导读:本文包含了器官培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:器官,细胞,干细胞,酵母,体外,诱导,唾液腺。
器官培养论文文献综述
于紫月[1]（2019）在《实现类器官“组团”培养 诱导多能干细胞太“能”了》一文中研究指出日本东京医科齿科大学近日宣布，该校研究人员与美国同行合作，利用人诱导多能干细胞同时培育出了肝脏、胆管和胰脏3种迷你器官。古往今来，长生不老是无数人的梦想。如今，正有一群科学家奋战在延长人类寿命、改善健康质量的第一线上。近期，器官培育研究迎(本文来源于《科技日报》期刊2019-11-13）
马红娟,刘婷姣[2]（2019）在《多种精密组织切片共培养平台的构建及其在唾液腺腺样囊性癌多器官转移中的应用》一文中研究指出目的:构建肺、肝、脾、肾多种精密组织切片培养的微流控芯片平台。利用芯片平台研究唾液腺腺样囊性癌(简称SACC)相对高转移SACC-LM和相对低转移SACC-83两种细胞系的细胞外囊泡对大鼠多种组织的影响。材料方法:精密组织切片(简称PTS)培养方法,是在活体状态下迅速取出组织,用徕卡活组织震动切片机将组织切成200微米的薄片,从而开展各项实验,目前,PTS培养技术已广泛应用于药理学、毒理学、病理学、生理学等多领域。微流控芯片技术有微型化、集成化、自动化、快速分析、低消耗等优势。结果:针对大鼠的肺、肝、脾、肾精密组织切片进行石蜡切片HE染色观察组织结构形态,Rh-123、Hoechest 33342和PI联合染色观察组织内细胞活性,经过0小时组和6小时组对比观察发现培养6小时组的肺、肝、脾、肾组织无明显解离,形态结构完整;并且保持良好的细胞活性;观察芯片模型内SACC-LM、SACC-83对肺、肝、脾、肾组织的黏附情况,发现不同细胞系来源的细胞对不同的组织的趋向性明显不同。结论:基于微流控芯片的精密组织切片培养技术可以在一定程度上保持组织的形态结构、组织活性及器官功能;唾液腺腺样囊性癌细胞对肺、肝、脾、肾组织趋向性明显不同。(本文来源于《2019年中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第十叁次全国口腔病理学术会议论文汇编》期刊2019-10-18）
胡影,曹云芳,樊琼,王灏琦[3]（2019）在《酵母培养物对鹌鹑生长性能、免疫器官指数及肠道菌群的影响》一文中研究指出为了研究酵母培养物对鹌鹑生长性能、免疫功能和肠道菌群的影响。试验选取720羽1日龄健康朝鲜龙城鹌鹑,随机分为对照组、试验Ⅰ组(基础日粮+0.1%酵母培养物)、试验Ⅱ组(基础日粮+0.15%酵母培养物)和试验Ⅲ组(基础日粮+0.2%酵母培养物)4个处理组,每组6个重复,每个重复30羽鸡,试验期42天。结果表明:试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组均能显着提高鹌鹑1～21天、22～42天和1～42天的平均日增重,降低料重比。显着提高21天和42天鹌鹑法氏囊指数和42天鹌鹑胸腺指数、脾脏指数。试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组均能显着降低21天鹌鹑盲肠中大肠杆菌、沙门氏菌数量,试验Ⅱ组和Ⅲ组能显着增加乳酸杆菌数量,且试验Ⅰ组和Ⅲ组组间差异亦显着;试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组均能显着降低42天鹌鹑盲肠中大肠杆菌、沙门氏菌数量,显着提高乳酸杆菌数量,试验Ⅰ组和Ⅲ组组间差异均显着。说明酵母培养物提高鹌鹑的生产性能和免疫功能,改善肠道的菌群结构。适宜添加量为0.15%。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年24期）
