低温脂肪酶菌株的诱变筛选及酶学特性研究

论文摘要

以本公司菌种保藏室的产脂肪酶黑曲霉菌株AG007作为出发菌株,通过常温常压等离子体（ARTP）诱变筛选得到突变株A45-72,其产脂肪酶的活力较AG007提高了86%。再对A45-72进行亚硝基胍（NTG）复合诱变,得到突变菌株GH-73,其摇瓶发酵酶活达到2 350 U/m L,较出发菌株AG007提高了1.2倍,将GH-73传到第10代,其产酶较稳定。摇瓶中添加2.5%橄榄油作为诱导剂时,产酶能力达到2 875 U/m L。通过酶学特性研究发现,其最适作用温度为30℃,且在0℃左右保留30%的活性,是一种低温脂肪酶。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 培养基
•     1.2.1 种子培养基。
•     1.2.2 富集培养基。
•     1.2.3 平板初筛培养基。
•     1.2.4 斜面培养基。
•     1.2.5 摇瓶复筛培养基。
•     1.2.6 Tris缓冲液 （p H 7.0） 。
•   1.3 试验方法
•     1.3.1 孢子悬液的制备。
•     1.3.2 ARTP诱变。
•     1.3.3 亚硝基胍诱变。
•       1.3.3. 1 亚硝基胍 （NTG） 溶液的配制。
•       1.3.3. 2 诱变方法。
•     1.3.4 脂肪酶活力的测定方法。
•     1.3.5 筛选方法。
•       1.3.5. 1 初筛方法。
•       1.3.5. 2 复筛方法。
• 2 结果与分析
•   2.1 ARTP诱变结果
•     2.1.1 ARTP诱变时间的确定。
•     2.1.2 ARTP诱变筛选结果。
•   2.2 NTG诱变结果
•     2.2.1 NTG诱变剂量的选择。
•     2.2.2 NTG诱变筛选结果。
•   2.3 突变菌株遗传稳定性研究
•   2.4 诱导剂对菌株GH-73产酶的影响
•     2.4.1 油脂种类对菌株GH-73产酶的影响。
•     2.4.2 橄榄油的添加量对菌株GH-73产酶的影响。
•   2.5 菌株GH-73酶学特性研究
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王兴吉,贾仁洁,王克芬,刘文龙

关键词: 常温常压等离子体,亚硝基胍,复合诱变,低温脂肪酶

来源: 安徽农业科学 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 山东隆科特酶制剂有限公司山东省酶制剂发酵技术重点实验室

基金: 国家重点研发计划(2017YFB0308400-01-05)

分类号: Q93

页码: 1-3+9

总页数: 4

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