导读:本文包含了胞外区论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:受体,细胞,表皮,杆状,生长因子,病毒,单克隆抗体。
胞外区论文文献综述
郎巧利,吴梦,黄楠,何琦琳,葛良鹏[1]（2019）在《伪狂犬病毒的gE蛋白胞外区真核表达以及单克隆抗体制备》一文中研究指出旨在构建gE基因胞外区真核表达载体,在HEK293F细胞中表达并纯化得到稳定的可溶性蛋白,并通过杂交瘤筛选获得表达gE蛋白的特异性单克隆抗体。生物信息学方法分析gE基因序列,构建gE胞外区真核表达载体pcDNA3.4-gE-6×His和pcDNA3.4-gE-m Fc,通过瞬时转染的方法在HEK293F细胞中进行表达并进一步纯化。通过Western blot和SDS-PAGE鉴定和比较gE-6×His和gE-mFc融合蛋白表达情况。利用伪狂犬灭活全病毒免疫小鼠,电融合获得杂交瘤融合细胞,通过gE-mFc蛋白和IFA筛选出稳定且特异性结合gE蛋白的阳性杂交瘤细胞株。结果表明,成功构建pcDNA3.4-gE-6×His和pcDNA3.4-gE-mFc表达载体,表达纯化得到gE-6×His和gE-mFc可溶性蛋白。比较发现gE-6×His蛋白表达量低,稳定性差。而gE-mFc蛋白表达量高,稳定性好,一次性纯化后纯度可达85%。进一步利用gE-mFc筛选获得9株稳定性和特异性高的阳性杂交瘤细胞株。首次利用哺乳动物细胞表达系统表达并获得稳定的可溶性gE蛋白,并利用其筛选获得g E特异性单克隆杂交瘤细胞株。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年11期）
张小娟,冯德明,李罗曼,苏丽丽,孙剑[2]（2019）在《BR3胞外区保守结构域附近刚性区域分析》一文中研究指出目的:分析BR3胞外区保守结构域附近刚性区域在BR3结合BAFF过程中的作用。方法:将BR3胞外区分成包含Dx L结构域的BR3-1和其C端相邻的BR3-2,构建BR3-1-Fc和BR3-2-Fc重组质粒。将正确的BR3-1-Fc和BR3-2-Fc重组子转入大肠杆菌BL21中,诱导表达,并用蛋白A凝胶亲和层析柱纯化获得相应蛋白。ELISA检测其结合BAFF,BR3-1/2小肽对BR3-1-Fc与BAFF结合活性的影响。结果:表达纯化出纯度高达90%的BR3-1-Fc和BR3-2-Fc融合蛋白。融合蛋白可与BAFF结合,且具有剂量依赖性。BR3-2小肽在高浓度条件下对BR3-1-Fc与BAFF的结合起促进作用,300μg/ml时,促进作用达20%。结论:BR3受体胞外区保守Dx L结构域相邻的BR3-2刚性结构区域也可与BAFF结合,在BR3与BAFF的高亲和性能中起作用,为进一步设计高亲和性能BAFF拮抗肽奠定了理论基础。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2019年06期）
赵冰冰,刘娜,肖敏,常宏建,任晓丽[3]（2018）在《犬表皮生长因子受体2胞外Ⅳ区(her-2-ECD-4)抗原表位分析及单克隆抗体制备》一文中研究指出为了制备犬her-2-ECD-4单克隆抗体并验证其识别的抗原序列,本研究利用TMHMM server2. 0、SWISS-MODLE、Prot Param及Sopma等分析软件,对该区域蛋白序列进行了理化性质分析、一级结构分析、二级结构分析以及叁级结构建模。综合以上各数据得出犬her-2-ECD-4可能的抗原表位为ecq(56-58)、ykd(80-82)、fade(106-109)、aeqras(134-139),在此基础上针对该区域制备了单克隆抗体,获得了3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为3-1B10、4-1B2、6-1C7,通过对杂交瘤细胞株的鉴定发现,3-1B10和4-1B2识别同一段抗原多肽,其中包括预测出的抗原表位ykd(80-82),它们的亚类鉴定结果也相同,均为Ig G1。6-1C7识别的抗原多肽含有ecq(56-58)这个预测表位,其亚类鉴定结果为Ig M。另外,通过Western Blot分析,发现本实验制备的单克隆抗体与犬乳腺肿瘤细胞系CHmm中提取的蛋白具有良好的反应性。本研究为下一步开展犬乳腺肿瘤的肿瘤标志物筛查诊断试剂盒研制及靶向治疗提供了基础。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2018年09期）
