分子信标论文_张志庆,汪珊珊,张子辰,马杰,王秀凤

导读:本文包含了分子信标论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:信标,分子,核酸,荧光,凝血酶,碱基,芽孢。

分子信标论文文献综述

张志庆,汪珊珊,张子辰,马杰,王秀凤[1](2019)在《基于滚环合成的聚分子信标用于凝血酶的靶向检测》一文中研究指出采用滚环扩增(RCA)合成得到的DNA长链打开带适配体的分子信标,由于RCA长链上带有多个与分子信标(MB)互补的重复序列,其打开分子信标的能力比单一互补短链提高了上百倍.所形成的聚多价分子信标组装体,在分子信标浓度相同的情况下,打开后的荧光强度也大幅上升;并且由于组装体上多价适配体的存在,聚分子信标对凝血酶的靶向能力显着增强.实验结果表明,聚分子信标结合凝血酶后,其荧光信号与凝血酶浓度呈线性关系,检测灵敏度达到0. 2 nmol/L,该体系的构建有利于实现对凝血酶的高灵敏、特异性检测.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2019年12期)

肖稳,张海韵,杨滔,贺燕,严礼[2](2019)在《羧甲基壳聚糖-分子信标-金纳米生物传感器检测鼠伤寒沙门氏菌》一文中研究指出基于传统的沙门氏菌检测方法检测周期长、效率不高等缺陷,本研究通过合成一种羧甲基壳聚糖-分子信标-金纳米材料,采用一种新的基于分子信标共价功能化的壳聚糖技术和金纳米团聚比色的方法对含SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌进行检测。在羧甲基壳聚糖上交联环状结构的适配体,当加入靶标之后,由于靶标与环状结构适配体结合导致分子信标刚性结构崩解,插入茎状结构中的金纳米颗粒(GNRs)释放出来,当在溶液中加入一定量的NaCl溶液后,金纳米颗粒会发生团聚,根据聚合度的不同,产生相应颜色变化,从而实现对含SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌的快速检测,结果表明:通过检测金纳米颗粒发生的显色反应的吸光度可以实现对含有SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌进行快速检测,并且这种方法具有较高的特异性和灵敏度。在此检测体系中,靶标浓度和显色反应的吸光度值在0. 05~0. 5μmol/L内具有良好的线性关系,并且对于靶标DNA的检测下限为50nmol/L。(本文来源于《中国食物与营养》期刊2019年09期)

孙璇,白家磊,高志贤[3](2019)在《基于分子信标方法对DNAzyme反应的优化与检测》一文中研究指出目的建立DNAzyme与分子信标结合-切割-释放的级联放大方法,优化反应的条件,对DNAzyme进行定量检测。方法选择4个优化条件,分别是:金属离子种类、金属离子浓度、pH值和反应时间。在最佳条件下建立标准曲线,对DNAzyme进行检测。结果本方法的最佳反应条件为:Mg~(2-)金属离子催化反应、Mg~(2+)浓度为10mmol/L、pH为9.5、反应时间为4h。标准曲线为Y=17.1628X+420.7767(r~2=0.9402),检测范围为0.5~100 nmol/L。结论此方法理论正确,实验的准确度高,为DNAzyme的应用提供了一个成熟的方法和新的思路。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年18期)

