重寄生链霉菌论文-刘冰

重寄生链霉菌论文-刘冰

导读:本文包含了重寄生链霉菌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:重寄生链霉菌F46,放线菌SC11,原生质体融合,融合子筛选

重寄生链霉菌论文文献综述

刘冰[1](2006)在《重寄生链霉菌F46与放线菌SC11原生质体融合研究》一文中研究指出为了提高野生生防放线菌株的防病效果,克服以往生防菌应用方面存在的诸多弊端,探索简单易行的人工改良生防放线菌的途径,我们选用重寄生链霉菌F46和放线菌SC11作为亲本,进行了双亲原生质体融合研究,以期得到整合双亲多种优良性状的工程菌株。通过测量菌丝干重、显微观察计数和计算再生率的方法对双亲原生质体制备及再生条件进行了优化。研究结果表明,菌株F46和SC11分别在蔗糖浓度为20%和10%以及Gly浓度为1.5%和1.0%的培养液中培养96~100h,能够形成分散度好的菌丝体,酶解时会有大量再生率较高的原生质体形成;在35℃水浴条件下,菌株SC11选用浓度为5mg·mL-1的溶菌酶酶解90min,菌株F46选择10mg·mL-1溶菌酶与10mg·mL-1蜗牛酶混合,酶解时间以120min为佳。本研究以处理不同时间后原生质体的再生情况确定了双亲株原生质体的灭活条件。结果表明,在60℃条件下,菌株F46和SC11的原生质体热灭活时间分别以60min和15min适宜;如果在20W紫外灯下15cm处照射处理,菌株F46和SC11原生质体的灭活时间分别为15min和7min。在优化了双亲原生质体形成、再生以及灭活条件的基础上,经过敏感菌丝体培养,原生质体制备,融合及再生的重复试验,依据再生培养基上出现菌落的形态和颜色分离获得9株再生菌株。通过比较融合子与亲本的抑菌活性,筛选出抑菌效果优于亲本的融合菌株F-S5、F-S15、F-S16和F-S17。对于初筛获得的融合菌株,进一步通过抑菌机理研究、遗传稳定性检测、形态特征观察、培养性状多重比较、生理生化特性观察以及生长速率比较发现,融合菌株与双亲既有差别,又有相同之处,表明双亲原生质体融合后形成的融合菌株既保留了亲本的某些特性,又产生了一些新性状。利用细菌通用引物对融合菌株及其亲本16S rDNA进行扩增,均获得大小约1.5 kb的片段,用限制性内切酶对扩增产物进行酶切,酶切图谱中既具备与双亲相同的一些条带,也有完全不同于双亲的新条带,这可能与融合菌株产生的一些新性状相对应。总之,本研究得到了4株抑制病原真菌能力优于亲本的融合菌株,摸索出了一套简单易行的放线菌原生质体融合方法。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2006-06-01)

