导读:本文包含了亚硝酸盐还原酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:亚硝酸盐,杆菌,芽孢,质子,基因,若尔盖,植物。
亚硝酸盐还原酶论文文献综述
吴长力,陈颖琪,陈桂柳,林梦哲,张宏梅[1]（2019）在《泡菜中植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶的克隆表达》一文中研究指出目的:对植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因(nirS)进行克隆及表达,检测重组酶表达情况及其酶活力。方法:以分离自传统泡菜植物乳杆菌的基因组DNA为模版进行PCR扩增nirS;重组构建TA克隆质粒pMD 19-T-nirS,并转化到大肠杆菌DH5a中保存;通过双酶切消化将nirS基因连接到pET-32a(+)上,获得重组表达质粒pET-32a(+)-nirS,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达;重组酶经纯化后进行SDS-PAGE电泳检测其表达情况;重组酶经复性后检测其酶活力。结果:扩增得到nirS基因并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,所得重组酶以包涵体形式存在,酶活力为2131.5U/mg。结论:采用基因工程技术获得亚硝酸盐还原酶具有一定的应用前景。(本文来源于《中国调味品》期刊2019年09期）
张庆芳,李美玉,王晓辉,胡善松,于爽[2]（2019）在《微生物亚硝酸盐还原酶的研究进展》一文中研究指出亚硝酸盐还原酶(Nitrite reductase,简称NiR,EC1.7.2.1)是催化亚硝酸盐(Nitrite,简称NIT)还原的一类酶,可降解NIT为NO或NH_3,是自然界氮循环过程的关键酶。本文详细阐述亚硝酸盐还原酶的分类、结构特点、催化机制以及现阶段的应用领域,为深入研究亚硝酸还原酶提供参考。(本文来源于《微生物学通报》期刊2019年11期）
张庆芳,李美玉,王晓辉,胡善松,于爽[3]（2019）在《植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因在大肠杆菌中重组表达、纯化及酶学性质分析》一文中研究指出构建植物乳杆菌(Lactobacillus sp.LMY-20)中亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,NiR)的重组大肠杆菌、纯化重组蛋白并对其进行酶学性质分析。将人工合成的密码子优化的亚硝酸盐还原酶基因(nir)亚克隆至载体pET28a(+),构建重组表达载体p ET28a(+)-nir并转化到E.coli BL21(DE3)中实现表达。包涵体复性,利用镍柱亲和层析纯化重组亚硝酸盐还原酶。成功构建产亚硝酸盐还原酶的重组大肠杆菌并纯化了重组亚硝酸盐还原酶,纯化后经变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析在45 k Da附近出现明显条带。Na_2S_2O_4-MV法测得酶活为2 332.72 U/L,最适pH值为6.5,最适作用温度为37℃,在4～70℃下孵育40 min后可保持超过85%的活力。该研究实现植物乳杆菌来源的NiR在大肠杆菌中的重组表达、纯化及其酶学性质分析,重组NiR具有较好的温度适应性和稳定性,为其在农业、食品及医药等领域应用奠定基础。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年12期）
王越,李秋芬,张艳[4]（2019）在《嗜碱盐单胞菌X3中异化型硝酸盐还原酶编码基因簇的功能验证及蛋白结构预测》一文中研究指出细菌的氮代谢推动环境的氮循环,硝酸盐还原反应是氮代谢途径中重要步骤之一。本文运用酶活测定、qRTPCR和生物信息学软件分析的方法,对嗜碱盐单胞菌(Halomonas alkaliphila)X3中编码细菌异化型硝酸盐还原酶(Dissimilatory nitrate reductase,Nar)不同亚基的基因簇narGYJV进行了功能验证、蛋白结构预测和系统发育分析。