融合表达包涵体论文_张成龙,康巧珍,汲振余,郭勋,杜娟

导读:本文包含了融合表达包涵体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:复性,抗原,毒素,蛋白,弧菌,耐热性,大肠杆菌。

融合表达包涵体论文文献综述

张成龙,康巧珍,汲振余,郭勋,杜娟[1](2018)在《VISTA-Ig融合蛋白的表达及其包涵体复性研究》一文中研究指出[目的]构建VISTA-Ig融合蛋白表达载体,进行诱导表达获得VISTA-Ig融合蛋白。[方法]以C57BL/6小鼠脾脏细胞c DNA为模板,扩增小鼠VISTA胞外段基因,利用重迭延伸PCR的方法合成VISTA-Ig融合基因,构建重组质粒p ET-22b-VISTA-Ig,在大肠杆菌表达菌株E.coli BL21(DE3)中诱导表达。[结果]VISTA-Ig融合蛋白主要以包涵体的形式存在。变性后,利用镍柱纯化,通过采用氧化型/还原型谷胱甘肽(GSH/GSSG)复性体系,复性效率达到80%以上,提高了复性效率。利用r Protein A柱对目标蛋白进一步纯化,Western Blot鉴定结果显示,能与Ig G Fc(HRP)抗体特异性结合。[结论]成功构建了重组质粒p ET-22b-VISTA-Ig,纯化的VISTA-Ig包涵体蛋白复性效率得到明显提高,为后续VISTA-Ig免疫学功能的研究奠定了基础。(本文来源于《生物技术》期刊2018年01期)

赵鹏,夏爽,关乃瑜,谷珊珊,姜艳平[2](2015)在《产肠毒素大肠杆菌FaeG-mSTa-LTb-STb融合表达及其包涵体口服免疫小鼠诱导的免疫应答》一文中研究指出为研究产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4菌毛主要结构蛋白Fae G、STa、LTb和STb毒素融合蛋白的免疫原性,本研究采用重迭延伸PCR(SOE-PCR)扩增编码Fae G-m STa(STa突变体)-LTb-STb 4种蛋白融合基因,将其克隆于p Pro EXHTa表达载体中进行原核表达。并以表达的包涵体口服免疫BALB/c小鼠,通过检测免疫鼠的体液和细胞免疫反应,评价其免疫效果。实验结果显示,融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式高效表达,并可以被特异性抗体所识别,具有良好的反应原性。免疫小鼠后均能够产生特异性Ig G和s Ig A,并诱导产生细胞免疫应答。免疫记忆反应试验证明,免疫鼠至少在3个月内保持对特异性抗原的免疫记忆应答。本研究结果表明,Fae G-m STa-LTb-STb融合蛋白具有良好的免疫原性,口服包涵体免疫是一种可行的免疫途径,提示所制备的融合蛋白作为口服疫苗抗原具有潜在的应用价值。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2015年10期)

刘葳,马德章,于航,李冰,于源华[3](2008)在《HBV/HEV融合抗原大肠杆菌表达包涵体的变复性和纯化》一文中研究指出利用乙型肝炎病毒adr型的S抗原基因和戊型肝炎病毒China-D型的ORF2编码区的羧基末端中的部分序列构建融合抗原表达载体,在大肠杆菌中表达时,出现了大量包涵体,我们对包涵体进行洗涤,变性,复性,金属亲和层析柱和凝胶过滤纯化后,蛋白的相对含量达98%。采用Western blot对目的蛋白活性进行检测,具有乙肝和戊型肝抗原活性。为提高资源利用效率,降低成本,提高产量,以及进一步研发疫苗用抗原提供了实验基础。(本文来源于《长春理工大学学报(自然科学版)》期刊2008年04期)