张鑫,张春容[4]（2019）在《培养学生以器官系统为中心的临床思维能力》一文中研究指出通过理论讲解、病案示教和以学生为主导的教学查房,培养学生以器官系统为中心的临床思维解决问诊、体格检查、选择辅助检查项目和病案分析,有助于提高学生的临床实践能力、自学能力和创新能力。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2019年13期）
赵熙熙[5]（2019）在《用动物培养人体器官初获进展》一文中研究指出本报讯 由于人类器官的长期短缺，研究人员把目光转向农场里的动物。几家生物技术公司正在对猪进行基因工程改造，旨在使它们的器官与人体更加相容。然而一些科学家正在寻求一种完全不同的解决方案--在猪、羊或其他动物身上培育完整的人体器官，然后再收获这些器官用于移植(本文来源于《中国科学报》期刊2019-07-11）
陈晓明,韦璐阳,蔡玲,梁文汇,贺佳君[6]（2019）在《核桃茎段器官离体再生培养》一文中研究指出以核桃(Juglans regia)茎段为外植体,对核桃茎段器官离体再生培养技术进行研究。结果表明:4—5月采集的核桃茎段,通过系列表面消毒后,0.1%升汞灭菌10 min,效果最佳。在附加1.0 mg/L 6-BA的DKW诱导培养基中,萌芽率为60%以上。通过SH+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA进行增殖培养,芽增值系数为4.32。以1/2 SH+8.0 mg/L IBA进行不定根诱导,生根率为63.18%,根数2～3条。(本文来源于《广西林业科学》期刊2019年02期）
袁波[7]（2019）在《胆囊良恶性肿瘤类器官培养体系的建立及鉴定》一文中研究指出第一部分胆囊良恶性肿瘤类器官培养体系的建立及鉴定研究背景及目的:胆囊癌(gallbladder cancer,GBC)是最常见的胆道恶性肿瘤,约占胆道癌的80%~90%。在消化系统常见恶性肿瘤中,胆囊癌占第六位。胆囊癌的发病率在不同地区存在差异,亚洲发病率较高,所以胆囊癌的防治在我国具有十分现实的意义。由于症状和体征均呈现非特异性,胆囊癌常在胆囊切除术后才明确诊断或长期误诊为良性胆囊疾病而未获得及时诊治,多数情况下发现时已处于中晚期。此外,由于靠近胆囊床的肝脏侧无浆膜包绕,胆囊癌易出现肝脏浸润及转移,且极易沿肝十二指肠韧带淋巴结转移,胆囊癌患者预后极差。据统计,胆囊癌患者的平均总生存期为6个月,而5年生存率仅为5%[1]。手术是目前可能治愈原发性胆囊癌的唯一手段[2]。但由于往往发现过晚,已出现转移,手术切除率低,而其他综合性治疗如化疗等,效果不肯定[3]。肿瘤分子靶向治疗代表着更有效、更有针对性的药物治疗的方向。现在多种分子靶向药物已广泛用于肿瘤治疗,并在部分肿瘤患者体内取得了显着的疗效。但由于可供使用的细胞模型和动物模型非常缺乏,针对胆囊癌的药物研发和筛选研究进展缓慢。因此寻找新的胆囊癌实验模型,已成为比较迫切的现实需求。类器官(Organoid)是一种叁维细胞培养体系,其与原代来源的器官相似度极高,是疾病机理研究和药物筛选的理想平台,也是极重要的前沿研究领域。肿瘤类器官是利用肿瘤患者细胞直接在体外构建成的叁维肿瘤。近几年,肿瘤类器官迅猛发展,为肿瘤治疗带来了新的曙光。目前已经成功从原发结肠癌、前列腺癌、胰腺癌获得类器官。将这些肿瘤类器官模型与个人化肿瘤基因组信息相关联将极大的加速肿瘤恶性演化、肿瘤研究药物敏感性等研究的进程[4]。目前,针对消化道肿瘤的类器官研究虽有少量报道,但仍存在肿瘤类器官例数少、稳定性差和不具有中国人群遗传特征等方面的问题。迄今为止,尚未有胆囊良恶性肿瘤类器官培养的相关报道。我们尝试利用胆囊良恶性肿瘤患者手术切除新鲜标本,构建胆囊良恶性肿瘤类器官的培养体系,并针对类器官进行形态、肿瘤标志物及基因组方面的鉴定,以期为进一步深入研究胆囊良恶性肿瘤的分子生物学机制,特别是由瘤至癌的演变,以及临床精准治疗,提供一个新的平台。研究方法:1、于2017年12月至2018年12月共纳入东方肝胆外科医院收治的胆囊腺瘤及胆囊癌患者共46例,收集患者手术切除的新鲜肿瘤组织,分成叁部分以完成类器官培养、冰冻组织供转录组测序以及病理石蜡切片作形态学鉴定。