研究表明,X3菌株中存在narGYJV基因簇并具有表达活性,测得Nar的酶活为每克蛋白21.415U;预测到的narGYJV编码蛋白功能区域中1～1246氨基酸属于NarG超家族,编码Nar的α亚基;1261～1752氨基酸属于DMSOR-beta-like超家族,编码Nar的β亚基;2061～2279氨基酸编码γ亚基,1802～2018氨基酸编码δ亚基;Nar的二级结构中无规卷曲占37.59%,α螺旋占34.43%,延伸链占18.33%;NarG、NarY和NarV的3D结构与PDB中大肠杆菌(Escherichia coli)的1Q16 3D结构最接近,覆盖率96%～100%。系统发育树显示,菌株X3中NarG与同属菌的遗传距离较近,在不同菌属间虽然功能相似,其同源性较低;NarY与大肠杆菌中的氨基酸序列的同源关系较近,说明异化型硝酸盐还原酶Nar中不同亚基的系统发育地位不同。研究结果表明,Halomonas alkaliphila X3菌株中存在编码Nar的基因簇narGYJV,编码蛋白具有独特的3D结构,不同亚基的系统发育地位不同。研究结果为进一步研究该菌的氮代谢通路选择和调控机制提供了依据。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
陈思敏[5]（2018）在《蜡样芽孢杆菌LJ01中亚硝酸盐还原酶的基因克隆、表达纯化及酶学性质研究》一文中研究指出亚硝酸盐是一种潜在的致癌物质,会对人体造成急性和慢性危害,因此严格控制食品中亚硝酸盐的含量非常必要。本课题组在前期研究中从豆瓣酱中筛选并鉴定出一株能高效降解亚硝酸盐的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)LJ01,本研究获得了该菌株中编码亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,NiR)的全长基因序列后,对其进行生物信息学分析,还构建基因工程菌和探究了重组NiR的酶学部分性质,具体为:B.cereus LJ01中编码NiR的基因(nir)由1623个碱基对组成,在GenBank数据库的登录号为MG839504。生物信息学分析工具分析显示,该NiR蛋白是由540个氨基酸残基数组成,分子量约为60 ku,等电点pI为5.47;是一种以α-螺旋和无规则卷曲为主,不存在信号肽和跨膜结构的亲水性蛋白,且可能属于Fd-NiR中的NiRA。将B.cereus LJ01中nir基因被克隆至不同的表达载体上,分别构建了重组菌pET-28a(+)-nir-BL21和pET-32a(+)-nir-BL21。对于同一重组菌,在诱导温度为16℃时NiR表达量最高,25℃时次之,35℃时最少;在同一诱导温度下,NiR在pET-28a(+)-nir-BL21中的表达水平明显优于在pET-32a(+)-nir-BL21中的;因此选择pET-28a(+)-nir-BL21作为基因工程菌来开展后续的研究工作。从培养基成分对工程菌pET-28a(+)-nir-BL21的生物量形成进行初步优化,获得了最佳培养基成分条件为:以液体LB培养基为基础培养基,再添加葡萄糖5 g·L~(-1)和细菌学蛋白胨15 g·L~(-1)。最后,确定最佳诱导条件为:IPTG浓度0.2 mM、诱导温度13℃、诱导时间20 h,在此条件下NiR的可溶性蛋白表达量最优。粗酶液经Ni-NTA柱亲和层析进行初步纯化,依次用25 mM、50 mM、75 mM、250mM和500 mM咪唑缓冲液洗脱,确定用250 mM咪唑的洗脱组分中重组NiR含量最高,75 mM的次之,500 mM咪唑的洗脱组分几乎不含蛋白;对于同一洗脱组分,在加入细胞色素C后,酶比活力变化不大,说明重组NiR自身具有降解NaNO_2的能力,反应过程中不需要添加细胞色素C。NiR最适反应温度为35℃,最适反应pH值为7.5,动力学常数K_m值为1.38 mM。金属离子对酶活影响表明:当离子浓度为1 mM时,金属离子对NiR活力的激活作用大小分别为:Cu~(2+)>Al~(3+)>Fe~(3+)>Mn~(2+)>K~+>Mg~(2+),而抑制作用大小分别为:Hg~(2+)>Ba~(2+)>Pb~(2+)>Ca~(2+)>Fe~(2+)>Zn~(2+);当离子浓度提高到10 mM时,Fe~(3+)的促进作用最为明显,其次是Cu~(2+)、Fe~(2+)、Al~(3+)、Mn~(2+),其他金属离子均表现出明显的抑制作用,其中Hg~(2+)的抑制作用最强;重组NiR经镍柱亲和层析、阴离子交换层析及凝胶过滤层析纯化后,获得了高纯度的状态均一且稳定的重组NiR,并进行了NiR结晶条件的筛选,目前尚未获得NiR蛋白的单晶体。(本文来源于《华南理工大学》期刊2018-04-18）
