无机载体吸附-交联固定化海洋脂肪酶技术研究

论文摘要

使用硅藻土载体和乙二醇缩水甘油醚进行吸附-交联固定海洋脂肪酶。采用单因素与正交实验结合的实验方案,确定最佳吸附条件为20℃,pH 5.0的0.1 mol/L柠檬酸钠缓冲液,载体投放量为2 g,吸附固定化时间为6 h。交联最佳温度条件为30℃,交联时间为6 h,乙二醇缩水甘油醚浓度为1.2%。吸附交联后酶活达124.83 U/g,酶活回收率高达67.31%。固定化脂肪酶连续操作5次依然保持良好的酶活性,对比游离酶,最适反应pH没有变化,但是最适反应温度固定化酶为50℃,提升5℃。同时,固定化脂肪酶显示出较好的机械稳定性和储存稳定性。结果证明硅藻土吸附-交联固定化海洋脂肪酶在工业酶固定化上有良好的应用前景。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 酶活的测定
•     1.2.2 橄榄油底物乳化液配制[22]
•     1.2.3 脂肪酶的固定化
•     1.2.4 固定化酶的酶活回收率技术
•   1.3 脂肪酶固定化单因素实验方法
•     1.3.1 载体的筛选
•     1.3.2 温度对吸附固定化的影响
•     1.3.3 缓冲液pH对吸附固定化的影响
•     1.3.4 缓冲液类型的选择
•     1.3.5 载体添加量对吸附固定化影响
•     1.3.6 固定化时间对吸附固定化的影响
•     1.3.7 吸附固定化条件优化正交实验
•   1.4 交联单因素实验
•     1.4.1 交联剂的筛选
•     1.4.2 交联时间对固定化的影响
•     1.4.3 交联剂的浓度对固定化的影响
•     1.4.4 交联温度对固定化的影响
•     1.4.5 交联条件优化正交实验
•   1.5 固定化酶的酶学性质
•     1.5.1 固定化酶与游离酶的最适反应pH
•     1.5.2 固定化酶与游离酶最适反应温度
•     1.5.3 固定化酶的操作稳定性
•     1.5.4 固定化酶储存稳定性
•     1.5.5 固定化酶与游离酶pH耐受性
• 2 结果与分析
•   2.1 吸附载体的筛选
•   2.2 固定化条件对脂肪酶吸附固定化的影响
•     2.2.1 固定化温度对脂肪酶吸附固定化的影响
•     2.2.2 缓冲液pH值及类型对脂肪酶吸附固定化的影响
•     2.2.3 硅藻土载体投放量对脂肪酶吸附固定化的影响
•     2.2.4 固定化时间对脂肪酶吸附固定化的影响
•     2.2.5 脂肪酶固定化条件优化正交实验
•   2.3 脂肪酶的交联实验
•     2.3.1 交联剂的筛选
•     2.3.2 交联时间对脂肪酶吸附固定化的影响
•     2.3.3 交联剂浓度对脂肪酶吸附固定化影响
•     2.3.4 交联温度对脂肪酶吸附固定化的影响
•     2.3.5 交联剂正交实验
•   2.4 酶学性质
•     2.4.1 最适反应pH值
•     2.4.2 最适反应温度
•     2.4.3 储存稳定性
•     2.4.4 操作稳定性
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 林海蛟,王云鹏,张云,孙爱君,胡云峰

关键词: 硅藻土,海洋脂肪酶,吸附,交联,固定化

来源: 江西农业大学学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 中国科学院南海海洋研究所/中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室,中国科学院大学,中国科学院南海海洋研究所/广东省海洋药物重点实验室,广州中医药大学中药学院

基金: 中国科学院战略性先导科技专项(XDA11030404),广东省海洋渔业科技攻关与研发方向项目(A201701C12),“科学”号高端用户项目(KEXUE2018G05),广州市科技计划项目(201510010012)~~

分类号: Q814.2

DOI: 10.13836/j.jjau.2019023

页码: 186-196

总页数: 11

文件大小: 1493K

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