聚合胚论文_周汝江,陈建泉,胡以平,成国祥

导读:本文包含了聚合胚论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:小鼠,胚胎,特性,背景,论文,n4n。

聚合胚论文文献综述

周汝江,陈建泉,胡以平,成国祥^[1]（2005）在《小鼠遗传背景对4n胚胎及2n-4n聚合胚制作效率的影响》一文中研究指出不同品系小鼠的 2 细胞期胚胎 (二倍体 ,2n) ,经电融合后 ,获得发育的 4 细胞期四倍体胚胎 (4n)的能力上存在着差异。将不同品系小鼠的 2n、 4n胚胎分别配对作聚合 ,所获 2n 4n聚合胚的发育结果表明 :在着床前 ,2n 4n聚合胚的获得率因胚胎品系组合的不同而异 ;胚胎移植后 ,聚合胚在与 4n胚胎相同或相近品系的移植受体中 ,其着床率较高 ;在着床后胎儿及出生仔鼠的获得率上 ,采用遗传杂合性的 2n胚胎所组成的 2n 4n聚合组合较高。上述结果提示 :小鼠的遗传背景可影响到 4n胚胎及相应 2n 4n聚合胚的制作效率。以GFP标记跟踪2n 4n聚合胚 4n细胞着床后的发育命运 ,发现 :妊娠中后期的孕体中 ,4n细胞限制性地分布至胚外组织(本文来源于《动物学报》期刊2005年01期）

