利用RNA干扰技术沉默基因表达在本科实验教学中的设计与实践

利用RNA干扰技术沉默基因表达在本科实验教学中的设计与实践

论文摘要

RNA干扰是由双链小RNA介导的基因沉默现象,已成为一个被广泛应用的反向遗传学研究技术。为了让学生更好地理解该技术,本实验教学让学生自己选择靶基因,设计小干扰RNA和引物,然后检测小干扰RNA介导的基因沉默效果。以2018年第五组为例,该组挑选了小鼠长链脂酰辅酶A合成酶1 (acyl-CoA synthetase long-chain family member 1, Acsl1)为靶基因,设计了两对特异性靶向Acsl1 mRNA的小干扰RNA,通过电穿孔的方式将其转染到3T3-L1中,然后提取细胞总RNA和合成cDNA,最后用相对定量PCR检测mRNA的表达量。结果显示两对小干扰RNA都有60%以上的沉默效果。近3年内,大约83%的学生都能独立完成所有实验并最终成功筛选到至少一对有效的小干扰RNA。该教学实践增强了学生对RNA干扰原理和实验的理解,锻炼了学生的实验与科研能力。

论文目录

  • 1 课程内容设计
  • 2 代表性结果
  • 3 实验教学总结
  • 4 教学效果
  •   4.1 增强了学生对序列和RNA干扰机制的理解
  •   4.2 通过项目型实验课程锻炼学生的动手能力和分析能力
  •   4.3 该实验教学的推广性分析
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 宋亚坤,张敏,王翘楚,彭玉荔,贾方兴,余春红

    关键词: 干扰,小干扰设计,实验课程,本科生教育

    来源: 遗传 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,社会科学Ⅱ辑

    专业: 生物学,高等教育

    单位: 南方科技大学生物系生命科学实验教学中心

    基金: 南方科技大学教学教改项目(编号:ZLGC201603,JG201604,SJZLGC201701)资助~~

    分类号: Q3-4;G642.423

    DOI: 10.16288/j.yczz.18-343

    页码: 653-661

    总页数: 9

    文件大小: 922K

    下载量: 342

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