章波[4](2019)在《基于分子信标杂交技术快速检测金黄色葡萄球菌方法的建立与应用》一文中研究指出目的:建立直接鉴定阳性血培养或固体培养基分离阳性标本中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的分子信标(Molecular Beacon,MB)荧光原位杂交方法,通过荧光显微镜或流式细胞仪对荧光信号进行识别,从而实现对SA的快速检测,并评估该方法的临床应用。方法:针对SA的16S rRNA基因序列,合成叁条特异性分子信标探针(MB1、MB2和MB3),其中MB1和MB2为本研究设计,MB3为文献报道的SA探针,对叁条探针的信噪比(S/N值)和热变性曲线等进行评估,筛选出最佳探针。对杂交体系的优化包括分子信标浓度(0μmol/L~2μmol/L)、MgCl_2浓度(0mmol/L~7mmol/L)以及去离子甲酰胺浓度(0%~55%)等。设计多条与筛选出的分子信标不匹配基因序列,通过热变性曲线和荧光导数曲线筛选最佳杂交温度。优化溶葡萄球菌素透化处理SA细胞壁的浓度(0U/mL~20U/mL)。采用该杂交体系检测阳性血培养或固体培养基分离的10种临床常见菌株及标准菌株(革兰氏阳性球菌),通过荧光显微镜识别荧光信号,评价该杂交体系对SA检测的特异性。利用SA标准菌株,采用流式细胞仪检测阴性空白SA菌液及分子信标SA菌液,统计两组平均荧光强度差异。以阴性空白SA菌液、分子信标杂交SA菌液及非特异性荧光染料PI染色SA菌液为对照,通过流式细胞仪检测200份血培养标本待测阳性球菌,与传统的表型鉴定方法比较,评价该杂交体系检测SA的特异性和灵敏度。结果:设计、合成的MB1的S/N值均高于MB2和MB3的S/N值(均P<0.001)。不同浓度下MB1S/N值均大于20,MB1的热变性曲线结果显示在温度低于50℃荧光强度保持稳定(接近本底荧光),在50℃~65℃荧光强度逐渐增强,大于65℃荧光强度逐渐减弱。建立的MB1杂交体系为:1.4μmol/L MB1、2.5 mmol/L MgCl_2、25%去离子甲酰胺。当温度低于45℃时MB1可区分两个碱基不匹配基因序列,当温度在45~50℃可区分单碱基不匹配基因序列,温度高于50℃影响MB1稳定性。SA细胞壁最佳透化条件为:7.5 U/ml溶葡萄球菌素作用5 min;优化后的杂交体系与阳性血培养或固体培养基分离的临床菌株及标准菌株杂交,在荧光显微镜下仅有SA产生荧光信号,其余均未见荧光。流式细胞仪检测分子信标杂交SA菌液平均荧光强度(11.47±2.27)高于阴性SA菌液的平均荧光强度(1.71±0.59),P<0.001。该方法检测200份血培养标本中待测阳性球菌,对SA检测的特异性和灵敏度分别为100%和95.83%,与传统的表型鉴定方法相比具有极强的一致性(Kappa值=0.967)。结论:(1)基于分子信标荧光原位杂交方法可通过荧光显微镜或流式细胞仪实现血培养阳性或固体培养基分离的SA快速鉴定。(2)基于分子信标荧光原位杂交方法应用于血培养阳性标本中SA的检测,特异性和灵敏度高,与传统的表型鉴定方法比较具有极强的一致性。(本文来源于《石河子大学》期刊2019-06-01)

鲁子敬,熊威威,翟琨,向东山,谭志斗[5](2019)在《基于双重猝灭分子信标及核酸染料Hoechst 33258对单链核酸的双色定量检测》一文中研究指出利用鸟嘌呤(G)碱基和有机猝灭基团Black Hole Quencher 1 (BHQ-1)对荧光基团6-羧基荧光素(6-Carboxyfluorescein group,FAM)的双重猝灭作用构建了一种结构简单的双重猝灭分子信标,结合核酸染料Hoechst 33258,以艾滋病毒RNA片段的反转录序列(33个碱基)为目标DNA,建立了一种高灵敏单链核酸(ssDNA)的双色荧光定量检测方法。此分子信标中,荧光基团及有机猝灭基团分别设计为FAM和BHQ-1,分子信标的茎的碱基全部设计为C-G碱基对,环的碱基序列设计为目标DNA的互补序列,与BHQ-1相连接的为3个带有G碱基的核苷酸。没有目标DNA时,分子信标呈茎-环结构,荧光基团FAM与有机猝灭基团BHQ-1及G碱基距离很近,在BHQ-1及G碱基的双重猝灭下,FAM的荧光很弱;另外,分子信标的茎的碱基全部是C-G碱基对,不能与核酸染料Hoechst 33258相结合,因此Hoechst 33258的荧光也很弱。当有目标DNA存在时,分子信标的环与目标DNA杂交形成双链,茎-环结构被破坏,FAM远离猝灭基团BHQ-1及G碱基,其荧光得到恢复;同时,核酸染料Hoechst 33258与双链DNA中的A-T碱基对相结合,其荧光显着增强。根据荧光基团FAM及核酸染料Hoechst 33258荧光增强的程度可实现对ssDNA的定量检测。在优化的条件下,目标DNA的浓度在0.05~8.0 nmol/L范围内时,FAM和Hoechst 33258的总荧光强度(ΔI_T)与目标DNA的浓度(C)具有良好的线性关系,回归方程为ΔI_T=192.2C+115.08 (R~2=0.9938),检出限为20 pmol/L (3σ,n=9)。此方法操作简单、灵敏度高、选择性好、检出限低。(本文来源于《分析化学》期刊2019年07期)