吕婷婷,孙丹,徐笑,邢波建,刘玉芬[4]（2018）在《绿头鸭TLR2a胞外区的克隆及序列分析》一文中研究指出Toll样受体作为一种重要的天然免疫因子,在抗感染中发挥重要作用,为了探究鸭TLR2a的遗传特征,研究采用RT-PCR技术克隆绿头鸭TLR2a胞外区,并对其进行序列分析。结果表明:鸭TLR2a胞外区全长1 788 bp,编码596个氨基酸残基,与鸡、鹅的同源性达85.50%以上,与其他哺乳动物同源性较低,在52.99%~56.63%之间,存在种属差异。研究对绿头鸭TLR2a胞外区的结构与序列特征进行分析,为鸭TLR2分子生物学研究奠定基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2018年16期）
乔佳明,张芝晴,张振勇,李少伟,夏宁邵[5]（2018）在《人CD4胞外区蛋白在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达纯化及性质鉴定》一文中研究指出目的:通过条件优化实现人CD4蛋白胞外区在杆状病毒-昆虫细胞表达系统中的高效表达,并对纯化获得的人CD4蛋白胞外区进行抗原性与免疫原性分析。方法:通过选择人CD4分子胞外片段构建重组杆状病毒(p Ac-CD4),然后感染昆虫细胞进行蛋白的表达,采用镍离子亲和层析纯化。运用SDS-PAGE、Western blot、体积排阻色谱、ELISA、SPR法等分析纯化得到目的蛋白的理化性质和抗原性。通过弗氏佐剂与目的蛋白混合免疫BALB/c小鼠,监测小鼠免疫血清的抗体生成。结果:经纯化可获得纯度90%以上的人CD4蛋白,每升细胞培养液最终可获得11.2 mg的目的蛋白,且该人CD4胞外区蛋白具有良好的抗原性。小鼠血清监测结果显示人CD4蛋白能有效刺激机体产生免疫应答,显示其具有良好的免疫原性。结论:本研究通过杆状病毒-昆虫细胞系统进行高效表达,获得抗原性和免疫原性良好的人CD4胞外区蛋白,为HIV受体和感染的研究奠定基础。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2018年08期）
方媛媛,汪亚男,胡龙霞,聂蓉,刘文斌[6]（2018）在《HER2蛋白质的胞外区影响乳腺癌细胞的功能》一文中研究指出HER2蛋白高表达是部分乳腺癌病人的肿瘤转移的高风险因素之一,针对该蛋白的靶向治疗卓有成效,但也有明显的副作用,因此,非常有必要进一步深入研究HER2蛋白的致病机理,以便开发更多的靶向药物。使用PCR技术将HER2基因N端的151个核苷酸进行扩增并将可能的糖基化位点进行突变,使用HA标签标记小肽。将重组了HER2基因突变体的核苷酸序列转染乳腺癌细胞SKBR3后,进行生长曲线、细胞黏附及抗药性研究及western blot分析。结果表明,HER2蛋白的N端突变体抑制乳腺癌细胞的黏附和生长,其中的糖基化位点突变后进一步降低了细胞的黏附和生长能力。通过激活抗凋亡蛋白BAK和抑制促凋亡蛋白BAD、BID和BIM的功能,HER2蛋白的N端小肽促进了乳腺癌细胞的抗药性。对开发新型的针对HER2蛋白高表达乳腺癌的靶向药物有一定的借鉴意义。(本文来源于《武汉轻工大学学报》期刊2018年04期）
