凝胶层析论文_焦文阳,陆宁,王兰腾,关甜,雷红涛

导读:本文包含了凝胶层析论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:层析,凝胶,光学,离子交换,蛋白,疏水,支架。

凝胶层析论文文献综述

焦文阳,陆宁,王兰腾,关甜,雷红涛[1](2019)在《凝胶过滤层析一步纯化MC-LR Fab的方法及吸附机制初探》一文中研究指出为高效制备高纯微囊藻毒素(MC-LR)Fab片段,采用木瓜蛋白酶酶解腹水中纯化获得的单克隆抗体,利用该Fab片段与凝胶过滤层析介质结合的特殊现象分离酶解混合物。通过单因素实验考察流动相中离子强度和pH对Fab片段在柱中保留行为的影响,结合Fab片段等电点(pI)及聚集性质分析二者结合机制。结果表明,腹水经protein G纯化得到纯度大于90%的IgG,IgG经木瓜蛋白酶酶解,主要产物为Fab片段、Fc片段和少量IgG,酶解混合物经凝胶过滤层析一步纯化获得纯度为94.5%,回收率为51%,对MC-LR抑制率为94%的Fab片段。Fab片段pI为6.02,由于表面较强疏水性产生聚集,疏水吸附导致Fab片段与凝胶过滤层析介质结合,降低流动相中离子强度,减弱疏水作用同时提高pH增强离子排阻作用可使Fab片段消除吸附,实现了Fab片段的高效制备。(本文来源于《食品工业科技》期刊2019年21期)

张亚旗,赵雪,曾荣急,李桂玲,李健[2](2018)在《离子交换层析和凝胶层析结合法纯化钝顶螺旋藻中的藻蓝蛋白》一文中研究指出对钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中藻蓝蛋白的提取和纯化方法进行了改进。用0.02M PBS溶解螺旋藻藻粉,800r/min搅拌溶胀5h,获得藻蓝蛋白(Phycocyanin)粗提液。依次进行两步盐析获得粗蛋白提取液,粗蛋白提取液再经过DEAE Sepharose FF离子交换层析和Superdex 200凝胶层析对其进行纯化,纯度达到4.17。纯化后的PC在12%十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中得到两条带,分别是α和β两个亚基,分子质量分别为21.4 ku和17.0 ku。结果表明,通过上述分离纯化过程得到了较高电泳纯度的藻蓝蛋白。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07)

刘敏,陆伟跃,潘俊,谢操[3](2017)在《凝胶过滤层析法调节脂质体内外水相pH的探讨》一文中研究指出通过对脂质体内外水相pH梯度的制备方法的探讨,采用凝胶过滤层析技术将脂质体外水相的pH4.0柠檬酸缓冲液替换成pH 7.2磷酸盐缓冲液,在脂质体内外水相形成pH梯度。在药脂比为1∶5、1∶10、1∶15和1∶20(质量比)时,阿霉素在pH梯度的驱动下从脂质体外水相穿越脂质双分子膜进入内水相,包封率分别达到96.7%、98.7%、96.8%和95.1%,其中药脂比1∶10时包封率达到最高。药脂比1∶10制备的阿霉素脂质体在37℃,12 h内阿霉素泄漏均低于1.0%;48 h内药物泄露率低于5.0%。通过该实验,使学生们能够观测到如何采用凝胶过滤层析技术调节pH梯度,以及pH梯度在阿霉素脂质体主动载药过程中的重要性,为脂质体递释系统的课堂理论教学奠定了良好的实验基础。(本文来源于《实验室研究与探索》期刊2017年06期)

赵春燕,康素花,荣向华,张旋[4](2016)在《凝胶层析分离纯化乳酸菌菌体蛋白条件的优化》一文中研究指出采用凝胶过滤层析分离纯化乳酸菌菌体蛋白,选择不同的凝胶过滤介质、过滤柱高度、洗脱流速、样品上样量对经过Sephadex G-25脱盐处理的乳酸菌菌体蛋白进行洗脱,观察洗脱峰。结果表明,凝胶过滤介质、过滤柱过度、洗脱流速和样品上样量均不同程度的影响菌体蛋白的纯化效果。在本试验中,分离纯化乳酸菌菌体蛋白的凝胶过滤层析参数为:Sephadex G-75的层析介质以45 cm的柱床高度,洗脱流速0.75 m L/min,样品上样量为5%CV时,对乳酸菌菌体蛋白可达到最佳的分离纯化效果。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2016年22期)