李晓双[6](2019)在《银纳米簇分子信标在荧光生物传感器方面的应用研究》一文中研究指出近年来随着科学技术的不断发展,越来越多的人开始关注和研究荧光生物传感器,荧光生物传感器所涉及的领域也越来越多,包括化学、物理学、生物学、光学等各个领域。荧光生物传感器利用荧光的特殊光学性质,将荧光信号的变化作为检测的手段和依据,通过出峰的位置、信号的强弱作为依据进而判断和检测小分子、核酸、金属离子等。将荧光生物传感器作为检测手段进行检测,具有很高的灵敏度、耗时短、操作十分的简单、选择性比较好、成本较低等很多优良的性能,已经成为当今热门的课题,越来越多的人开始进行深入的研究。当前,纳米材料尤其是荧光纳米材料中的金属纳米簇,由于具有独特的性质如选择性好、无毒、成本低、灵敏度高等优点已经被广泛应用于荧光生物传感器的领域之中。随着科学的不断进步以及人们对于荧光生物传感器的不断深入的研究,我们越来越需要一些性能更加优良的荧光生物传感器。因此,本论文主要针对高性能的荧光生物传感器进行研究。1.从特点、制备方法和实际应用方面对荧光生物传感器有一个简单的介绍,并分别阐述了荧光金属纳米簇中的金、铜、银纳米簇的性质、合成与应用。同时,阐述了本论文的主要内容和研究意义。2.提出了一种基于高灵敏度免标记的银纳米簇荧光分子信标(MB)检测叁磷酸腺苷(ATP)的方法。该传感器包含一个发夹状银纳米簇分子信标、两条短单链DNA(ssDNA)序列和T4 DNA连接酶。分子信标由叁个部分组成:5`端是合成银纳米簇的DNA序列;中间的DNA序列形成了发夹状的结构;3`端是富含G的DNA序列。当ATP不存在时,分子信标(MB)的5`端会形成荧光信号很弱的银纳米簇。然而这时分子信标的中间序列形成了发夹状的结构,从而使3`端的G-rich序列靠近5`端的银纳米簇,这将导致银纳米簇荧光信号的增强。因此,当我们使用此探针来检测ATP时,传感器中的两条短DNA链会在ATP和T4 DNA连接酶的共同作用下形成一条长链,此长链可以打开分子信标的发夹状结构,从而使分子信标的3`端和5`端分开,从而使得体系的荧光下降。荧光下降的幅度与待检测的ATP的含量成正比,因此我们可以通过体系荧光的下降来检测体系中ATP的含量。此传感器与传统的方法相比具有免标记,成本低,灵敏度高的优点。3.使用高灵敏的免标记银纳米簇分子信标(MB)对碱性磷酸酶(ALP)进行检测,此MB呈发卡状结构。随后,我们选择一条5`端含磷酸基团(-PO_4)的单链DNA(ssDNA)来检测ALP。当ALP存在时,此短链ssDNA 5`端的-PO_4在ALP的脱磷酸作用下,从ssDNA短链5`端脱掉,从而使ssDNA短链的5`端的-PO_4转换成5`端的-OH,此时由于-PO_4的消失,T4 DNA连接酶无法发挥作用,MB的发夹状结构无法被打开,体系荧光较强。当没有ALP的存在时,ssDNA与MB会在T4 DNA连接酶的作用下形成一个稳定的双螺旋结构,在这个双螺旋结构中,MB的发夹状被打开,5`端和3`端分离,银纳米簇的荧光增强现象消失,体系的荧光减弱。通过荧光强弱的变化可以检测ALP的存在,ALP的含量与体系的荧光强度成正比。此方法操作简单、反应速度快、灵敏度高。(本文来源于《吉林化工学院》期刊2019-05-01)