王记侠[2](2006)在《利用原生质体融合技术改良重寄生链霉菌F46和链霉菌SC1》一文中研究指出本试验利用原生质体融合技术将重寄生链霉菌F46和链霉菌SC1融合,以期得到整合双亲优良特性于一体的生防菌。本论文主要包括以下4部分:1.采用传统鉴定方法和现代分子分类方法对亲本菌株F46和SC1进行了鉴定。菌株F46与灰色链霉菌(Streptomyces griseus)同源性较高,为98%,二者培养特征和生理生化特性虽有差异,但更具有许多相似之处,因此将其归入灰色链霉菌(Streptomyces griseus)。菌株SC1与灰色轮丝链霉菌(Streptomyces griseoverticillatus)同源性为99%,虽然二者在培养特征和生理生化特性方面存在着某些差异,我们认为该菌株应当归入灰色轮丝链霉菌(Streptomyces griseoverticillatus)。2.确定了双亲原生质体形成与再生的最佳条件:菌株F46、SC1采用二次菌丝培养,即在蔗糖含量20%菌丝培养液里,25℃条件下150 rpm培养48 h;然后按15%的接种量转接到蔗糖含量30%,甘氨酸含量分别为1%、1.5%的菌丝培养液中,同样条件下,继续培养48 h;在34℃条件下,菌株F46用等量混合的蜗牛酶和溶菌酶20 mg·mL-1,菌株SC1用10 mg·mL-1溶菌酶,分别酶解3 h、2.5 h,不仅有大量的原生质体形成,且再生率也高。研究发现原生质体不宜在4℃条件下长期保存。菌株F46和SC1的原生质体最适宜的紫外灭活时间分别为600 s、360 s;在60℃条件下,二者最适宜热灭活时间分别为45 min、90 min。按不同的组合方式,将双亲的原生质体等量混合,经40%PEG助融10 min,培养再生,获得40株融合子。3.经皿内拮抗试验初筛,发酵液活性测定复筛,获得3株在不同方面优于亲本的融合子:FSf-11、FSf-13和FSf-30。其中融合子FSf-11和FSf-13是由菌株F46的原生质体热灭活与菌株SC1原生质体未灭活融合而来;融合子FSf-30通过双亲灭活原生质体(F46热灭活与SC1紫外灭活)融合后获得。皿内拮抗试验表明:融合子FSf-11、FSf-13对灰葡萄孢的抑制效果显着,其抑制机理主要引起灰葡萄孢的基内菌丝严重畸变、缢缩或原生质凝聚等;FSf-30对粉红聚端孢的抑制作用比亲本SC1也有所增强,除引起粉红聚端孢的基内菌丝严重畸变外,还有菌丝细胞壁消解现象。4. 3株融合子在形态特征、培养特征和生理生化特性上均与双亲存在明显差异,融合子的抗药性、生长速度和产孢量等方面也明显不同于双亲。在以亲本菌株F46和SC1为对照的情况下,利用16S rDNA PCR-RFLP鉴定融合子,检测出融合子FSf-30不仅具有双亲的DNA条带,还增加1~3条新的谱带;融合子FSf-11、FSf-13除双亲共有的DNA条带外,未检测到亲本F46所特有的一条谱带。在灭活原生质体的基础上,将融合子鉴定的传统方法与现代分子方法相结合,综合考虑分析,推断出融合子FSf-11、(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2006-06-01)

刘冰,宗兆锋,王记侠[3](2006)在《重寄生链霉菌F46与生防放线菌SC11融合菌株的筛选》一文中研究指出利用重寄生链霉菌F46和生防放线菌SC11进行原生质体融合,通过菌落形态特征及颜色的差异分离获得8株融合菌株。皿内实验结果表明,包括F-S5,F-S8,F-S12,F-S15和F-S16在内的5个菌株保留了亲本 SC11较强的抑菌作用,其中F-S8只对粉红聚端孢(Trichothecium roseum)有较强的抑菌活性,抑菌率>60%;F- S12对粉红聚端孢(T.roseum)和大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)有抑菌作用,抑菌率接近60%;而其他3个菌株对5种靶标病原真菌皆有强的抑菌活性,抑菌率可达70%左右。在受抑菌丝再生能力测定中发现,菌株F-S15对粉红聚端孢(T.roseum)有永久抑菌作用;菌株F-S5对胶胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)以及菌株F-S15对大丽轮枝菌(V.dahliae)的永久抑菌作用比较显着。显微观察发现,受融合菌株抑制的菌丝均有不同程度的畸变。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2006年03期)

