免疫磁珠论文_林素香,蔡栋昊,黄利思,王轲,罗晓红

导读:本文包含了免疫磁珠论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:免疫,细胞,杆菌,芽孢,沙门氏菌,登革热,大脑皮质。

免疫磁珠论文文献综述

林素香,蔡栋昊,黄利思,王轲,罗晓红[1](2019)在《一种基于微流控免疫磁珠快速检测登革热抗原的方法》一文中研究指出目的建立一种灵敏、快速、方便的检测登革热抗原新方法,为登革热的临床诊断提供帮助。方法建立了一种基于微流控免疫磁珠快速检测登革热抗原检测方法。使用Solidwork软件设计微流控芯片,采用机械加工法和化学封接方式制备微流控芯片;利用化学偶联反应制备登革热抗体免疫磁珠;在微流控芯片载体上,以HRPTMB-H_2O_2为显色体系,利用双抗体夹心法原理检测登革热NS1抗原;最后,同时应用该方法与传统ELISA试剂盒对57例临床样品进行检测,分析该方法的正确度,并对两种方法的优缺点进行比较。结果微流控免疫磁珠方法整个检测过程仅需20 min,反应体系只需磁珠量10μg和样品量10μL;验证实验中,该方法可以将阴性和阳性明显区分开,阳性样本有显色,阴性、空白样本均无显色;性能上,该新型ELISA方法与传统ELISA方法结果阴阳性符合率达到100%。结论该新型ELISA检测方法具有简便、快速、节省试剂和所需样本少、灵敏度高、稳定性好、准确性高等优点,可以用于登革热抗原检测。(本文来源于《热带医学杂志》期刊2019年11期)

平洋,谭静,王晓瑞,朱海华,王法云[2](2019)在《免疫磁珠技术分离检测熟制食品中的蜡样芽孢杆菌》一文中研究指出目的建立一种免疫磁珠技术分离富集熟制食品中的蜡样芽孢杆菌。方法在一定量的蜡样芽孢杆菌体系中优化免疫磁珠与抗体用量以及最佳反应时间。在最佳实验条件下,对免疫磁珠分离蜡样芽孢杆菌的敏感性和特异性进行实验,幵对实际熟制食品的蜡样芽孢杆菌进行分离。结果最终确定了蜡样芽孢杆菌抗体添加量50μg/mL、免疫磁珠添加量100μL,免疫磁珠与菌液最佳作用时间为15 min,当菌液稀释度达到10-7,免疫磁珠法仍然可以检出,相应的细菌数为4 CFU/mL。结论本实验制备的免疫磁珠技术灵敏性高,特异性好,节省了检测时间和费用,适用于食品中的蜡样芽孢杆菌的检测。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年20期)

林吉恒,黄朱梁,彭志兰,孙瑛[3](2019)在《免疫磁珠分离技术在食源性致病菌检测中的应用》一文中研究指出免疫磁珠(immunomagnetic beads,IMB)是一种均匀、具有超顺磁性及保护性壳的球形小粒子,由载体微球和免疫配基结合而成。免疫磁珠分离技术(immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)则是利用免疫磁珠上包被的特异性抗体与抗原发生亲和反应,从复杂的样品中分离到目标抗原。再利用磁珠的磁响应性,实现对目标抗原的富集。在食源性致病菌检测方面,该技术通过与其他检测手段相结合而得到广泛应用,具有灵敏度高、检测时间短、操作简单等优势。本文综述了免疫磁珠的结构特点、免疫磁珠分离技术的原理,着重阐述了该技术在食源性致病菌检测方面的应用进展,以期为免疫磁珠分离技术的广泛应用提供参考。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年18期)