陈思敏,罗彤晖,费永涛,吴健锋,刘冬梅[6]（2018）在《蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus LJ01中亚硝酸盐还原酶的基因克隆、表达和纯化》一文中研究指出利用克隆表达技术,对一种蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus LJ01的亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,Ni R)基因进行克隆、原核表达,利用Ni柱亲和层析和DEAE Sepharose Fast Flow交换层析对表达的重组NiR进行纯化,分析重组酶的性质。研究结果显示,该NiR含有一个1 623 bp的开放阅读框,编码540 个氨基酸序列,重组NiR的分子质量约为67 ku;该酶中同时存在铁离子和铜离子,且含量分别为51.0 mg/kg和184.5 mg/kg;圆二色谱结果显示α-螺旋结构在重组NiR中所占比例最大。(本文来源于《食品科学》期刊2018年06期）
凌洁玉,陈旭,陈思羽,金翩翩[7]（2017）在《植物乳杆菌降解亚硝酸盐及其亚硝酸盐还原酶的研究》一文中研究指出对一株分离自泡菜的植物乳杆菌进行了亚硝酸盐降解的相关研究。首先研究了培养条件对植物乳杆菌降解亚硝酸盐的影响,结果表明:该菌降解亚硝酸盐的最适培养温度为30℃,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母抽提物,而在MRS培养基中降解亚硝酸盐能力最强。随后对该菌的亚硝酸盐还原酶进行了提取纯化和酶学性质研究,结果表明:该植物乳杆菌的亚硝酸盐还原酶可能为细胞色素cdI型,分子量大小约为123.2kDa;其最适反应温度为35℃,最适pH值为6.5,Km值为30.0mmol/L;Cu~(2+)和Mn~(2+)为该酶的激活剂,而Zn~(2+),K~+,EDTA为该酶的抑制剂。(本文来源于《中国调味品》期刊2017年07期）
秦鑫,陈效华[8]（2017）在《亚硝酸盐还原酶催化反应中的多质子耦合电子转移机理的研究》一文中研究指出亚硝酸盐还原酶(NiRs)催化还原亚硝酸根离子为一氧化氮的反应是生物脱氮必经的一步,其中涉及一个电子、两个质子的转移。含铜亚硝酸盐还原酶(CuNiRs)中反应活性位点T2Cu周围的Asp222和His365在酶催化反应中起到重要作用。我们运用DFT方法对含铜亚硝酸盐还原酶催化还原亚硝酸根离子的反应机理进行研究。结果显示该催化反应可能存在两种反应路径。第一种反应路径为当T1Cu的配体Cys260的S未质子化时,亚硝酸根离子与氧化态T2Cu结合后,Asp222的质子化促进电子从T1Cu转移到T2Cu将其还原。随后,质子通过一种叁质子同向协同传递机理从His365依次经过中间水分子、Asp222传递到亚硝酸根离子。再次质子化的His365通过中间水分子传递第二个质子到亚硝酸中间体促使NO脱离。第二种反应路径为当T1Cu的配体Cys260的S质子化时,Asp222的质子化及叁质子同向协同传递过程均未引起双铜间的电子转移。直到His365再次质子化后,T1Cu才转移电子到T2Cu。随后,质子/电子雇佣一种双质子同向协同耦合自旋交换电子转移机理来完成催化反应,促使NO脱离。(本文来源于《第十叁届全国量子化学会议论文集——第四分会：生命、药物和材料量子化学》期刊2017-06-08）
王蓥燕,卢圣鄂,陈小敏,李跃飞,辜运富[9]（2017）在《若尔盖高原湿地泥炭沼泽土亚硝酸盐还原酶(nirK)反硝化细菌群落结构分析》一文中研究指出若尔盖泥炭湿地是世界少有的低纬度永久冻土湿地,具有高海拔、高紫外辐射、高有机质的特点。该区域N2O的排放量对全球气候变暖有重要影响。对若尔盖高原湿地泥炭沼泽土中的亚硝酸盐还原酶(nir K)反硝化细菌群落结构多样性进行分析,以期揭示该区域N2O释放的微生物调控机制。基于若尔盖高原湿地泥炭沼泽土的理化性质和反硝化活性(PDA),结合限制性酶切片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)技术、克隆文库及分子测序对该生态系统中的nir K反硝化细菌群落结构及多样性进行分析。反硝化活性测定结果显示:阿西地区>麦溪地区>分区地区,反硝化活性与土壤有机碳、总氮和丰富度呈显着正相关(P<0.05)。