张德安,王宗仁,邵中军,高碧峰,李晶华[4](2007)在《抗癫痫肽/GST融合表达及包涵体蛋白复性纯化》一文中研究指出[目的]获得高纯度的谷胱甘肽硫转移酶/抗癫痫肽(GST-AEP)融合蛋白。[方法]异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组大肠杆菌DH5α表达GST-AEP融合蛋白,融合蛋白包涵体经过洗涤、变性、复性后,通过12%SDS-PAGE凝胶电泳,考马斯亮蓝染色,凝胶薄层扫描检测其纯度,透析管进一步纯化蛋白,BCA法定量。[结果]从融合蛋白包涵体中获得了纯度达90%以上的目的蛋白,定量约0.163μg/μl。[结论]建立了有效纯化融合蛋白包涵体GST-AEP的方法,为对AEP进一步的相关研究奠定了基础。(本文来源于《浙江中医药大学学报》期刊2007年01期)

李志峰,聂军,戴迎春,陈清,俞守义[5](2004)在《融合表达的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素包涵体复性的研究》一文中研究指出目的构建融合表达载体,获得具有生物活性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。方法克隆tlh基因,构建表达载体pET32a+/tlh,融合表达副溶血弧菌不耐热性溶血毒素,用8 mol/L的尿素溶解包涵体,亲和层析纯化目的蛋白,采取逐步透析、降低蛋白浓度、加入氧化还原剂等复性方法。结果复性蛋白具有溶血活性及免疫原性。结论通过克隆tlh基因,构建融合表达载体pET32a+-tlh,采取纯化、复性方法,获得具有融血活性及免疫原性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。(本文来源于《第一军医大学学报》期刊2004年09期)

融合表达包涵体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为研究产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4菌毛主要结构蛋白Fae G、STa、LTb和STb毒素融合蛋白的免疫原性,本研究采用重迭延伸PCR(SOE-PCR)扩增编码Fae G-m STa(STa突变体)-LTb-STb 4种蛋白融合基因,将其克隆于p Pro EXHTa表达载体中进行原核表达。并以表达的包涵体口服免疫BALB/c小鼠,通过检测免疫鼠的体液和细胞免疫反应,评价其免疫效果。实验结果显示,融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式高效表达,并可以被特异性抗体所识别,具有良好的反应原性。免疫小鼠后均能够产生特异性Ig G和s Ig A,并诱导产生细胞免疫应答。免疫记忆反应试验证明,免疫鼠至少在3个月内保持对特异性抗原的免疫记忆应答。本研究结果表明,Fae G-m STa-LTb-STb融合蛋白具有良好的免疫原性,口服包涵体免疫是一种可行的免疫途径,提示所制备的融合蛋白作为口服疫苗抗原具有潜在的应用价值。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

融合表达包涵体论文参考文献

[1].张成龙,康巧珍,汲振余,郭勋,杜娟.VISTA-Ig融合蛋白的表达及其包涵体复性研究[J].生物技术.2018

[2].赵鹏,夏爽,关乃瑜,谷珊珊,姜艳平.产肠毒素大肠杆菌FaeG-mSTa-LTb-STb融合表达及其包涵体口服免疫小鼠诱导的免疫应答[J].中国预防兽医学报.2015

[3].刘葳,马德章,于航,李冰,于源华.HBV/HEV融合抗原大肠杆菌表达包涵体的变复性和纯化[J].长春理工大学学报(自然科学版).2008

[4].张德安,王宗仁,邵中军,高碧峰,李晶华.抗癫痫肽/GST融合表达及包涵体蛋白复性纯化[J].浙江中医药大学学报.2007

[5].李志峰,聂军,戴迎春,陈清,俞守义.融合表达的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素包涵体复性的研究[J].第一军医大学学报.2004

论文知识图

α表达菌株的发酵表达1-9:接种发酵...号融合蛋白包涵体诱导表达结果重组质粒构建流程图模拟表位蛋白的纯化融合蛋白的表达纯化及酶促...GST蛋白的Westem-blotting结果

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