顿国栋,童亚楠,卢晓雪,冯宇阳,叶新力[4](2019)在《粪便具核梭杆菌的免疫磁珠捕获联合实时荧光定量PCR检测方法的建立及评价》一文中研究指出目的建立定量检测粪便中具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,F. nucleatum)的免疫磁珠捕获联合实时荧光定量PCR(IMBs-qPCR)技术方法。方法 5×10~8CFU F. nucleatum(0.4%甲醛灭活)免疫新西兰兔制备多克隆抗体,饱和硫酸铵沉淀法和Hi Trap Protein G HP亲和层析法纯化抗体;优化MS 300免疫磁珠偶联多克隆抗体和捕获F. nucleatum的反应条件。根据F. nucleatum特异性基因NusG设计引物和构建含目的基因的载体质粒,建立qPCR反应体系并绘制qPCR标准曲线。最后,在不同浓度(50 CFU/200 mg~10~5CFU/200 mg)F. nucleatum的人粪便标本中,评价该方法的检测效能。结果成功制备F. nucleatum多克隆抗体,抗体ELISA效价>320 000,盐析和亲和层析纯化抗体纯度分别为60%和85%;多克隆抗体偶联免疫磁珠时偶联缓冲液最佳pH值为5.0,最佳温度为25℃,最佳偶联时间为2.5 h,加入抗体最适量为10μg/mg,免疫磁珠最佳捕获温度为37℃,时间为40 min;成功建立qPCR反应体系;IMBs-qPCR和粪便全基因组DNA提取法直接检测模拟粪便标本最低检测限分别为100 CFU/200 mg和400 CFU/200 mg,ROC曲线中AUC分别为0.948和0.878。结论成功建立了IMBs-qPCR检测粪便中F.nucleatum的方法,该方法具有简便快速、灵敏度高、特异性好等特点。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2019年09期)

吕观,常彦磊,石磊[5](2019)在《免疫磁珠-环介导等温扩增快速检测牛肉中的鼠伤寒沙门氏菌与金黄色葡萄球菌》一文中研究指出建立免疫磁珠分离(immunomagnetic separation,IMS)联合环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测牛肉中鼠伤寒沙门氏菌与金黄色葡萄球菌的方法。用生物素标记的鼠伤寒沙门氏菌抗体和生物素标记的金黄色葡萄球菌菌体蛋白抗体对链霉亲和素磁珠进行功能化,从牛肉中捕获和分离目标致病菌。结果表明:经优化后,每毫克磁珠与10 μL鼠伤寒沙门氏菌抗体偶联,400 μL鼠伤寒沙门氏菌免疫磁珠在45 min内对10~4 CFU/mL鼠伤寒沙门氏菌的捕获率为52.16%;每毫克磁珠与6 μL金黄色葡萄球菌抗体偶联,300 μL金黄色葡萄球菌免疫磁珠在30 min内对10~4 CFU/mL金黄色葡萄球菌的捕获率为56.80%;建立的IMS-LAMP方法特异性高,对牛肉中鼠伤寒沙门氏菌的检测灵敏度为1.2×10~3 CFU/mL,对金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为4.4×10~4 CFU/mL;富集5 h后,鼠伤寒沙门氏菌的检测限可至1.2 CFU/mL,富集7 h后,金黄色葡萄球菌的检测限可降至4.4 CFU/mL。建立的IMS-LAMP方法用时短,灵敏度高,操作简单,可以有效检测牛肉中的鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌。(本文来源于《肉类研究》期刊2019年07期)