陆光兴,詹晓北,朱莉,郑志永,吴剑荣[5](2016)在《薄层层析-图像分析定量热凝胶β-1,3-葡寡糖》一文中研究指出单向两次薄层层析展开可以显着提高对热凝胶β-1,3-葡寡糖的分析效果,以Silica gel60 F254硅胶板为固定相,V(乙酸)∶V(乙酸乙酯)∶V(水)=2∶2.4∶1.4为展开剂,展距20 cm时,单向两次展开可以较好地分离聚合度为2~13的热凝胶β-1,3-葡寡糖。此外还建立了Image J软件图像分析定量热凝胶β-1,3-葡寡糖的方法,在不同糖质量浓度范围(0.02~0.1、0.1~0.8、0.8~5.0 g/L)内寡糖显色斑点的灰度积分响应值与糖浓度分别有着很好的线性关系(R2>0.99)。该方法的灵敏度高达0.02 g/L,相对标准偏差为1%~5%,稳定性很好。与HPLC等方法相比具有操作简便、分析快速、不需专门仪器和特定寡糖标准品等优点。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2016年11期)

张烈烈[6](2016)在《基于光学相干层析的叁维生物打印水凝胶优化控制研究》一文中研究指出作为组织工程的重要组成部分,支架为细胞生长提供了必要的空间和环境,其化学组成和物理结构能够影响细胞的活动,如细胞的粘附、迁移、增殖和分化等。水凝胶具有良好的生物相容性、可降解性、亲水性以及包裹细胞的强大能力,这使得水凝胶被广泛应用于构建组织工程支架。叁维生物打印(3D Bio-printing)技术可以无毒且方便地按照预先设计几何结构制备出完全连通的叁维结构,已成为制造可以细胞接种或细胞封装的生物支架的良好工具。水凝胶和3D Bio-printing技术的结合为开发可细胞接种/封装的组织工程支架提供了一种设计关联的可控解决方案。基于叁维生物打印技术定制支架的内部多孔结构一般是为了满足几何、机械、流体运输等特性,但因水凝胶的固有特性,直接叁维打印出与预期形态匹配的定制多孔结构仍然存在困难。当前研究证实了打印出的结构与设计的结构在形态参数上存在显着差异,这些差异严重影响了水凝胶支架的实际应用,因此研究如何制造出与预期形态参数尽量匹配的定制结构具有重要意义。为此,本文提出一种优化水凝胶支架叁维生物打印稳定性和可控性的方法,该方法首先实现叁维打印水凝胶支架结构的定量表征,基于表征结果反馈支架设计和打印,然后通过迭代的方法降低设计与打印支架间的形态差异,提高水凝胶支架叁维制造的稳定性和可控性。该方法的关键在于如何实现叁维生物打印水凝胶支架的非侵入高分辨在线定量表征,本文提出基于光学相干层析(optical coherence tomography,OCT)成像的方法实现叁维生物打印水凝胶支架的在线定量表征。基于光学相干层析的水凝胶支架叁维生物打印优化控制的方法具体如下:第一次闭环称之为为“实验”组,用来评价水凝胶叁维打印过程的内在可控性,设计和打印不同孔隙尺寸的水凝胶支架,采用实验室自制的扫频OCT系统对打印的水凝胶支架进行成像和结构定量表征,包括孔隙大小,实体支撑尺寸,孔隙率,支架表面积和体积,并与原始设计参数做比较。第二次闭环称之为“生产”组,以第一步分析的结构差异性为输入,结合差异相关分析和叁维打印工艺过程优化,按照新的参数设置再次打印水凝胶以降低实体与设计模型间的不一致。研究结果显示,该方法可有效降低水凝胶支架平均孔尺寸的不一致,从30%降低到2%,表明基于OCT技术预测和精准控制水凝胶支架的叁维生物打印是可行的。本文的研究同时证明OCT技术可以为组织工程支架设计与表征、生物叁维打印过程控制、工程组织体外监测等提供具有潜力的精准化工具。(本文来源于《杭州电子科技大学》期刊2016-03-01)