王记侠,宗兆锋,刘冰[4](2005)在《重寄生链霉菌F46与链霉菌SC1融合子的筛选》一文中研究指出运用原生质体融合技术将重寄生链霉菌F46与生防链霉菌SC1融合,获得40株融合子。依据形态特征、皿内拈抗试验对获得的融合子进行初筛,发酵液抑菌活性测定,筛选出2株抑制效果明显的融合子FSf-11 和FSf-13。皿内拮抗试验结果表明,2个融合子对灰葡萄孢(B.cinerea)有明显的抑制作用,抑制率比亲本SC1 分别提高了27.99%和20.56%,镜检发现灰葡萄孢的基内菌丝畸形,经FSf-13处理后还出现原生质凝聚现象。融合于的发酵滤液对胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)抑制效果显着,抑菌圈直径超过了20 mm;融合子 FSf-11的发酵滤液对尖镰孢萎蔫专化型(F.oxysporum f.sp.vasinfectum)和大丽轮枝菌(V.dahliae)的孢子萌发抑制作用最强,其孢子萌发率低于10%;融合子FSf-13对2种靶标菌的孢子萌发抑制率也超过了50%。(本文来源于《西北农业学报》期刊2005年06期)

杨洪俊[5](2005)在《紫外线诱变改良重寄生链霉菌PR和F46》一文中研究指出本研究以重寄生链霉菌PR 和F46 为出发菌株,以靶标病原菌为指示菌,以紫外线为诱变因子,对它们进行了诱变改良研究。利用紫外线诱导重寄生链霉菌PR 和F46,并确定了PR 和F46 的最适诱变剂量分别为7min 和3min。经过筛选获得了抗真菌活性稳定高于出发菌株PR 和F46 的诱变菌株PR-7-2 和F46-3-7。对诱变菌株PR-7-2 和F46-3-7 的生物学特性进行了研究,结果表明,诱变菌株基内菌丝的颜色与出发菌株的完全不同;在相同时间内,诱变菌株的产孢量几乎是出发菌株的2.2 倍,但菌丝生长量却低于出发菌株;诱变菌株的抗菌谱与出发菌株相同,都是对低等真菌的效果最好,对半知菌亚门的效果次之,对子囊菌的效果最差;诱变菌株对靶标真菌重寄生的能力稳定高于出发菌株,诱变菌株发酵液对靶标真菌孢子的抑制能力也稳定优于出发菌株;而且,诱变菌株的这些生物学特性都能稳定遗传,不会因继代培养而丧失。诱变菌株PR-7-2 和F46-3-7 对常用化学杀菌剂的抗性研究结果表明,在供试的8 种试剂中,2 种诱变菌株对不同类型的杀菌剂具有不同的作用效果。PR-7-2 对3 种低剂量浓度的甲霜灵、五氯硝基苯、腐霉利、叁唑酮等杀菌剂表现出高抗性,所以,它们可以混和使用防治植物病害。F46-3-7 对3 种低剂量浓度的甲基托布津、多菌灵、五氯硝基苯、腐霉利、叁唑酮等杀菌剂表现出高抗性,它们可以混合使用防治植物病害。在对诱变菌株PR-7-2 和F46-3-7 的生态学习性的研究中发现,诱变菌株PR-7-2 在土壤、土壤+几丁质、土壤+毛霉菌丝体3 种基质中存活量很少;F46-3-7 在土壤、土壤+几丁质2 种基质中也活量存很少,而F46-3-7 在土壤+毛霉菌丝体中不但能长期存活,且存活数量还会有所增加。诱变菌株可以被黄瓜的根部吸收并向植株的其它部位扩散,可以到达黄瓜幼苗的各个部位;有向黄瓜幼苗顶部集聚的趋势,且诱变菌株的集聚趋势更明显。说明诱变菌株具有良好的定殖能力,而且定殖于幼苗的诱变菌株的数量有所增加并能长期维持较高的水平,诱变菌株PR-7-2 和F46-3-7 对苹果采后两种常见病害的防治效果明显,在25℃和15℃,诱变菌株对靶标致病菌的作用效果都要优于出发菌株。在25℃下,无论是诱变菌株还是出发菌株,它们对不同靶标病原菌的抑制效果都超过了50%。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2005-06-01)