钟明星,何程明,黄继薇,孟美丽,袁冬妹[6](2019)在《CD138免疫磁珠细胞分选的FISH技术在多发性骨髓瘤诊断中的应用》一文中研究指出为了分析CD138免疫磁珠细胞分选的染色体荧光原位杂交(FISH)技术在提高多发性骨髓瘤(MM)细胞遗传学异常检测敏感性的作用。本研究选取我院收治的30例确诊MM的患者为研究对象,分离骨髓单个核细胞,应用探针组合,同时采用2种方法进行细胞遗传学检测:实验组采用CD138免疫磁珠分选浆细胞后行荧光原位杂交技术(MACS-FISH)检测;对照组直接荧光原位杂交技术(D-FISH)检测。结果:30例MM患者,实验组采用CD138 MACS-FISH检出率为83.3%,对照组D-FISH法细胞遗传异常检出率为46.7%,两组差异具有统计学意义(p<0.05)。研究结果表明:分析不同类型的细胞遗传异常,MACS-FISH法1q21检出率为46.7%,RB1检出率为50.0%,Ig H检出率为70.0%,P53检出率为20.0%;D-FISH法检出率分别为23.3%,30.0%、36.7%、10.0%。通过细胞核型分析,30例MM患者中,发现5例患者为异常核型,仅为16.7%,其中1例患者为单一结构异常,复杂异常核型患者为4例。我们的研究结论表明:进行CD138免疫磁珠分选浆细胞的FISH技术在多发性骨髓瘤诊断应用中可显着提高细胞遗传学异常检测敏感性,具有临床推广应用的价值。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年07期)

曲晓莹,吴清平,熊争,蔡芷荷,卢勉飞[7](2019)在《检测大肠杆菌(Escherichia coli)O157:H7免疫磁珠的制备、保存与应用》一文中研究指出【背景】大肠杆菌(Escherichia coli) O157:H7是导致肠出血性大肠杆菌食源性疾病暴发的主要血清型,免疫磁珠(Immunomagnetic beads,IMBS)在E. coli O157的检测中发挥着重要作用,而免疫磁珠的稳定性、特异性、广谱性等性能指标关系着在实际应用中的使用效果。【目的】制备高效、稳定且具有广谱性的免疫磁珠,联合分子检测技术如环介导恒温扩增(Loop-mediatedisothermal amplification,LAMP)技术、PCR等,提高目标菌的检出率。【方法】采用新型的磁珠活化剂MIX&GO制备E. coli O157免疫磁珠,并进行广谱性以及特异性检测;针对6种试剂牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)、酪蛋白(Casein)、海藻糖(Trehalose)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl pyrrolidone,PVP)、抗坏血酸(VitaminC)和防腐剂ProClin300,利用正交试验L18(3~7)优化免疫磁珠保存液组分;采用IMBS-LAMP、IMBS-PCR、IMBS-生化、菌液-LAMP、菌液-PCR、显色平板-生化鉴定6种方式对20份生猪肉样品进行检测。【结果】利用MIX&GO活化剂制备的免疫磁珠捕获率最高达到81.5%±1.3%;免疫磁珠保存液最优配方为:牛血清白蛋白15.0 g/L,酪蛋白10.0 g/L,海藻糖10.0 g/L,PVP 2.0 g/L,抗坏血酸5.0 g/L,Pro Clin 300 2.5 g/L,保存6个月后免疫磁珠捕获率为75.5%;在20份生猪肉样品的检测中,自制磁珠和商品化磁珠与LAMP联用均检出9例阳性样品;IMBS-LAMP在6种检测方式中具有最高的检测灵敏度,但检出的样品会因磁珠抗体的差异而有所不同。【结论】与商品化磁珠相比,实验制备的免疫磁珠具有良好的特异性和广谱性,免疫磁珠-LAMP联用提高了目标菌的检出率,是一种高灵敏度、具有应用前景的检测方法。(本文来源于《微生物学通报》期刊2019年10期)

