舒娟1杨胜斌2王元辉1
（1贵州省铜仁市食品药品检验所554300；2贵州省铜仁市第一人民医院554300）
【摘要】目的泌淋清胶囊原标准是贵州和仁堂有限公司于2002年12月试行执行的。本文建立泌淋清胶囊中没食子酸的含量测定方法，完善了泌淋清胶囊的质量标准。方法取样品约0.2g，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，称定重量，超声处理20分钟（频率：40KHZ），取出，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液用0.45um的微孔滤膜滤过，用高效液相色谱法测定。结果用此方法测定所得的结果准确。平均加样回收率为98.44%，RSD=0.24%（n=6）。结论实验表明，本实验中所建立的没食子酸含量测定的方法准确有效，灵敏度高，重现性好。
【关键词】含量测定泌淋清胶囊没食子酸
【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）34-0021-02
泌淋清胶囊具清热解毒，利尿通淋的功能。临床用于湿热蕴结所致的小便不利，淋漓涩痛，尿血，急性非特异性尿路感染，前列腺炎见上述证候者。由四季红、黄柏、酢浆草、仙鹤草、白茅根、车前草六味药组成。泌淋清胶囊（标准号：WS-11063(ZD-1063)-2002），属贵州苗药改变剂型而得。
原标准中以黄柏碱有效成分盐酸小檗碱作为含测指标。由于四季红[1]在处方中为君药，以四季红中没食子酸为含量测定指标，能更有效地控制本品的质量。没食子酸是一种有机酸及酚类化合物，具有抗菌，抗病毒，抗肿瘤等药理作用[2]。为确保该产品的疗效及有效控制产品质量，本文采用高效液相色谱法对四季红中没食子酸建立了新的含量测定方法，该方法操作简单，精密度良好，结果准确可靠。
1.仪器与试药
岛津LC-20AD高效液相色谱仪，LC-20AD输液泵，CTO-10ASVP柱温箱，SIL-20A自动进样装置；SPD-M20A二极管阵列检测器；CBM-20A通讯集成器；LC-solution色谱工作站。Sartorius-CAP225D十万分之一天平，SHIMADZUAY-120万分之一天平。KQ-500E超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
甲醇（色谱纯、分析纯）、盐酸（分析纯）、水为娃哈哈纯净水；没食子酸对照品（中国药品生物制品检定所批号：110831-200302）。样品10个不同批次由贵州和仁堂有限公司提供，阴性对照由本所制成（阴性对照所用药材由贵州和仁堂有限公司提供）。
2.方法与结果
2.1对照品溶液的制备精密称取没食子酸对照品10.41mg，置50ml量瓶中，加50%甲醇稀释定容至刻度，作为没食子酸对照品储备液。见图1
2.2供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取0.2g，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，称定重量，超声处理20分钟（频率：40KHZ），取出，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液用0.45um的微孔滤膜。见图2
2.3色谱条件色谱柱：迪马C18（5μm，5.0mm×200mm），柱号：8023933；流动相：甲醇-0.2%磷酸（5.95），检测波长272nm。理论塔板数以没食子酸峰计算应不低于3000。流速：0.8ml/min；进样量：10μl。
2.4线性关系考察分别精密吸取没食子酸对照品储备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml于10ml容量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，各进样10?l，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积值为横坐标，没食子酸浓度为纵坐标绘制标准曲线，计算的回归方程Y=3×107X-5537.9，相关系数R2=0.9999，表明没食子酸在0.1041～0.01041mg/ml范围内具有良好线性关系。
图1对照品色谱图图2样品色谱图图3阴性对照色谱图
2.5精密度试验精密吸取没食子酸（中国药品生物制品检定所批号：110831-200302）对照品溶液（0.04064mg/ml）10ul重复进样6次，RSD为1.78%，表明仪器精密度良好。
2.6稳定性试验取泌淋清样品（20110511）照正文测定方法制备供试品溶液，在室温下分别放置0，1，2，4，6，8，10，12h，分别精密吸取该溶液10?l，测得没食子酸峰面积RSD为1.47%，表明该样品在12小时内具有很好的稳定性。
2.7重复性试验取泌淋清样品（20110511），按上述样品测定法进行含量测定，平行6份，样品测定结果的RSD为1.90%，表明本法的重现性良好。
2.8回收率试验采用加样回收法，取已知含量的泌淋清样品（批号20110511，含量为0.88mg/0.40735g）样品，分别精密称取约宁泌泰胶囊样品6份，精密加入对照品溶液（0.2082mg/ml）1.0ml/份，按上述色谱条件测定，平均回收率为98.44%，RSD为0.24%（n=6），结果表明本法有良好的回收率。见表1
表1回收率实验结果
3.讨论
本课题研究时曾试用过2种流动相，本文所述流动相能更好的分离没食子酸，且易于配制。泌淋清胶囊处方及工艺较简单，阴性样品在没食子酸吸收峰位置处无干扰峰，此方法重现性良好，结果准确度高，作为有效控制本药品质量及提高该药品的质量检测水平具有可行性。
参考文献
[1]贵州省药品监督管理局.贵州省中药材，民族药材质量标准（2003）年版.贵阳：贵州科技出版社，2003:147
[2]王祥培.万德光，等HPLC测定不同产地的头花蓼中没食子酸的含量[J].华西医药杂志2007，22（2）：204～205
[3]茅向军.谢乾丽.熊慧林，等.高效液相色谱法测定热淋清胶囊中没食子酸的含量[J].中国中药杂志，2002，27（8）：589～591
[4]何顺志.吴红敏，等。高效液相色谱法测定头花蓼中没食子酸与槲皮苷的含量[J].时珍国药，2009，20（1）：18～19
基金项目：国家药典委员会2011-2012年度药品标准提高研究课题（中药）（项目编号：535号）