收集患者外周血以提取白细胞,供全基因组测序。2、肿瘤类器官培养主要步骤:新鲜标本充分洗涤、剪碎后,加入特定消化液,于37℃孵育消化30分钟至3小时,每2000-5000个细胞用DMEM/F12培养基25μl重悬,加入液态Matrigel,混匀后于37℃聚合,加入合适培养基,放入37℃无菌培养箱培养。传代:按1:2或1:3进行。冻存:先用细胞修复液融解Matrigel,再加入无血清细胞冻存液。复苏:从低温中取出冻存细胞快速溶解,再用Matrigel重新包被聚合,加入合适培养基培养。3、培养成功后,进行鉴定。(1)形态学鉴定:将类器官细胞予包埋、石蜡切片。显微镜下观察形态并与普通病理组织对比。(2)免疫荧光染色检测肿瘤标志物:类器官细胞免疫荧光染色后,激光共聚焦显微镜拍照。主要标志物有胆系标志物CK7;干性标志物CD133;胆囊癌常见肿瘤标志物Erb B2,C-myc等。(3)类器官行转录组及全基因组测序。研究结果:1、总共收集46例手术标本,其中5例胆囊腺瘤,41例胆囊恶性肿瘤,包括38例胆囊腺癌,而胆囊鳞癌、胆囊淋巴瘤及胆囊腺癌-神经内分泌混合癌各1例。培养成功标准为细胞数量>1*106或可传代6代以上[5]。2、组织消化所需要消化液及消化时间的选择:消化液的组成为Collagenase II(1mg/ml)+Dispase II(0.3mg/ml)+DNAse I(100ug/ml)。消化时间:胆囊腺瘤消化时间控制在0.5小时-1小时。胆囊腺癌分两种情况,如为腺瘤癌变所致,消化时间可1小时-2小时,而其他类型腺癌则含多量纤维组织,消化时间可适当延长,但不宜超过7小时,否则容易组织坏死。3、在正式选取胆囊腺瘤及胆囊癌行类器官培养之前,我们尝试用正常胆囊上皮进行类器官培养,以优化培养体系和培养流程。确定了包括DMEM/F12培养基、Glutamax、Hepes缓冲液、N-acetylcysteine、nicotinamide、B27、N2、叁抗及Primocin为基本构成的培养基组分;良性肿瘤(腺瘤)类器官培养时,添加:Wnt3a、EGF、FGF10、Noggin、R-spondin-1、Gastrin、A8301、Foskolin、Dexamethasone等。恶性肿瘤(腺癌)类器官培养为全培养基去除Wnt3a、R-spondin-1等。4、胆囊腺瘤培养成功率60%(3/5)。2例送检后续类器官转录组及全基因组测序。培养基组分与正常胆囊上皮类器官相同。第1次传代为培养第7-10天,此后每10-15天传代1次,按1:2或1:3传代。镜下见胆囊腺瘤类器官为大小不一的3D椭圆形或类圆形结构,形态较为规则。5、胆囊恶性肿瘤培养成功率14.6%(6/41),另3例其他类型恶性肿瘤未能培养成功。3例腺癌类器官送检后续类器官转录组及全基因组测序。第1次传代为培养第7-23天,平均第15天,此后每10-20天传代1次,按1:2或1:3传代。镜下大体所见胆囊腺癌类器官为大小及形态均极度不规则细胞团,呈3D结构生长。6、肿瘤类器官培养过程中,为避免出现混入的正常上皮组织形成的生长优势现象,我们的处理:一是在取材中严格把握,尽量选取肿瘤组织而不附带正常胆囊上皮;二是在剪切前尽量去除可疑的正常上皮组织;叁是在培养过程中,如果有孤立的、巨大球形上皮类器官细胞团,可在显微镜下行上皮类器官穿刺抽吸以去除。7、Matrigel重聚合时机:一为类器官数量超过100-150/孔,应及时传代,同时即相应完成重聚合;二是Matrigel出现崩解;叁是显微镜下观察Matrigel出现消耗过度的情况。8、胆囊癌肿瘤类器官的形态学鉴定:类器官石蜡切片与原代组织石蜡切片比较,大体镜下形态相似,正常胆囊上皮、胆囊腺瘤及胆囊腺癌均与来源组织形态保持一致。9、类器官肿瘤标志物测定:类器官行免疫荧光染色提示相关标志物CK7,CD133、Erb B2及C-myc均有表达,提示类器官来自于胆系干细胞,且与胆囊癌常见肿瘤标志物表达一致。