徐士伟[8](2019)在《免疫磁珠分选联合荧光染色法检测结直肠癌循环肿瘤细胞的临床应用》一文中研究指出目的:分析循环肿瘤细胞计数与肿瘤TNM分期等临床资料的关系,探索循环肿瘤细胞检测作为结直肠癌患者辅助检查手段的临床应用价值。方法:(1)收集初诊结直肠癌患者56例的外周血5ml,并收集患者的年龄、性别、术后病理、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原199(Carbohydrate antigen 19-9,CA199)、糖类抗原242(Carbohydrate antigen,CA242)、白细胞分化抗原4(Cluster of differentiation 4,CD4)、白细胞分化抗原8(Cluster of differentiation 8,CD8)等临床资料。另取健康志愿者、结直肠良性肿瘤患者共25例作为对照组,以上样本均以免疫磁珠分选联合荧光染色法检测循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)。(2)将CTCs计数与结直肠癌患者的各临床特征进行比较,分析各组间的差异。(3)绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),分析CTCs检测与联合检测效能,评价其临床应用价值。结果:(1)不同TNM分期、肿瘤直径、CEA水平、CA242水平的患者,循环肿瘤细胞表达水平存在差异,差异具有统计学意义(P=0.000,P=0.022,P=0.011,P=0.014)。(2)不同的肿瘤分化程度、CD8表达水平的患者,CEA表达水平存在差异,差异具有统计学意义(P=0.014,P=0.016)。不同的肿瘤直径、CD8表达水平的患者,CA199表达水平存在差异,差异具有统计学意义(P=0.017,P=0.009)。(3)CTCs、CEA、CA199、CA242的ROC曲线下面积分别为0.861、0.841、0.584、0.760,logistic回归后叁联和四联的ROC曲线下面积分别为0.884、0.946(P<0.05)。结论:初诊的结直肠癌患者的循环肿瘤细胞在晚TNM分期、长肿瘤直径、高CEA、高CA242患者中的表达水平高于早TNM分期、短肿瘤直径、低CEA、低CA242的患者,循环肿瘤细胞检测可与传统肿瘤标志物联合应用并作为当前结直肠癌辅助检查体系的补充,具有临床应用价值。(本文来源于《蚌埠医学院》期刊2019-05-01)

廖显翔,房芳,羊良慧,陈国生,王代友[9](2019)在《免疫磁珠分选的口腔鳞状细胞癌干细胞诱导分化及成瘤活性研究》一文中研究指出目的探讨口腔鳞状细胞癌干细胞的诱导分化及成瘤活性。方法采用免疫磁珠分选法从6例原代培养的口腔鳞状细胞癌细胞中分选出CD133~+、CD44~+细胞,以流式细胞术检测其纯度及细胞周期,并绘制CD133~+细胞生长曲线。将分选出的细胞经诱导向成骨肪细胞及成脂肪细胞分化,将原代鳞癌细胞、分选所得的CD44~+细胞及CD133~+细胞进行体内成瘤实验。结果经免疫磁珠分选法成功获得CD44~+细胞、CD133~+细胞,其纯度经检测均在94%以上,且主要处于G0/G1期。CD133~+细胞在接种后第2天进入对数期,细胞倍增时间为3.22 d。经诱导后CD44~+、CD133~+细胞成功分化为成骨细胞及成脂肪细胞。皮下注射后第3天可触及新生肿物,在3种细胞成瘤实验中CD133~+细胞组瘤体体积最大,HE染色显示符合低分化口腔鳞状细胞癌病理表现。结论免疫磁珠分选法可高效获得高纯度的口腔鳞状细胞癌干细胞。CD44~+、CD133~+细胞均具有较强的多向分化能力,CD133~+细胞成瘤性较强。(本文来源于《中国癌症防治杂志》期刊2019年02期)