谭效贝[7](2019)在《荧光修饰双链DNA偶联单链DNA的叁螺旋分子信标检测转Bt基因》一文中研究指出当今世界,科技发展日新月异,科技的进步带动现代生物技术的大发展,其中转基因技术又被称之为人类历史上具有飞跃性进步的第二次“绿色革命”。转基因技术就是在作物原有基因的基础上引入外源基因,改造其遗传物质,使其营养价值、生物性状更好的满足人类的需要。利用转基因技术把苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis Bt)转入到小麦体内,目的主要是增加小麦的抗虫性,其中苏云金芽孢杆菌的δ-内毒素基因是小麦获得抗虫性能的最主要原因。但是转基因技术也存在一定的生物安全性问题,所以世界各国不断加强对转基因作物的监管力度与检测手段的研发。本论文应用标记荧光猝灭基团(BHQ-1)的单链DNA(triplex-forming oligonucleotides TFO)和两端同时标记荧光基团(FAM-6)的单链DNA(Single DNA S-DNA)构建叁螺旋DNA分子信标,然后目标DNA单链(Target DNA T-DNA)和叁螺旋DNA分子信标接触,导致叁螺旋结构发生改变,从而引起荧光信号强度的改变,实现对转基因作物的灵敏检测。主要内容如下所示:弱酸性环境下自组装叁螺旋分子信标用于转基因作物中的目标基因苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis Bt)灵敏检测;最近几年,叁螺旋分子信标被广泛用于转基因作物的灵敏检测,其中包括T·A?T和C~+·G?C(?是Watson-Crick氢键,·是Hoogsteen氢键)等叁螺旋结构在内的分子信标是最为常用的。当叁螺旋分子信标形成时,含有嘧啶链(胸腺嘧啶T和胞嘧啶C的)的单链DNA(triplex-forming oligonucleotides,TFO)需要在弱酸性环境下首先质子化后才能和双链DNA的嘌呤链(A和G)结合形成稳定的叁螺旋分子信标,其中含有胞嘧啶C的DNA单链(TFO)质子化后,带正电的胞嘧啶C~+与带负电的DNA双链由于静电作用,能够起到稳定叁螺旋分子信标的作用。目标DNA单链加入后可以破坏叁螺旋信标的结构,导致荧光强度的改变,实现对转基因作物的灵敏检测,检测下限达到1 pM。中性环境下自组装叁螺旋分子信标用于转基因作物目标基因苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis Bt)灵敏检测;为了扩展叁螺旋分子信标的应用范围,在本论文中人为加入Ag~+用来增加叁螺旋分子信标在中性环境下的稳定性。Ag~+不仅能够特异性识别C·G?C的叁螺旋结构,而且还可以把C~+·G?C中的H~+置换成Ag~+C·G?C新的叁螺旋结构,这样Ag~+的加入就极大的增加叁螺旋分子信标的应用范围。目标DNA单链加入后可以破坏叁螺旋信标的结构,导致荧光强度的改变,实现对转基因作物的灵敏检测,检测下限达到0.1 pM。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-03-27)

黄晨,李婉明[8](2019)在《核酸适配体分子信标探针在肿瘤研究中的应用进展》一文中研究指出核酸适配体是从随机寡核苷酸文库中筛选出来,可以高特异性和高亲和力与靶点结合的寡核苷酸序列,具有靶点范围广、相对分子质量小、化学稳定性高、易于合成和修饰等优点。分子信标是一种具有特殊发夹结构的新型荧光探针,具有背景信号低、灵敏度高、特异性识别强、操作简单以及不必与未反应的探针分离即可实时检测等优点。将核酸适配体的分子识别特性和分子信标的光学检测性能相结合,在生命科学研究领域有着良好的应用前景。但核酸适配体的应用研究仍处于初级阶段,还有许多问题需要解决,为解决这些问题,进一步拓展核酸适配体分子信标在生命科学领域,特别是肿瘤领域的应用,需要科学工作者不断的努力和突破。同时随着核酸适配体的发展,越来越多与不同靶点特异性结合的核酸适配体将被筛选出来,并被应用于生命科学研究领域。本文主要对以核酸适配体为基础的分子信标探针在肿瘤研究中的应用进展进行综述。(本文来源于《癌症进展》期刊2019年04期)

