猪传染性胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定及floR基因检测

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定及floR基因检测

论文摘要

为探究猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)临床分离株对氟苯尼考(FFC)的耐药性及floR基因的流行与分布情况,收集河南、湖北、江西、陕西、湖南、山西、安徽等7个省份合作猪场送检的病死猪肺脏、脾脏、支气管黏液等206份病料样本,从中分离APP并鉴定,采用微量肉汤稀释法测定分离菌株对FFC的敏感性,PCR及测序方法检测floR基因,并用随机引物PCR(AP-PCR)方法分析临床分离菌株之间的同源性。结果表明,成功分离鉴定了APP 28株,分离率为13.59%。4株APP对FFC耐药,耐药率为14.29%;15株携带floR基因,floR检出率为53.57%,高于APP对FFC的耐药率;有11株分离菌floR阳性但对FFC并不耐药。分析RAPD系统树状图发现,28株APP被分为几乎无核苷酸同源性的A和B 2大类、25种RAPD型,其中A类25株,分22种RAPD型,14株携带floR基因,这些菌株间的核苷酸同源性为40%~80%;B类3株,分3种RAPD型,1株携带floR基因。本研究提示APP的floR基因主要以水平方式传播。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 病料的采集
  •     1.1.2 标准菌株
  •     1.1.3 培养基及相关试剂
  •     1.1.4 引物设计与合成
  •     1.1.5 药物
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 病原菌分离与镜检
  •     1.2.2 分离菌株的生化试验鉴定
  •     1.2.3 分离菌株的PCR鉴定
  •     1.2.4 药物储备液配制
  •     1.2.5 药敏试验
  •     1.2.6 细菌基因组DNA的制备
  •     1.2.7 floR基因检测
  •     1.2.8 随机引物PCR(AP-PCR)
  • 2 结果与分析
  •   2.1 细菌的分离鉴定
  •     2.1.1 分离菌株的培养特性
  •     2.1.2 分离菌株的生化试验鉴定结果
  •     2.1.3 分离菌株的PCR鉴定结果
  •   2.2 药敏试验结果
  •   2.3 floR基因检测结果
  •   2.4 随机扩增多态性DNA(RAPD)
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 罗行炜,孙华润,魏单单,朱莹莹,徐引弟,贺丹丹,刘建华,潘玉善,吴华,苑丽,胡功政

    关键词: 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,耐药性,基因,随机扩增多态性

    来源: 江苏农业科学 2019年21期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 河南农业大学牧医工程学院,河南省农业科学院畜牧兽医研究所

    基金: 国家重点研发计划(编号:2016YFD0501304)

    分类号: S852.61

    DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.21.055

    页码: 228-232

    总页数: 5

    文件大小: 1031K

    下载量: 130

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