李玉蕾,颜慧,苏瑞斌[10](2019)在《免疫磁珠法结合条件培养基进行低密度条件下的神经元原代培养》一文中研究指出目的利用免疫磁珠(IMB)细胞分选技术结合星形胶质细胞条件培养基(A-CM)进行低密度条件下原代神经元培养。方法取新生(24 h)内昆明小鼠取大脑半球,通过机械分离与胰酶消化制备细胞悬液进行原代培养。培养10 d后,利用恒温振荡法去除小胶质细胞等杂细胞,抗胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞纯度。利用达到纯度要求的细胞培养物制备A-CM。分别取新生(24 h)内昆明小鼠大脑皮质和海马,通过机械分离与胰酶消化制备细胞悬液,经IMB细胞分选获得高纯度神经元,加入A-CM进行低密度条件下神经元的原代培养。观察培养过程中神经元的形态学指标,以抗160 ku神经丝抗体免疫荧光染色鉴定神经元纯度。结果细胞免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞的纯度>95%。小鼠皮质和海马神经元形态学观察与细胞免疫荧光染色结果表明,神经元在低密度培养条件下生长良好,不同发育阶段的形态学特征明显,纯度较高。结论低密度条件下成功培养了小鼠大脑皮质和海马原代神经元。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2019年04期)

免疫磁珠论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的建立一种免疫磁珠技术分离富集熟制食品中的蜡样芽孢杆菌。方法在一定量的蜡样芽孢杆菌体系中优化免疫磁珠与抗体用量以及最佳反应时间。在最佳实验条件下,对免疫磁珠分离蜡样芽孢杆菌的敏感性和特异性进行实验,幵对实际熟制食品的蜡样芽孢杆菌进行分离。结果最终确定了蜡样芽孢杆菌抗体添加量50μg/mL、免疫磁珠添加量100μL,免疫磁珠与菌液最佳作用时间为15 min,当菌液稀释度达到10-7,免疫磁珠法仍然可以检出,相应的细菌数为4 CFU/mL。结论本实验制备的免疫磁珠技术灵敏性高,特异性好,节省了检测时间和费用,适用于食品中的蜡样芽孢杆菌的检测。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

免疫磁珠论文参考文献

[1].林素香,蔡栋昊,黄利思,王轲,罗晓红.一种基于微流控免疫磁珠快速检测登革热抗原的方法[J].热带医学杂志.2019

[2].平洋,谭静,王晓瑞,朱海华,王法云.免疫磁珠技术分离检测熟制食品中的蜡样芽孢杆菌[J].食品安全质量检测学报.2019

[3].林吉恒,黄朱梁,彭志兰,孙瑛.免疫磁珠分离技术在食源性致病菌检测中的应用[J].食品安全质量检测学报.2019

[4].顿国栋,童亚楠,卢晓雪,冯宇阳,叶新力.粪便具核梭杆菌的免疫磁珠捕获联合实时荧光定量PCR检测方法的建立及评价[J].免疫学杂志.2019

[5].吕观,常彦磊,石磊.免疫磁珠-环介导等温扩增快速检测牛肉中的鼠伤寒沙门氏菌与金黄色葡萄球菌[J].肉类研究.2019

[6].钟明星,何程明,黄继薇,孟美丽,袁冬妹.CD138免疫磁珠细胞分选的FISH技术在多发性骨髓瘤诊断中的应用[J].基因组学与应用生物学.2019

[7].曲晓莹,吴清平,熊争,蔡芷荷,卢勉飞.检测大肠杆菌(Escherichiacoli)O157:H7免疫磁珠的制备、保存与应用[J].微生物学通报.2019

[8].徐士伟.免疫磁珠分选联合荧光染色法检测结直肠癌循环肿瘤细胞的临床应用[D].蚌埠医学院.2019

[9].廖显翔,房芳,羊良慧,陈国生,王代友.免疫磁珠分选的口腔鳞状细胞癌干细胞诱导分化及成瘤活性研究[J].中国癌症防治杂志.2019

[10].李玉蕾,颜慧,苏瑞斌.免疫磁珠法结合条件培养基进行低密度条件下的神经元原代培养[J].中国药理学与毒理学杂志.2019

论文知识图

流式细胞仪检测结果(采用双标法,上排...不同Tween 20加入量对免疫磁珠...不同孵育时间免疫磁珠分离效率...抗荧光素单克隆抗体免疫磁珠的荧...免疫磁珠阴性法富集后免疫荧光染...免疫磁珠筛选系统和荧光倒置相差...

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