Shannon-wiener多样性指数以阿西最高、分区最低。3个样品中共测序15条nir K基因代表序列,系统发育表明若尔盖高原湿地优势nir K反硝化菌群为变形门菌群。其中,阿西地区主要为α-变形菌门,麦溪地区主要为β-变形菌门,分区地区无法确定优势种群。冗余分析(Redundancy analysis,RDA)显示:有效钾和有效磷是影响nir K反硝化细菌群落结构的关键环境因子。本论文显示,若尔盖高原湿地存在着明显的反硝化作用,调控这些反硝化作用的nir K反硝化细菌多样性较高,且与土壤有效钾和有效磷密切相关。(本文来源于《生态学报》期刊2017年19期）
辛玉峰,曲晓华[10]（2017）在《过表达亚硝酸盐还原酶的重组大肠杆菌辅助污水短程硝化》一文中研究指出【目的】为了体现并突出亚硝酸盐还原酶在污水脱氮以及短程硝化中的重要性,对过表达亚硝酸盐还原酶的大肠杆菌进行了污水脱氮的研究。【方法】通过转化带有亚硝酸盐还原酶基因的重组质粒,将亚硝酸盐还原酶在大肠杆菌中过表达,通过分析重组大肠杆菌的产物研究了该酶的表达及还原亚硝酸盐的情况,通过将该重组菌与已报道的硝化-反硝化细菌或生活污水进行混合培养,研究重组菌用于辅助氨氮去除的短程硝化能力。【结果】重组大肠杆菌能正确表达亚硝酸盐还原酶,OD600=2.0的菌悬液在2 h内还原约1 mmol/L的亚硝酸盐,并产生几乎等量的一氧化氮;重组大肠杆菌与Acinetobacter sp.YF14菌株等比例混合时,12 h能够提高氨氮脱氮效率约(36.0±7.4)%,且在4 h时,最大亚硝酸盐的积累量减少37%;重组大肠杆菌(OD600=1.0)12 h内能够提高污水厂活性污泥的脱氮效率约(31.0±5.7)%,且未检测到亚硝酸盐和硝酸盐的积累;溶氧水平对于亚硝酸盐还原酶重组菌辅助脱氮具有明显的影响,中等溶氧量[(6.4?0.7)mg/L]时脱氮效果最好。【结论】过表达亚硝酸盐还原酶的大肠杆菌可以提高污水脱氮的短程硝化能力。(本文来源于《微生物学报》期刊2017年12期）
亚硝酸盐还原酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
亚硝酸盐还原酶(Nitrite reductase,简称NiR,EC1.7.2.1)是催化亚硝酸盐(Nitrite,简称NIT)还原的一类酶,可降解NIT为NO或NH_3,是自然界氮循环过程的关键酶。本文详细阐述亚硝酸盐还原酶的分类、结构特点、催化机制以及现阶段的应用领域,为深入研究亚硝酸还原酶提供参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
亚硝酸盐还原酶论文参考文献
[1].吴长力,陈颖琪,陈桂柳,林梦哲,张宏梅.泡菜中植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶的克隆表达[J].中国调味品.2019
[2].张庆芳,李美玉,王晓辉,胡善松,于爽.微生物亚硝酸盐还原酶的研究进展[J].微生物学通报.2019
[3].张庆芳,李美玉,王晓辉,胡善松,于爽.植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因在大肠杆菌中重组表达、纯化及酶学性质分析[J].食品与发酵工业.2019
[4].王越,李秋芬,张艳.嗜碱盐单胞菌X3中异化型硝酸盐还原酶编码基因簇的功能验证及蛋白结构预测[J].中国海洋大学学报(自然科学版).2019
[5].陈思敏.蜡样芽孢杆菌LJ01中亚硝酸盐还原酶的基因克隆、表达纯化及酶学性质研究[D].华南理工大学.2018
[6].陈思敏,罗彤晖,费永涛,吴健锋,刘冬梅.蜡样芽孢杆菌BacilluscereusLJ01中亚硝酸盐还原酶的基因克隆、表达和纯化[J].食品科学.2018
[7].凌洁玉,陈旭,陈思羽,金翩翩.植物乳杆菌降解亚硝酸盐及其亚硝酸盐还原酶的研究[J].中国调味品.2017
[8].秦鑫,陈效华.亚硝酸盐还原酶催化反应中的多质子耦合电子转移机理的研究[C].第十叁届全国量子化学会议论文集——第四分会：生命、药物和材料量子化学.2017
[9].王蓥燕,卢圣鄂,陈小敏,李跃飞,辜运富.若尔盖高原湿地泥炭沼泽土亚硝酸盐还原酶(nirK)反硝化细菌群落结构分析[J].生态学报.2017
[10].辛玉峰,曲晓华.过表达亚硝酸盐还原酶的重组大肠杆菌辅助污水短程硝化[J].微生物学报.2017
论文知识图