10、类器官转录组及全基因组测序结果显示,类器官与原代肿瘤组织之间基因表达谱、胚系突变及体细胞突变的相似度均比较好。研究结论:根据上述实验结果,我们初步构建了胆囊腺瘤及胆囊腺癌病人来源的类器官培养体系,明确了胆囊良恶性肿瘤类器官培养从新鲜标本收集、消化、Matrigel聚合以至传代、保存、复苏等整套流程,确立了针对良性及恶性肿瘤不同的培养基组分。在胆囊腺瘤中,类器官培养成功率达60%,胆囊恶性肿瘤类器官培养成功率达到14.6%。同时,针对培养出的类器官,分别进行形态、肿瘤标志物及基因组等方面的鉴定。胆囊癌类器官形态与原代肿瘤相似,且保留3D结构而非平面结构,表达胆系及干性、胆囊恶性肿瘤标志物,同时测序结果提示肿瘤类器官与原代肿瘤组织相似度较好。综上所述,我们成功构建胆囊良恶性肿瘤类器官模型,为后续胆囊癌的分子机制研究及药物筛选,提供了很好的平台。第二部分睫状神经营养因子受体通过MAPK/ERK通路抑制胆囊癌转移研究背景及目的:胆囊癌(GBC)是世界范围内最具侵袭性的恶性肿瘤之一,极易出现肝或邻近器官局部浸润、淋巴转移或腹腔转移,导致发现时已处于中晚期而失去手术机会。对于胆囊癌这种具有侵袭性生物学行为和预后不良的肿瘤,发现其转移的机制并确定潜在的治疗靶点以改善临床预后至关重要。肿瘤细胞侵袭和转移的过程及机制较为复杂,主要的影响因素包括:促进细胞黏附、降解细胞外基质等。基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)是一类可以降解细胞外基质的蛋白酶,在肿瘤转移过程中十分重要。睫状神经营养因子(Ciliary neurotrophic factor,CNTF)是白介素-6家族成员,其受体为睫状神经营养因子受体(Ciliary neurotrophic factor receptor,CNTFR),包括CNTFR-α、LIFR-β和gp130叁种亚基,其中CNTFR-α是其核心亚基。长期以来,关于CNTF及CNTFR的研究,多集中于神经系统及运动系统损伤后修复方面。近年来,这两者在恶性肿瘤中的作用逐渐得到重视。但CNTFR及CNTF在胆囊癌中的表达情况,以及两者是否在胆囊癌的发生、发展过程中起作用,尚未有报道。我们在胆囊癌类器官培养过程中,转录组测序结果发现睫状神经营养因子受体CNTFR在胆囊癌及正常胆囊上皮中表达有显着差异,而CNTF表达无差异(未发表数据)。我们设想CNTFR在胆囊癌中可能发挥了一定作用。由此,在本研究中,我们进一步检测了胆囊癌及癌旁组织中CNTFR和CNTF的表达,并分析了其表达与胆囊癌患者临床特征和预后的关系。随后通过肿瘤细胞生物学及动物体内实验进一步对CNTFR在胆囊癌中的作用及分子机制进行研究。我们期望通过对CNTFR调控胆囊癌的分子通路的研究,为胆囊癌的临床干预,特别是抑制其侵袭转移,提供新的靶点。研究方法:1.收集胆囊癌及癌旁新鲜组织标本,检测癌及癌旁CNTF和CNTFR的m RNA、蛋白表达水平。2.收集152例有随访资料的胆囊癌患者肿瘤组织病理切片,通过免疫组化染色检测胆囊癌及癌旁组织中CNTFR及CNTF的表达情况。统计分析CNTFR及CNTF表达与患者临床特征和预后的关系,借以判断CNTFR及CNTF在胆囊癌的恶性进展中是否发挥作用。3.用慢病毒转染方法在NOZ及SGC-996两株胆囊癌细胞株中建立CNTFR过表达细胞系,体外检测CNTFR过表达后对胆囊癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并在脾注射肝转移模型中检测CNTFR对胆囊癌细胞转移能力的影响。4.将过表达CNTFR的两株细胞系作转录组测序,并分析CNTFR调控的关键信号通路或节点分子。5.通过Western Blotting等方法对相关激酶和蛋白进行检测,进一步验证CNTFR对胆囊癌细胞中信号通路的调控。6.使用抑制剂特异阻断关键信号通路,检测CNTFR对胆囊癌细胞的调控是否依赖于特定的信号通路。