H9N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法的建立

H9N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法的建立

论文摘要

为H9N2亚型AIV进行快速、准确鉴定与诊断,根据H9N2亚型禽流感病毒的HA、NA基因各设计1对引物,建立了一种对2个表面基因同时进行扩增的双重RT-PCR检测方法。HA、NA基因预期扩增的目的片段长度分别为700、423 bp。通过对H9N2亚型禽流感病毒不同稀释度的尿囊液进行检测,证实病毒尿囊液的最低检出量为1×104.25EID50/100μL。采用该方法对H1~H15和N1~N9等亚型流感病毒及新城疫病毒等进行检测,结果只有H9N2亚型AIV出现2个特异性目的条带,与其他常见禽病病原无交叉反应;用建立的双重RT-PCR和病毒分离2种方法同时对送检样品进行检测,结果2种方法的符合率达99.77%,说明该检测方法特异性强、敏感性较高,在临床诊断和流行病学调查方面具有较好的应用前景。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 毒株
  •   1.2 引物的设计、合成与筛选
  •   1.3 主要试剂
  •   1.4 H9N2亚型AIV病毒含量的测定
  •   1.5 病毒RNA的提取
  •   1.6 cDNA的合成
  •   1.7 双重RT-PCR反应体系和反应条件的优化
  •   1.8 双重RT-PCR特异性试验
  •   1.9 双重RT-PCR敏感性试验
  •   1.10 双重RT-PCR的应用
  • 2 结果与分析
  •   2.1 病毒含量的测定结果
  •   2.2 H9、N2双重RT-PCR扩增结果
  •   2.3 特异性试验结果
  •   2.4 敏感性试验结果
  •   2.5 双重RT-PCR的应用
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 司振书,殷国政,路建彪,李玉保

    关键词: 禽流感病毒,亚型,双重,检测方法

    来源: 江苏农业科学 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 聊城大学农学院

    基金: 聊城大学博士启动基金(编号:318051310),聊城大学实验技术研究基金(编号:LDSY2014046)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.07.009

    页码: 35-37

    总页数: 3

    文件大小: 1073K

    下载量: 104

    相关论文文献

    • [1].青光眼相关检查在慢性闭角型青光眼中的临床应用[J]. 人人健康 2016(23)
    • [2].大米中重金属镉检测方法研究进展[J]. 农村科学实验 2017(03)
    • [3].珠宝光学检测方法[J]. 科学家 2017(17)
    • [4].疲劳驾驶检测方法研究[J]. 科学技术创新 2018(13)
    • [5].计算机组装与维护中的常见问题及解决方法[J]. 电子技术与软件工程 2019(04)
    • [6].小而密低密度脂蛋白胆固醇临床检测应用的研究进展[J]. 标记免疫分析与临床 2017(12)
    • [7].食品中总碘的检测方法研究进展[J]. 食品工业 2018(06)
    • [8].偶氮染料检验可靠性的研究[J]. 河北纺织 2009(04)
    • [9].全自动生化分析仪检测方法探讨[J]. 计量与测试技术 2019(03)
    • [10].水泥氯离子检测方法的比较[J]. 江西建材 2018(14)
    • [11].浅析产品质量检验机构中检测方法的证实与确认[J]. 中国标准化 2017(19)
    • [12].1例人类免疫缺陷病毒感染早期人类免疫缺陷病毒抗体检测的动态变化[J]. 中国医科大学学报 2018(09)
    • [13].阴离子表面活性剂的测定方法[J]. 科技传播 2013(05)
    • [14].农产品中瘦肉精残留危害及其常用检测方法简介[J]. 湖北畜牧兽医 2019(08)
    • [15].浅谈食用油质量安全与检测方法[J]. 食品安全导刊 2018(09)
    • [16].瘦肉精的危害与检测方法[J]. 现代食品 2018(13)
    • [17].实验室间比对情况分析及效果评价[J]. 河北水利 2019(03)
    • [18].围产期B族链球菌检测方法及预防研究进展[J]. 中国卫生检验杂志 2018(11)
    • [19].水质中氟化物的检测方法比较分析[J]. 资源节约与环保 2019(08)
    • [20].N-甲基苯胺的检测方法[J]. 中国标准化 2019(04)
    • [21].血小板促进肿瘤转移的机制以及肿瘤中血小板的检测方法[J]. 中国卫生检验杂志 2019(14)
    • [22].食用油掺假检测研究进展[J]. 现代食品 2017(22)
    • [23].硒检测方法研究进展[J]. 农技服务 2017(22)
    • [24].大气中持久性有机污染物检测方法浅析[J]. 资源节约与环保 2018(10)
    • [25].汽车网络及其检测方法-以科鲁兹为例[J]. 汽车实用技术 2018(23)
    • [26].食品中氨基甲酸酯类农药残留检测方法的研究进展[J]. 科技风 2019(15)
    • [27].磷光纺织品性能检测方法探究[J]. 中国纤检 2018(05)
    • [28].瘦肉精对运动员生理功能的影响及其检测方法的研究进展[J]. 食品安全质量检测学报 2019(07)
    • [29].港口大气环境主要污染物及其检测方法的探讨[J]. 中国水运(下半月) 2019(07)
    • [30].实验室如何选择和确认检测方法[J]. 现代农业 2019(05)

    标签:;  ;  ;  ;  

    H9N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法的建立
    下载Doc文档

    猜你喜欢