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【摘要】目的:观察人脐带充质干细胞移植对白鼠烧伤皮肤治疗作用,并且研究充质干细胞移植修复烧伤皮肤的机制方法:分离纯化干净人脐带充质干细胞,并且选用170~225的雄性白鼠进行随机分为烧伤后的人脐带充质干细胞观察组和烧伤后的的对照组,要对烧伤后的人脐带充质干细胞观察组以及烧伤后的的对照组进行观察,对两组白鼠烧伤后伤口愈合情况进行对比。结果:实验鼠骨髓培养组创面愈合率在各时间点均较PBS组显著增高(P<0.05)。HE染色显示实验鼠骨髓培养组创面愈合质量优于PBS组。结论:在烧伤后通常情况可以使用鼠骨髓培养移植治疗减少局部炎症反应同事还能尽可能减少淋巴细胞的侵入,可以有效的促进血管再生和纤维细胞的生长,血管再生和纤维细胞的生长又能损伤皮肤的修复。
【关键词】人脐带间充质干细胞移植;烧伤;机制
由火焰、高温固体和强辐射热引起的损伤称之为烧伤。烧伤是由高温、化学物质或电引起的组织损伤。皮肤是维持内环境稳定,一旦皮肤大面积烧伤,就会严重威胁了生命危险。在皮肤受大面积烧伤时自身机体会发生严重炎症,其中有多种因数造成,例如肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)和多种细胞因子参与的过程,这会影响烧伤病人病情的发展以及皮肤损伤修复情况[1]。本实验拟将实验鼠骨髓培养(UC-MSCs)移植于白鼠皮肤损伤创面模型并且观察其对皮肤创面修复和VEGF表达的影响,实验鼠骨髓培养(UC-MSCs)治疗皮肤创面提供重要理论依据。现将报告结果如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
首先选取26只14~16周的白鼠雌雄各半,建立鼠骨髓培养(UC-MSCs)模型,白鼠皮肤严重烧伤模型、鼠骨髓培养(UC)-MSCs的培养及鉴定及鼠骨髓培养(UC-MSCs)对创伤面的治疗参见文献。
1.2方法
TNF-α、IL-1和INF-γ检测皮肤组织裂解后采用ELISA法测定皮肤组织内干细胞因子的表达,并且使用ELISA法测定时还要注意试剂盒说明操作。然后检测趋势因子MCP-1和CCX-2,并且要用Westernblot检测VEGF蛋白酶抑制剂的组织裂解提取皮肤组织干细胞,利用改良的lowry测试蛋白质浓度,最后是以GAPDH为参数指标。用胶片给扫描仪扫描后讨论其程度。用MCP-1和CCX-2与GAPDH的程度进行有效对比,对其的比值为MCP-1和CCX-2的相对表达量。并且从复3次以上。
1.3统计学处理
SPSS19.0统计学软件处理数据,计量资料以(±s)表示,行t检验,计数资料以(%)表示,行2检验,检验标准以P<0.05为数据对比差异有统计学意义。
2结果
鼠骨髓培养(UC)-MSCs移植对皮肤严重烧伤后TNF-α、IL-1和INF-γ的严重的影响。用UC-MSCs治疗后两天TNF-α、IL-1有明显下降。详见表1.
3.讨论
间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是广泛存在于骨髓、脐带、脐血等组织的一类成体干细胞,具有强大的多向分化潜能。皮肤烧伤后机体会有严重的炎症反应[2~3],在这过程中有许多细胞因子参与反应。在烧伤后使用UC-MSCs治疗可以促进烧伤皮肤的恢复,并且减少局部炎症反应同事还能尽可能减少淋巴细胞的侵入,效的促进血管再生和纤维细胞的生长,血管再生和纤维细胞的生长又能损伤皮肤的恢复。在烧伤愈合期间,病人要消耗较多热量与营养。进食困难的人可以饮营养液或用鼻饲管管饲。严重烧伤需要很长时间才能愈合,有的甚至需要几年时间,因此,病人可能变得非常沮丧。大多数烧伤中心都通过社会工作者、精神科医生和其他人员给这类病人提供心理支最后UC-MSCs就现在来说已近是临床医学研究的热点话题之一。就烧伤临床治疗效果不太理想,UC-MSCs可能带来治疗烧伤新方法和革命。
间充质干细胞能够使伤口愈合的主要因素有两个。一个因素是间充质干细胞,可以分化变成表皮系列的细胞,其参与了伤口的愈和过程。另一个因素则是间充质干细胞分泌出来的生长因子,也是造成伤口的快速愈合为重要的原因。有文献指出,骨髓间充质干细胞的转化生长因子以及表皮生长因子和血管内皮生长因子等,能够对调整细胞表型造成影响,在伤口的改善方面也起着极为重要的作用。建从中干细胞,有着较低的免疫原性,免疫调节功能也极低,这对于异体甚至是异种移植是很合适的。在人体全身或者是局部,植入间充质干细胞,机体基本上未出现排斥反应,即使有出现移植排斥现象,其排斥程度也是极小的。这就说明了间充质干细胞对于修复烧伤皮肤有着很好的效果,值得在临床上推广使用。
参考文献:
[1]胡克苏,祁俊,蔡玉辉等.人脐带间充质干细胞移植修复烧伤皮肤的机制[J].江苏医药,2014,40(7):759-761.
[2]张文宇,巴特,刘玲英等.人脐带间充质干细胞研究进展及应用[J].中华损伤与修复杂志(电子版),2014,(2):203-205.
[3]胡克苏,张逸.人脐带间充质干细胞移植对皮肤烧伤修复的机制研究[C].//江苏省第十一次整形烧伤外科学术会议论文集.2014:81-82.