研究结果:1.在20例胆囊癌及癌旁新鲜组织标本中,CNTFR m RNA表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01)。而CNTF m RNA表达水平与癌旁相比,没有显着性差异(P=0.108)。蛋白检测结果一致。2.152例胆囊癌石蜡病理切片的免疫组化结果表明CNTFR在胆囊癌组织中表达明显降低,而癌旁组织中有较高水平表达。CNTF在胆囊癌与癌旁组织中的表达没有明显差异。3.在152例胆囊癌患者的病理切片中,CNTFR的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度及TNM分期无关,而与淋巴结转移和远处转移密切相关。单因素生存分析提示CNTFR的表达与胆囊癌总生存率相关。多因素生存分析提示CNTFR表达与远处转移是胆囊癌预后的独立危险因素。4.CNTFR对胆囊癌细胞增殖无明显影响,但对癌细胞的迁移及侵袭能力有显着抑制作用。体内实验亦得出相同结论。5.测序结果发现丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路在两株细胞系的差异性通路排名中均靠前。WB结果显示P38、AKT及STAT3的磷酸化水平及总蛋白表达在对照及过表达CNTFR细胞中均无明显变化,而ERK蛋白磷酸化在过表达CNTFR细胞中明显受抑制。同时,MAPK调控的迁移转移相关蛋白MMP1及MMP10在过表达CNTFR细胞中亦明显下调。6.用ERK抑制剂SCH772984处理细胞后,对照细胞和过表达CNTFR细胞内ERK的磷酸化水平均下调,同时两种细胞的迁移侵袭能力亦被抑制,对照组细胞和过表达组细胞间无明显差异。这表明在胆囊癌细胞中CNTFR通过影响MAPK/ERK通路抑制细胞的侵袭转移能力。研究结论:1.胆囊癌中存在CNTFR及CNTF的表达。胆囊癌中CNTFR的表达明显比癌旁组织低。CNTF在癌及癌旁组织中表达无明显差异。2.CNTFR表达与胆囊癌患者的淋巴转移和远处转移密切相关,且CNTFR的高表达预示着胆囊癌患者的较好预后。CNTFR是潜在的胆囊癌预后判断分子。3.CNTFR对胆囊癌细胞的侵袭转移具有抑制作用,这一作用是通过抑制MAPK/ERK通路的磷酸化,进而抑制下游MMP1及MMP10这两种基质金属蛋白酶的表达来实现的。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2019-05-23）
周春华[8]（2019）在《小鼠胃、小肠类器官培养及在胃肠疾病研究中的应用》一文中研究指出第一部分C57BL/6小鼠胃类器官培养体系的建立目的:体外叁维培养小鼠胃类器官(gastroids),作为可靠的模拟胃上皮结构、功能的体外模型,用于后续胃疾病研究。方法:迅速分离小鼠胃窦、体粘膜腺体,种植于基质胶,加入含有生长因子的培养基进行培养,动态观察gastroids的形态学变化,并进行gastroids传代、冻存、复苏,通过免疫荧光、q PCR检测gastroids细胞标志物,确认培养是否成功。结果:本实验所培养的gastroids形态学上与文献报道一致,可有效地进行传代、冻存、复苏,具有MUC5ac、MUC6、Pepsinogen、H~+-K~+ATPase、Lgr5等胃窦、体粘膜等多种细胞标志物,而不表达肠上皮标志物MUC2,可用于后续研究。结论:本实验成功建立小鼠胃来源的gastroids,在形态特点及所含细胞标志物上与文献报道一致,为后续体外研究提供了可靠的模型。第二部分鹅去氧胆酸对gastroids生长、增殖、凋亡、分化及Ghrelin表达的影响目的:观察胆汁的成分之一鹅去氧胆酸(Chenodesoxycholic Acid,CDCA)对小鼠gastroids的生长、增殖、凋亡、分化及胃促生长素Ghrelin m RNA表达的影响。