一株产胶原蛋白酶细菌的鉴定及产酶条件优化

论文摘要

采用形态学特征、生理生化特征结合16S rDNA对一株产胞外胶原蛋白酶的菌株AL-13进行鉴定。获得安全、高效、高产量的生产胶原蛋白酶工艺。以胶原蛋白酶活性为指标,采用单因素实验优化温度、p H、接种量等产酶培养条件后,利用单因素结合响应曲面法优化产酶培养基。结果表明,AL-13鉴定为侧孢短芽孢杆菌（Brevibacillus laterosporus）,最适产酶培养条件为:培养时间48 h、培养温度25℃、初始pH8.0、接种量6%（v/v）,最适产酶培养基为:葡萄糖8.14 g/L、牛肉膏11.63 g/L、氯化钙0.17 g/L、磷酸氢二钾2.08 g/L、氯化钠9.48 g/L,在该产酶条件下胶原蛋白酶活力预测值为154.89 U/m L,验证结果显示酶活为（153.06±3.73） U/m L,此结果与预测值接近,相对误差为0.04%。本实验成功优化了一株产胶原蛋白酶细菌的产酶条件,产酶条件优化后的酶活（153.06 U/m L）较优化前（16.14 U/m L）提高了9.5倍。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 菌株的形态特征观察、生理生化特征分析及16S r DNA基因序列分析
•     1.2.2 种子液制备、酶活测定
•       1.2.2. 1 种子液的制备
•       1.2.2. 2 酶活力的测定
•       1.2.2. 3 酪氨酸标准曲线的绘制
•     1.2.3 单因素实验确定培养条件
•     1.2.4 单因素实验确定培养基组份
•       1.2.4. 1 碳源及碳源浓度对产酶的影响
•       1.2.4. 2 氮源及氮源浓度对产酶的影响
•       1.2.4. 3 氯化钠浓度对产酶的影响
•       1.2.4. 4 金属离子及离子浓度对产酶的影响
•       1.2.4. 5 产酶促进剂及浓度对产酶的影响
•     1.2.5 响应曲面法优化培养基
•   1.3 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 菌株的生理生化特征测定及菌种鉴定
•   2.2 培养条件单因素实验结果
•     2.2.1 培养时间的确定
•     2.2.2 培养温度的确定
•     2.2.3 初始p H的确定
•     2.2.4 接种量的确定
•     2.2.5 最优培养条件下酶活
•   2.3 培养基单因素优化结果
•     2.3.1 最佳碳源及碳源浓度的确定
•     2.3.2 最佳氮源及氮源浓度的确定
•     2.3.3 氯化钠浓度的确定
•     2.3.4 金属离子及离子浓度的确定
•     2.3.5 产酶促进剂及浓度的确定
•   2.4 培养基响应面实验结果
•     2.4.1 Box-Behnken实验设计及结果
•     2.4.2 回归方程及参数分析
•     2.4.3 响应曲面及等高线分析
•     2.4.4 最佳产酶条件的确定及验证试验
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李茂琳,谭军,王红英,王迪,张宇,徐桐,钱斯日古楞

关键词: 菌种鉴定,胶原蛋白酶,侧孢短芽孢杆菌,响应面法,产酶条件

来源: 食品工业科技 2019年14期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 大连工业大学生物工程学院,内蒙古河套农牧业技术研究院

基金: 内蒙古自治区科技重大专项项目(222089)

分类号: TQ925.2

DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.14.020

页码: 118-126

总页数: 9

文件大小: 4580K

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