VF85003菌液上清液中CAI-1、AI-2和AHL信号分子水平均随菌体密度的增加而升高。相同菌体密度时,37℃培养上清液中的CAI-1和AI-2水平高于30℃培养的,但AHL水平均低于30℃培养的。对70株不同来源的河弧菌菌株进行PCR检测,发现其中45株河弧菌含有全部群体感应系统组成的相关基因;45株菌株上清液中大多数的CAI-1、AI-2和AHL信号分子水平分布在100～1 000的范围内,但并非所有菌株都具有这3种信号分子。45株河弧菌中有48.89%的菌株HapA蛋白酶活性检测为阳性,51.11%的菌株检测结果为阴性。[结论]VF85003培养上清液中CAI-1、AI-2和AHL信号分子水平呈密度依赖性升高,AHL信号分子的表达水平在温暖的环境（30℃）温度下较宿主温度（37℃）下更高,而CAI-1、AI-2信号分子则相反,在宿主温度（37℃）条件表达更高,提示其在河弧菌致病性和环境适应性生存方面的不同作用。群体感应系统组成基因的分布、3种信号分子表达水平和毒力因子金属蛋白酶HapA活性存在菌株间差异。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株及培养条件
•   1.2 方法
•     1.2.1 PCR模板制备
•     1.2.2 菌株上清液的制备
•     1.2.3 CAI-1及AI-2信号分子检测
•     1.2.4 AHL信号分子检测
•     1.2.5 HapA蛋白活性检测
• 2 结果与分析
•   2.1 河弧菌模式菌株VF85003中CAI-1、AI-2和AHL信号分子的产生水平
•   2.2 70株河弧菌群体感应系统组成相关基因PCR扩增结果
•   2.3 45株河弧菌群体感应系统功能活性检测结果
•     2.3.1 CAI-1信号分子的检测结果
•     2.3.2 AI-2信号分子的检测结果
•     2.3.3 AHL信号分子的检测结果
•     2.3.4 HapA活性检测结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 胡晓,刁保卫,李杰,王卉,梁未丽

关键词: 河弧菌,群体感应,金属蛋白酶

来源: 南京农业大学学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

专业: 轻工业手工业,预防医学与卫生学

单位: 南京农业大学生命科学学院,中国疾病预防控制中心传染病预防控制所

基金: 国家重点研发计划项目(2017YFC1601503),国家自然科学基金项目(81772242)

分类号: R155.5

页码: 682-688

总页数: 7

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