王玲,涂沛,石然,徐铭恩[7](2015)在《光学相干层析成像技术用于叁维生物打印水凝胶支架结构的定量评价研究》一文中研究指出叁维生物打印水凝胶支架内部结构的无损检测分析,对组织工程支架设计制造和生物功能实现具有重要意义。提出用扫频光学相干层析成像技术(SS-OCT)对叁维生物打印的水凝胶支架进行无损成像和定量分析。设计和打印了4种代表性结构的叁维水凝胶支架。用高分辨SS-OCT成像系统重建并揭示了支架内部叁维结构,识别出打印支架与设计结构的差异以及孔融合、孔变形、通道堵塞等打印缺陷。基于阈值分割和形态操作的自动分析算法,定量表征了支架的孔隙大小及分布、实体支撑尺寸、孔隙率和叁维连通性等结构参数。研究证明,OCT技术可以为叁维生物打印水凝胶支架的优化设计、过程控制、功能分析提供有力工具。(本文来源于《中国激光》期刊2015年08期)

刘珊珊,陈季旺,陈露,丁文平,吴永宁[8](2015)在《大米镉结合蛋白的凝胶层析纯化及生化性质》一文中研究指出目的研究大米镉结合蛋白(rice cadmum-binding protein,RCBP)的纯化及生化性质,探讨RCBP的形成机制。方法采用Sephedex G-75凝胶层析从乙醇沉淀的大米蛋白(Ethanol precipitation protein,EP)中纯化RCBP,SDS-PAGE鉴定RCBP的纯度及测定分子质量,氨基酸自动分析仪、FTIR分析RCBP的氨基酸组成及二级结构。结果凝胶层析纯化得到组分b(目标RCBP),组分b为纯度均一的RCBP,分子质量约为32 kDa。组分b中疏水性氨基酸占56.76%、芳香族氨基酸占19.41%,是一类富含疏水性氨基酸和芳香族氨基酸的镉结合蛋白。组分b中N-H相对于C=O以反式构型存在,二级结构只含有β-折迭和β-转角。结论镉通过疏水氨基酸或芳香族氨基酸的特征基团与大米蛋白结合形成RCBP。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2015年06期)

杨莲花[9](2015)在《凝胶层析与离子交换层析结合法纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗》一文中研究指出2010版《中国药典》中人用狂犬病疫苗中的蛋白含量标准提高,要求纯化后未加稳定剂的病毒液中总蛋白含量不高于80μg/剂,牛血清蛋白残留应不高于50ng/剂,成品中宿主细胞蛋白残留不高于24μg/剂,提高纯化分离效果则是生物药企要攻克的问题之一。长期以来在层析系统应用的摸索实验中显示,凝胶层析(Speharose4Fast Flow,4FF)对宿主蛋白和牛血清蛋白分离效果较好,工作条件温和,但实际生产应用中由于样品杂质含量高,容易将层析柱进液口及凝胶孔径堵塞,延长分离时间而影响分离效果;离子交换层析(Core700),分辨率高,胶体积小,清洗方便,上样量大,分离时间短,在生物医药等领域得到广泛应用。本次实验将凝胶层析与离子交换层析按照core700-core700-4FF,Core700-4FF-4FF,Core700-4FF-Core700叁种不同顺序组合使用,对实验样品进行纯化分离。本实验分为两部分:第一部分,选取3批实验样品,每批样品均按上述叁种组合方法进行纯化分离,根据纯化后的总蛋白含量,宿主蛋白含量,牛血清蛋白含量,抗原含量,确定能达到药典标准的组合方式。经实验1得到,两种层析柱以Core700-4FF-4FF的组合方式使用时,分离效果较优于其他两种组合方式。第二部分,根据实验1的结果,将另外3批实验样品按照Core700-4FF-4FF的组合方法进行验证实验,检测最后纯化液的总蛋白含量、宿主蛋白含量、牛血清蛋白含量、抗原含量。通过两部分实验,两种层析柱以Core700-4FF-4FF的组合方式使用时,纯化后的检测结果符合2010版药典的要求,可以作为建立纯化工艺的参考,也可作为各相关技术人员操作及实验参考。层析系统在疫苗纯化中的应用研究一直是个备受关注课题,上样体积、上样速度、上样浓度和抗原收集起止点的选择,都是影响疫苗纯化效果的因素,而凝胶层析柱与离子交换层析柱的组合方式更好地发挥了两种层析柱的特点,优化了疫苗的纯化效果,生物药企可根据生产情况,合理灵活使用两种层析柱,保证疫苗质量,提高纯化效率,增加企业的经济效益。(本文来源于《吉林大学》期刊2015-05-01)