周文玉,肖聃[9](2018)在《基于脱碱基位点的免标记分子信标设计》一文中研究指出本文设计了一个免标记的分子信标,该分子信标茎部有一个无碱基位点,其对面为A碱基,没有目标DNA时,分子信标为发卡型结构,荧光小分子alloxazine通过氢键结合到缺失位点处,其荧光猝灭。当加入目标DNA后,分子信标的发夹结构被打开,alloxazine释放出来,荧光恢复。(本文来源于《化工管理》期刊2018年27期)

余传星,张焕,黄明翔,赵自云,朱玲[10](2018)在《快速鉴定结核杆菌的双重分子信标检测体系的优化》一文中研究指出目的优化双重分子信标的实验体系以快速检测结核杆菌及其耐药菌株。方法选择不同镁离子浓度、退火温度、引物浓度分别进行荧光定量PCR,最终得出最佳反应条件。结果为保证扩增效率且无非特异性扩增,最终选择最佳条件是:Mg~(2+)浓度3.0mmol/L;退火温度60℃;引物浓度0.3mmol/L。结论确立了双重分子信标实验的最优条件,从而保证了分子信标荧光定量PCR检测结核杆菌具有操作简便、快速、灵敏度高(最低可检测1CFU/mL)、特异性强(只能检测包括耐药菌株的结核杆菌复合群)、重复性好(变异系数<5%)等优势,为双重分子信标检测结核杆菌提供了必要条件。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2018年09期)

分子信标论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

基于传统的沙门氏菌检测方法检测周期长、效率不高等缺陷,本研究通过合成一种羧甲基壳聚糖-分子信标-金纳米材料,采用一种新的基于分子信标共价功能化的壳聚糖技术和金纳米团聚比色的方法对含SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌进行检测。在羧甲基壳聚糖上交联环状结构的适配体,当加入靶标之后,由于靶标与环状结构适配体结合导致分子信标刚性结构崩解,插入茎状结构中的金纳米颗粒(GNRs)释放出来,当在溶液中加入一定量的NaCl溶液后,金纳米颗粒会发生团聚,根据聚合度的不同,产生相应颜色变化,从而实现对含SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌的快速检测,结果表明:通过检测金纳米颗粒发生的显色反应的吸光度可以实现对含有SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌进行快速检测,并且这种方法具有较高的特异性和灵敏度。在此检测体系中,靶标浓度和显色反应的吸光度值在0. 05~0. 5μmol/L内具有良好的线性关系,并且对于靶标DNA的检测下限为50nmol/L。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

分子信标论文参考文献

[1].张志庆,汪珊珊,张子辰,马杰,王秀凤.基于滚环合成的聚分子信标用于凝血酶的靶向检测[J].高等学校化学学报.2019

[2].肖稳,张海韵,杨滔,贺燕,严礼.羧甲基壳聚糖-分子信标-金纳米生物传感器检测鼠伤寒沙门氏菌[J].中国食物与营养.2019

[3].孙璇,白家磊,高志贤.基于分子信标方法对DNAzyme反应的优化与检测[J].食品安全质量检测学报.2019

[4].章波.基于分子信标杂交技术快速检测金黄色葡萄球菌方法的建立与应用[D].石河子大学.2019

[5].鲁子敬,熊威威,翟琨,向东山,谭志斗.基于双重猝灭分子信标及核酸染料Hoechst33258对单链核酸的双色定量检测[J].分析化学.2019

[6].李晓双.银纳米簇分子信标在荧光生物传感器方面的应用研究[D].吉林化工学院.2019

[7].谭效贝.荧光修饰双链DNA偶联单链DNA的叁螺旋分子信标检测转Bt基因[D].山东农业大学.2019

[8].黄晨,李婉明.核酸适配体分子信标探针在肿瘤研究中的应用进展[J].癌症进展.2019

[9].周文玉,肖聃.基于脱碱基位点的免标记分子信标设计[J].化工管理.2018

[10].余传星,张焕,黄明翔,赵自云,朱玲.快速鉴定结核杆菌的双重分子信标检测体系的优化[J].国际检验医学杂志.2018

论文知识图

分子信标茎状结构对分子信标不同浓度比例的不对称扩增对分子信分子信标检测原理示意图(引自...分子信标工作原理结合到nNA双螺旋的小沟Fig...基于分子信标的DNA检测示意图...

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分子信标论文_张志庆,汪珊珊,张子辰,马杰,王秀凤
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