不同代昆明小鼠胚胎成纤维细胞的生长特性研究

论文摘要

目的分离培养昆明小鼠成纤维细胞,研究其体外生长特性并用于胚胎干细胞培养。方法消化法分离培养获得昆明小鼠胚胎成纤维细胞,利用MTT法绘制各代细胞生长曲线,免疫荧光对各代细胞进行细胞骨架分析;用不同浓度丝裂霉素C(10μg/m L、20μg/m L和30μg/m L)分别处理MEFs 1、2、3 h,MTT法筛选饲养层制备的最佳条件,制备饲养层用于小鼠胚胎干细胞的培养。结果分离的小鼠胚胎成纤维细胞3～5代细胞增殖能力较好; 1～3代细胞微管微丝排列整齐,5代以后的细胞微管微丝排列紊乱; 10μg/m L丝裂霉素C处理2 h有利于小鼠胚胎干细胞的培养。结论体外分离培养的3～5代小鼠胚胎成纤维细胞可用于小鼠胚胎干细胞的培养。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 MEFs的分离和培养
•   1.3 MEFs细胞曲线测定
•   1.4 鼠胚胎成纤维细胞免疫荧光染色
•   1.5 制备鼠胚胎成纤维细胞饲养层
•   1.6 饲养层细胞的冻存
•   1.7 胚胎干细胞培养
• 2 结果
•   2.1 MEFs的分离和培养
•   2.2 MEFs生长曲线测定
•   2.3 MEFs细胞骨架免疫荧光
•   2.4 饲养层制备
•   2.5 胚胎干细胞培养
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 黄悦,严会文,王燕燕,苏敏

关键词: 小鼠胚胎成纤维细胞,细胞骨架,饲养层

来源: 局解手术学杂志 2019年07期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 贵阳护理职业学院解剖学教研室,贵州医科大学组织学与胚胎学教研室

基金: 贵州省科技厅基金[黔科合J字(2015)2011号],贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目[黔省专合字(2012)41号]

分类号: Q813.11

页码: 520-524

总页数: 5

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