重寄生链霉菌论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本试验利用原生质体融合技术将重寄生链霉菌F46和链霉菌SC1融合,以期得到整合双亲优良特性于一体的生防菌。本论文主要包括以下4部分:1.采用传统鉴定方法和现代分子分类方法对亲本菌株F46和SC1进行了鉴定。菌株F46与灰色链霉菌(Streptomyces griseus)同源性较高,为98%,二者培养特征和生理生化特性虽有差异,但更具有许多相似之处,因此将其归入灰色链霉菌(Streptomyces griseus)。菌株SC1与灰色轮丝链霉菌(Streptomyces griseoverticillatus)同源性为99%,虽然二者在培养特征和生理生化特性方面存在着某些差异,我们认为该菌株应当归入灰色轮丝链霉菌(Streptomyces griseoverticillatus)。2.确定了双亲原生质体形成与再生的最佳条件:菌株F46、SC1采用二次菌丝培养,即在蔗糖含量20%菌丝培养液里,25℃条件下150 rpm培养48 h;然后按15%的接种量转接到蔗糖含量30%,甘氨酸含量分别为1%、1.5%的菌丝培养液中,同样条件下,继续培养48 h;在34℃条件下,菌株F46用等量混合的蜗牛酶和溶菌酶20 mg·mL-1,菌株SC1用10 mg·mL-1溶菌酶,分别酶解3 h、2.5 h,不仅有大量的原生质体形成,且再生率也高。研究发现原生质体不宜在4℃条件下长期保存。菌株F46和SC1的原生质体最适宜的紫外灭活时间分别为600 s、360 s;在60℃条件下,二者最适宜热灭活时间分别为45 min、90 min。按不同的组合方式,将双亲的原生质体等量混合,经40%PEG助融10 min,培养再生,获得40株融合子。3.经皿内拮抗试验初筛,发酵液活性测定复筛,获得3株在不同方面优于亲本的融合子:FSf-11、FSf-13和FSf-30。其中融合子FSf-11和FSf-13是由菌株F46的原生质体热灭活与菌株SC1原生质体未灭活融合而来;融合子FSf-30通过双亲灭活原生质体(F46热灭活与SC1紫外灭活)融合后获得。皿内拮抗试验表明:融合子FSf-11、FSf-13对灰葡萄孢的抑制效果显着,其抑制机理主要引起灰葡萄孢的基内菌丝严重畸变、缢缩或原生质凝聚等;FSf-30对粉红聚端孢的抑制作用比亲本SC1也有所增强,除引起粉红聚端孢的基内菌丝严重畸变外,还有菌丝细胞壁消解现象。4. 3株融合子在形态特征、培养特征和生理生化特性上均与双亲存在明显差异,融合子的抗药性、生长速度和产孢量等方面也明显不同于双亲。在以亲本菌株F46和SC1为对照的情况下,利用16S rDNA PCR-RFLP鉴定融合子,检测出融合子FSf-30不仅具有双亲的DNA条带,还增加1~3条新的谱带;融合子FSf-11、FSf-13除双亲共有的DNA条带外,未检测到亲本F46所特有的一条谱带。在灭活原生质体的基础上,将融合子鉴定的传统方法与现代分子方法相结合,综合考虑分析,推断出融合子FSf-11、

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

重寄生链霉菌论文参考文献

[1].刘冰.重寄生链霉菌F46与放线菌SC11原生质体融合研究[D].西北农林科技大学.2006

[2].王记侠.利用原生质体融合技术改良重寄生链霉菌F46和链霉菌SC1[D].西北农林科技大学.2006

[3].刘冰,宗兆锋,王记侠.重寄生链霉菌F46与生防放线菌SC11融合菌株的筛选[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2006

[4].王记侠,宗兆锋,刘冰.重寄生链霉菌F46与链霉菌SC1融合子的筛选[J].西北农业学报.2005

[5].杨洪俊.紫外线诱变改良重寄生链霉菌PR和F46[D].西北农林科技大学.2005

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