吕开绩,陈旭东,程开,王路得,朱进顺[7]（2018）在《小鼠PD-1及其配体PD-L1胞外区基因的原核表达及亲和性》一文中研究指出目的:制备小鼠PD-1胞外区(mPD-1)与其配体PD-L1胞外区(mPD-L1)原核表达蛋白,并制备mPDL1兔多克隆抗体,在体外对mPD-L1和mPD-1的结合亲和性进行验证。方法:通过分子克隆方法分别构建重组质粒pET21a/mPD-L1和p GEX4T-1/mPD-1,并通过原核表达系统制备相应的重组蛋白并纯化,通过Western blot进行鉴定;将纯化的mPD-L1蛋白免疫健康日本大耳白兔制备兔多克隆血清抗体,用ELISA、Western blot分析得到的多克隆抗体的效价和特异性,并且将该多克隆抗体作为免疫荧光的阳性对照。最后应用ELISA和免疫荧光验证mPD-1与其配体mPD-L1蛋白的亲和性。结果:SDS-PAGE和Western blot结果显示原核表达的重组蛋白与预期大小一致,mPD-L1和mPD-1分别为25 kDa和40 kDa。经mPD-L1蛋白免疫后的日本大耳白兔能够产生特异性抗体,抗体效价在免疫后第6周达到高峰,Western blot检测结果显示多克隆血清可特异性识别mPD-1。ELISA结果表明,原核表达的mPD-L1蛋白能够和mPD-1蛋白结合,实验组OD450值明显高于对照组。免疫荧光结果显示,在小鼠PD-L1阳性细胞B16(小鼠黑色素瘤细胞株)的胞膜区出现绿色荧光团块。结论:利用原核细胞表达并纯化后获得mPD-L1和mPD-1蛋白,并在体外成功验证了mPD-L1和mPD-1之间的结合特性,为后期利用mPD-1和PD-L1的生物学特性研究提供了基础。(本文来源于《温州医科大学学报》期刊2018年06期）
孙守勋,刘静,解立威,柏雪婷,单娜[8]（2018）在《人TLR2胞外区基因酵母表达载体的构建及表达研究》一文中研究指出目的在真核生物酵母细胞中表达人Toll样受体2(TLR2)胞外区基因。方法以重组质粒pAdTrack-TLR2为模板,应用PCR方法扩增TLR2胞外区基因,克隆到pMD18-T载体中并测序鉴定,酶切回收后连接到酵母表达质粒pGBKT7中并转化酵母菌Y187,测定其在Y187中的自激活现象及毒性,提取酵母蛋白质,行SDS-PAGE电泳和Western blot分析。结果成功扩增出TLR2胞外区基因,测序结果与GenBank中序列一致。酶切回收的目的基因成功克隆入酵母表达载体pGBKT7中并转化酵母菌Y187后证实无重组质粒的自激活作用,Western blot分析显示该基因在酵母细胞中表达。结论成功构建了TLR2胞外区基因的酵母表达载体,并在酵母细胞Y187中正确表达,为后续研究奠定了基础。(本文来源于《现代检验医学杂志》期刊2018年03期）
马跃,王建珏,黄江涛,张天颖,史怀平[9]（2017）在《奶山羊EGFR蛋白胞外区的原核表达及其多克隆抗体的制备》一文中研究指出【目的】原核表达奶山羊表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白胞外区25-644位共620个氨基酸序列(ECD序列),纯化蛋白并免疫家兔,制备针对山羊EGFR蛋白的特异性多克隆抗体,为山羊EGFR蛋白功能研究奠定基础。【方法】以pMD19-T-EGFR为模板,采用PCR方法扩增得到EGFR胞外区(ECD)基因序列。将ECD序列连接pET-32a(+)质粒构建pET-32a(+)-ECD原核表达载体,将该重组载体导入大肠杆菌BL21(DE3)中并诱导表达。通过Ni-Charged MagBeads纯化重组蛋白后免疫2月龄白色獭兔,采用间接ELISA(iELISA)法测定抗体效价,Western blot检测抗体特异性。【结果】PCR扩增得到1 860bp的EGFR胞外区基因序列,成功构建pET-32a(+)-ECD载体。加入终浓度为0.8mmol/L的IPTG,于37℃诱导表达6h成功得到重组蛋白,该蛋白分子质量约94ku,且为以包涵体形式存在的变性蛋白。iELISA检测抗体效价为1∶16 000;Western blot检测表明,制备的多克隆抗体能特异性识别原核表达的ECD蛋白及在山羊乳腺上皮细胞和HEK293细胞中的EGFR蛋白。【结论】成功制备山羊EGFR多克隆抗体,该抗体可以用于科研试验。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2017年12期）