舒一梅,李诚,付刚,陈姝娟,何利[10](2014)在《凝胶层析法分离猪股骨降血压肽及其体外稳定性》一文中研究指出将猪股骨酶解液超滤分离后,对分子质量小于5 k D的酶解滤液(IC50值为1.362 mg/m L)进行凝胶层析分离,研究洗脱液、流速、上样量3个因素对猪股骨降血压肽分离纯化效果的影响。结果表明:以去离子水为洗脱液,流速0.6 m L/min,上样量体积分数1%时,能够得到最佳分离效果,其最高活性组分IC50值达到0.401 6 mg/m L。研究凝胶层析分离后抑制率最高的组分的稳定性,发现其有较好的耐热和耐酸碱、耐盐性,在p H 2~6中有良好的溶解性。(本文来源于《食品科学》期刊2014年24期)

凝胶层析论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

对钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中藻蓝蛋白的提取和纯化方法进行了改进。用0.02M PBS溶解螺旋藻藻粉,800r/min搅拌溶胀5h,获得藻蓝蛋白(Phycocyanin)粗提液。依次进行两步盐析获得粗蛋白提取液,粗蛋白提取液再经过DEAE Sepharose FF离子交换层析和Superdex 200凝胶层析对其进行纯化,纯度达到4.17。纯化后的PC在12%十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中得到两条带,分别是α和β两个亚基,分子质量分别为21.4 ku和17.0 ku。结果表明,通过上述分离纯化过程得到了较高电泳纯度的藻蓝蛋白。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

凝胶层析论文参考文献

[1].焦文阳,陆宁,王兰腾,关甜,雷红涛.凝胶过滤层析一步纯化MC-LRFab的方法及吸附机制初探[J].食品工业科技.2019

[2].张亚旗,赵雪,曾荣急,李桂玲,李健.离子交换层析和凝胶层析结合法纯化钝顶螺旋藻中的藻蓝蛋白[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018

[3].刘敏,陆伟跃,潘俊,谢操.凝胶过滤层析法调节脂质体内外水相pH的探讨[J].实验室研究与探索.2017

[4].赵春燕,康素花,荣向华,张旋.凝胶层析分离纯化乳酸菌菌体蛋白条件的优化[J].食品研究与开发.2016

[5].陆光兴,詹晓北,朱莉,郑志永,吴剑荣.薄层层析-图像分析定量热凝胶β-1,3-葡寡糖[J].食品与生物技术学报.2016

[6].张烈烈.基于光学相干层析的叁维生物打印水凝胶优化控制研究[D].杭州电子科技大学.2016

[7].王玲,涂沛,石然,徐铭恩.光学相干层析成像技术用于叁维生物打印水凝胶支架结构的定量评价研究[J].中国激光.2015

[8].刘珊珊,陈季旺,陈露,丁文平,吴永宁.大米镉结合蛋白的凝胶层析纯化及生化性质[J].食品安全质量检测学报.2015

[9].杨莲花.凝胶层析与离子交换层析结合法纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗[D].吉林大学.2015

[10].舒一梅,李诚,付刚,陈姝娟,何利.凝胶层析法分离猪股骨降血压肽及其体外稳定性[J].食品科学.2014

论文知识图

蛋白纯化SDS-PAGE图谱(考马斯...的SephacrylS-300HR凝胶层析旋毛虫肌幼虫天然P43蛋白的阳离子交换...旋毛虫成虫/新生幼虫ES产物中天然T3...加工废弃液中单体化合物的分离和纯化...蛋白纯化图谱

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