模式植物狗尾草响应不同干旱及盐胁迫表达的内参基因actin及其应用

模式植物狗尾草响应不同干旱及盐胁迫表达的内参基因actin及其应用

论文摘要

为了研究应用于狗尾草响应不同干旱及盐胁迫基因表达的内参基因,本研究从网站https://phytozome.jgi.doe.gov/pz/portal.html上获得狗尾草A10品系8个actin基因的cDNA序列,设计荧光定量PCR引物,以不同程度的干旱及不同浓度盐胁迫处理的狗尾草幼苗cDNA做模板,进行荧光定量PCR试验,通过实时荧光定量PCR扩增片段电泳分析,扩增曲线及溶解曲线综合分析,结果表明登录号Sevir.9G114100对应的actin基因是8个actin基因中最合适的内标基因。并对所选内标的实用性进行了验证,验证的结果与转录组数据的结果保持一致,证明所选内标基因可用于后续狗尾草响应不同干旱及盐胁迫狗尾草转录组基因表达的验证工作,为深入研究狗尾草功能基因奠定分子基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 引物
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 对狗尾草幼苗进行干旱和盐胁迫处理
  •     1.3.2 干旱及盐胁迫处理的狗尾草株系总RNA的提取及cDNA的合成
  •     1.3.3 荧光定量PCR验证
  • 2 结果与分析
  •   2.1 狗尾草幼苗在干旱和盐胁迫处理下的生长情况
  •   2.2 肌动蛋白基因actin的PCR产物电泳检测与产物特异性、通用性验证
  •   2.3 狗尾草响应不同干旱及盐胁迫时RNA-seq筛选基因结果验证
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张丽丽,赵辉,郭静远,夏启玉,贺萍萍,霍姗姗,屈静,符冬妹,郭安平

    关键词: 狗尾草,基因,干旱胁迫,盐胁迫,荧光定量

    来源: 热带作物学报 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 农作物

    单位: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业农村部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室/海南省南繁生物安全与分子育种重点实验室

    基金: 海南省自然科学基金项目(No.318QN285),中央级公益性科研院所基本科研业务费专项-中国热带农业科学院院级创新团队项目(No.1630052017012),转基因生物新品种培育国家科技重大专项“转基因作物南繁区生态环境监测与防控研究”(No.2016ZX08012005-007)

    分类号: S544.3

    页码: 2418-2425

    总页数: 8

    文件大小: 2415K

    下载量: 265

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