周汝江^[2]（2004）在《小鼠二倍体-四倍体聚合胚的制作及其发育特性的研究》一文中研究指出由二倍体(2N)的早期胚胎细胞或ES细胞与四倍体(4N)的早期胚胎细胞所组成的2N-4N聚合胚(嵌合胚)，其中的4N胚胎细胞具有明显的胚外组织限制性分布(发育)特性，即在由该嵌合胚发育得到的孕体中，4N胚胎细胞最终只分布至胎盘滋养层及卵黄囊内胚层等在内的胚外组织，而基本不参与原始外胚层所衍生的胎儿及胚外中胚层组织的发育。该特性很可能和参与聚合的4N胚胎细胞的本身特性有关，如加倍的核型以及较大的细胞体积等。尽管目前对2N-4N嵌合胚发育的具体机制尚未完全搞清，但我们可以利用2N-4N嵌合技术来研究哺乳动物发育相关基因的功能。此外，随着体细胞核移植研究的进展，人们逐步发现：核移植产生的重构胚(克隆胚)，其胚外组织的发育往往表现异常，从而导至着床后早期阶段大量胚胎的丧失；在种间核移植领域，因胎儿与移植母体子宫在种系上的差别，使得重构胚的着床几乎不可能。于是，利用2N-4N嵌合胚的发育特性，将重构胚或自其衍生的ES细胞与4N胚胎组构成种内(种间)2N-4N嵌合胚，有可能提供重构胚着床或正常发育所需的，包括胎盘在内的胚外组织，进而改善或实现重构胚的着床及着床后的发育，提高克隆动物的出生率。这项工作除其自身的生物学意义外，还可作为微注射、转基因细胞核移植后的另一个技术平台，因此建立起2N-4N嵌合胚的制作系统具有重大的理论与现实意义。本研究旨在确立二倍体-二倍体(2N-2NO聚合嵌合体小鼠制作的基本条件，运用胚胎聚合法获得存活的2N-4N小鼠，并通过GFP荧光标记，实现对2N-4N聚合胚中4N细胞发育特性的动态观察，从而最终为该技术在核移植上的应用创造了基础条件。研究的具体内容如下： 1、2N-2N聚合嵌合体小鼠制作体系的建立所建聚合嵌合体小鼠的制作体系包括：胚胎透明带的去除方法、用于聚合的胚龄、聚合培养载体、聚合介质、移植受体等基本条件。主要实验结论有：(1)0.5％的Protease在去除胚胎透明带的效果上与Tyrode’s相当；(2)96孔板与微滴作聚合培养载体时的聚合效率相近，但微滴第二军医大学硕士学位论文小鼠二倍体·四倍体聚合胚的制作及其发育特性的研究更适合作培养载体;(3)180 pg/耐浓度的PHA一P聚合介质处理后，所获得的聚合效率较佳;(4)聚合胚在M16培养液中培养，可发育至囊胚;(5)聚合囊胚移入受体子宫后，可足月发育并获得存活的毛色嵌合体小鼠。2、胚胎聚合法产生2N一4N嵌合胚及小鼠 ZN一4N聚合胚的制作方法基本上类似于ZN一2N聚合胚，不同之处在于:(l)利用2一cell期的ZN胚胎经电融合产生4N胚胎;(2)利用4或8一cell期的2N胚胎与4一cell期的4N胚胎作聚合组合:(3)采用常规的1:1聚合(1枚2N胚胎对1枚4N胚胎)与1:2的“夹心法”(2枚4N胚治中间夹1枚2N胚胎)的聚合方式。实验的主要结论有:(l)聚合胚在M16培养液中培养可发育至囊胚:(2)采用致密化与未致密化的8一Cen期2N胚胎与4N胚胎作聚合，在聚合率上无明显差异，但前者发育至聚合囊胚的比率较高;(3)常规的1:1聚合与“夹心法”聚合相比，在聚合完成的时间及聚合率上较接鸡， (4)移植聚合囊胚至受体子宫后，可回收到妊娠中、后期的胎儿(简称为胎儿)及获得发育足月的存活仔鼠;(5)部分回收胎儿的发育表现延滞、而胎盘的发育却不受影响;(6)回收胎儿眼部虹膜中沉积的色素及出生后仔鼠的毛色均同于2N胚胎所生仔鼠，表明胎儿与仔鼠源自参与聚合的2N胚胎;(7)小鼠的遗传背景将对ZN一4N聚合胚的发育能力产生影响:移植至与4N胚胎相同品系受体中的ZN一4N聚合胚的着床率较高;着床后的孕体中，由遗传杂合性的2N胚胎细胞所组成的聚合胚，发育至胎儿及仔鼠的比率较高。3、利用荧光标记研究ZN一4N聚合胚中4N胚胎细胞的发育特性利用转GFP基因的2一cel工期胚胎，经电融合后获得4N胚胎，与无G即标记的ZN胚胎聚合，跟踪4N胚胎细胞在聚合胚发育过程中的动态变化。结果表明:(l)带有GFP基因的4N胚胎和2N胚胎聚合后，并不影响ZN一4N聚合及聚合胚着床前的发育;(2)在聚合胚形成及聚合囊胚腔出现期间，不同倍性的胚胎细胞间并不发生混杂;多数早期聚合囊胚中，4N细胞共存于TE与工CM中;晚期囊胚中，4N细胞的数目明显下降，且很少存在于工CM细胞中;(3)在着床后的孕体中，4N胚胎来源的细胞存在于胎盘、卵黄囊组织，而在胎儿及羊膜组织中不存在，提示4N胚胎细胞限制性地分布至胚外组织。(本文来源于《第二军医大学》期刊2004-05-01）