赵婷,席欧彦,秦瑞坪,邱玲玲,马晓玲[10]（2017）在《卵泡刺激素功能肽与受体胞外区不同片段结合作用的分析》一文中研究指出【目的】卵泡刺激素(FSH)33-53肽可以与FSH受体(FSHR)结合,并激活下游信号,被作为FSH功能肽。然而其在受体上的具体结合位置还不清楚。阐明FSH33-53肽在FSHR上的结合区域,为基于FSH的疫苗设计提供依据。【方法】采用重组的FSHR胞外区(ECD)和富含亮氨酸区(LRR)及合成的FSHR9-30区分析这些FSHR的功能区域与FSH33-53的结合作用。PCR扩增得到h FSHR ECD和h FSHR LRR目的基因,构建重组质粒p ET22b-FSHR-ECD和p ET22b-FSHR-LRR,表达纯化获得蛋白FSHR-ECD和FSHR-LRR。采用多肽合成法获得FSHR9-30-KLH。通过ELISA方法检测受体片段与FSH33-53肽的结合和亲和力。【结果】获得FSHR-ECD和FSHR-LRR蛋白,其相对分子质量(Mr)分别为43和32k Da。在受体为0.5μgm L,配体为2.5μgm L时,叁种蛋白均与FSH33-53肽结合。ELISA检测受体与配体的亲和力分别为0.21×10~(-6)、0.45×10~(-6)和0.056×10~(-6)mol/L。【结论】FSHR 9-30片段与FSH33-53肽的结合较其它两个片段结合力强。(本文来源于《新疆农业科学》期刊2017年07期）
胞外区论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:分析BR3胞外区保守结构域附近刚性区域在BR3结合BAFF过程中的作用。方法:将BR3胞外区分成包含Dx L结构域的BR3-1和其C端相邻的BR3-2,构建BR3-1-Fc和BR3-2-Fc重组质粒。将正确的BR3-1-Fc和BR3-2-Fc重组子转入大肠杆菌BL21中,诱导表达,并用蛋白A凝胶亲和层析柱纯化获得相应蛋白。ELISA检测其结合BAFF,BR3-1/2小肽对BR3-1-Fc与BAFF结合活性的影响。结果:表达纯化出纯度高达90%的BR3-1-Fc和BR3-2-Fc融合蛋白。融合蛋白可与BAFF结合,且具有剂量依赖性。BR3-2小肽在高浓度条件下对BR3-1-Fc与BAFF的结合起促进作用,300μg/ml时,促进作用达20%。结论:BR3受体胞外区保守Dx L结构域相邻的BR3-2刚性结构区域也可与BAFF结合,在BR3与BAFF的高亲和性能中起作用,为进一步设计高亲和性能BAFF拮抗肽奠定了理论基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胞外区论文参考文献
[1].郎巧利,吴梦,黄楠,何琦琳,葛良鹏.伪狂犬病毒的gE蛋白胞外区真核表达以及单克隆抗体制备[J].生物技术通报.2019
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[3].赵冰冰,刘娜,肖敏,常宏建,任晓丽.犬表皮生长因子受体2胞外Ⅳ区(her-2-ECD-4)抗原表位分析及单克隆抗体制备[J].中国兽医杂志.2018
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[9].马跃,王建珏,黄江涛,张天颖,史怀平.奶山羊EGFR蛋白胞外区的原核表达及其多克隆抗体的制备[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2017
[10].赵婷,席欧彦,秦瑞坪,邱玲玲,马晓玲.卵泡刺激素功能肽与受体胞外区不同片段结合作用的分析[J].新疆农业科学.2017
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