聚合胚论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

由二倍体(2N)的早期胚胎细胞或ES细胞与四倍体(4N)的早期胚胎细胞所组成的2N-4N聚合胚(嵌合胚)，其中的4N胚胎细胞具有明显的胚外组织限制性分布(发育)特性，即在由该嵌合胚发育得到的孕体中，4N胚胎细胞最终只分布至胎盘滋养层及卵黄囊内胚层等在内的胚外组织，而基本不参与原始外胚层所衍生的胎儿及胚外中胚层组织的发育。该特性很可能和参与聚合的4N胚胎细胞的本身特性有关，如加倍的核型以及较大的细胞体积等。尽管目前对2N-4N嵌合胚发育的具体机制尚未完全搞清，但我们可以利用2N-4N嵌合技术来研究哺乳动物发育相关基因的功能。此外，随着体细胞核移植研究的进展，人们逐步发现：核移植产生的重构胚(克隆胚)，其胚外组织的发育往往表现异常，从而导至着床后早期阶段大量胚胎的丧失；在种间核移植领域，因胎儿与移植母体子宫在种系上的差别，使得重构胚的着床几乎不可能。于是，利用2N-4N嵌合胚的发育特性，将重构胚或自其衍生的ES细胞与4N胚胎组构成种内(种间)2N-4N嵌合胚，有可能提供重构胚着床或正常发育所需的，包括胎盘在内的胚外组织，进而改善或实现重构胚的着床及着床后的发育，提高克隆动物的出生率。这项工作除其自身的生物学意义外，还可作为微注射、转基因细胞核移植后的另一个技术平台，因此建立起2N-4N嵌合胚的制作系统具有重大的理论与现实意义。本研究旨在确立二倍体-二倍体(2N-2NO聚合嵌合体小鼠制作的基本条件，运用胚胎聚合法获得存活的2N-4N小鼠，并通过GFP荧光标记，实现对2N-4N聚合胚中4N细胞发育特性的动态观察，从而最终为该技术在核移植上的应用创造了基础条件。研究的具体内容如下： 1、2N-2N聚合嵌合体小鼠制作体系的建立所建聚合嵌合体小鼠的制作体系包括：胚胎透明带的去除方法、用于聚合的胚龄、聚合培养载体、聚合介质、移植受体等基本条件。主要实验结论有：(1)0.5％的Protease在去除胚胎透明带的效果上与Tyrode’s相当；(2)96孔板与微滴作聚合培养载体时的聚合效率相近，但微滴第二军医大学硕士学位论文小鼠二倍体·四倍体聚合胚的制作及其发育特性的研究更适合作培养载体;(3)180 pg/耐浓度的PHA一P聚合介质处理后，所获得的聚合效率较佳;(4)聚合胚在M16培养液中培养，可发育至囊胚;(5)聚合囊胚移入受体子宫后，可足月发育并获得存活的毛色嵌合体小鼠。2、胚胎聚合法产生2N一4N嵌合胚及小鼠 ZN一4N聚合胚的制作方法基本上类似于ZN一2N聚合胚，不同之处在于:(l)利用2一cell期的ZN胚胎经电融合产生4N胚胎;(2)利用4或8一cell期的2N胚胎与4一cell期的4N胚胎作聚合组合:(3)采用常规的1:1聚合(1枚2N胚胎对1枚4N胚胎)与1:2的“夹心法”(2枚4N胚治中间夹1枚2N胚胎)的聚合方式。实验的主要结论有:(l)聚合胚在M16培养液中培养可发育至囊胚:(2)采用致密化与未致密化的8一Cen期2N胚胎与4N胚胎作聚合，在聚合率上无明显差异，但前者发育至聚合囊胚的比率较高;(3)常规的1:1聚合与“夹心法”聚合相比，在聚合完成的时间及聚合率上较接鸡， (4)移植聚合囊胚至受体子宫后，可回收到妊娠中、后期的胎儿(简称为胎儿)及获得发育足月的存活仔鼠;(5)部分回收胎儿的发育表现延滞、而胎盘的发育却不受影响;(6)回收胎儿眼部虹膜中沉积的色素及出生后仔鼠的毛色均同于2N胚胎所生仔鼠，表明胎儿与仔鼠源自参与聚合的2N胚胎;(7)小鼠的遗传背景将对ZN一4N聚合胚的发育能力产生影响:移植至与4N胚胎相同品系受体中的ZN一4N聚合胚的着床率较高;着床后的孕体中，由遗传杂合性的2N胚胎细胞所组成的聚合胚，发育至胎儿及仔鼠的比率较高。3、利用荧光标记研究ZN一4N聚合胚中4N胚胎细胞的发育特性利用转GFP基因的2一cel工期胚胎，经电融合后获得4N胚胎，与无G即标记的ZN胚胎聚合，跟踪4N胚胎细胞在聚合胚发育过程中的动态变化。结果表明:(l)带有GFP基因的4N胚胎和2N胚胎聚合后，并不影响ZN一4N聚合及聚合胚着床前的发育;(2)在聚合胚形成及聚合囊胚腔出现期间，不同倍性的胚胎细胞间并不发生混杂;多数早期聚合囊胚中，4N细胞共存于TE与工CM中;晚期囊胚中，4N细胞的数目明显下降，且很少存在于工CM细胞中;(3)在着床后的孕体中，4N胚胎来源的细胞存在于胎盘、卵黄囊组织，而在胎儿及羊膜组织中不存在，提示4N胚胎细胞限制性地分布至胚外组织。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。