方法:选取gastroids生长状态较好的时间点进行干预,分别采用不同浓度的CDCA刺激gastroids,通过倒置显微镜观察gastroids的直径、形态变化;流式细胞术(PI染色)检测gastroids中细胞增殖情况;流式细胞术(Annexin V/PI染色)检测gastroids中细胞凋亡情况;q PCR方法检测ghrelin m RNA表达变化;采用单细胞测序方法分析CDCA对gastroids中细胞分化的影响。结果:倒置显微镜下可以观察到CDCA浓度达200μmol/L时,gastroids变小、死亡。CDCA浓度在0~100μmol/L时,随着浓度增加,gastroids增殖活性无明显改变;而CDCA浓度在30、100μmol/L时gastroids早期凋亡、晚期凋亡细胞比例增加。CDCA 10μmol/L浓度刺激24h可导致gastroids小凹细胞的各个亚群比例发生变化,表现为促进处于细胞分裂周期的亚群凋亡。随着CDCA浓度增加,gastroids中Ghrelin m RNA表达水平逐渐下降。结论:初级胆汁酸CDCA能够促进gastroids中小凹细胞群中处于细胞分裂周期亚群的凋亡,抑制小凹细胞的更新。同时,CDCA能使gastroids中内分泌细胞ghrelin m RNA的表达下调。这部分解释了长期胆汁反流中胆汁酸刺激胃黏膜上皮所致的小凹上皮细胞增生及胆汁反流性胃炎患者胃肠激素水平的紊乱。第叁部分C57BL/6小鼠小肠类器官培养体系的建立目的:体外叁维培养小鼠小肠类器官(enteroids),作为可靠的能够模拟肠上皮结构、功能的体外研究模型,用于后续实验研究。方法:迅速分离雄性C57BL/6小鼠小肠粘膜隐窝,接种于基质胶及含有生长因子的培养基中,动态观察enteroids的形态学变化,并进行enteroids传代、冻存、复苏,通过免疫荧光验证enteroids中所含有的细胞类型。结果:本实验所培养的enteroids形态学上与文献报道一致,可有效地进行传代、冻存、复苏。免疫荧光能够观察到上皮细胞、潘氏细胞、增殖细胞、Tuft细胞,可用于后续研究。结论:本研究成功建立小鼠小肠隐窝来源的enteroids,在形态特点及所含细胞种类与文献报道一致,为后续enteroids体外研究提供了可靠的模型。第四部分长双歧杆菌调控肠上皮增殖活性并改善IBS模型大鼠内脏高敏感目的:观察避水应激(WAS)所致的肠易激综合征(IBS)大鼠肠道上皮增殖活性、潘氏细胞的分泌功能、肠道菌群改变,观察长双歧杆菌(B.Longum)对WAS所致的IBS大鼠肠道上皮增殖活性、潘氏细胞功能、肠道菌群的调控作用。建立B.Longum与小肠类器官(enteroids)共培养体系,观察B.Longum对enteroids中细胞增殖的调控作用。方法:通过WAS 10天建立IBS大鼠模型。HE染色观察回肠末端隐窝-绒毛结构,扫描电镜观察B.Longum定植情况。FITC-D4000观察肠道通透性;western-blot检测肠道上皮紧密连接蛋白Occludin表达;免疫荧光、q PCR观察肠道上皮增殖活性;免疫荧光、q PCR、westernblot观察潘氏细胞数目及溶菌酶表达情况;16S r RNA测序分析肠道细菌变化。观察B.Longum干预对WAS所致大鼠肠道上皮增殖活性及潘氏细胞溶菌酶表达、肠道菌群的调控作用。用B.Longum菌粉接种、培养、传代并进行鉴定。取生长状态较好的enteroids与1.0~1.5×108 CFU B.Longum进行共培养,4h后提取对照组、Bifido.组的m RNA进行转录组测序,并筛选差异基因,进一步用q PCR验证。结果:WAS引起大鼠IBS样改变,导致结肠内脏高敏感,回肠末端绒毛/隐窝长度变短,肠道通透性增加,肠黏膜紧密连接分子Occludin表达下降,上皮增殖活性下降,潘氏细胞分泌的溶菌酶减少,肠道菌群α-多样性及β-多样性下降。B.Longum能有效定植于回肠末端黏膜上皮,增加肠上皮细胞增殖活性及潘氏细胞溶菌酶的分泌,在门、属水平上改善WAS所致的肠道菌群失调。体外共培养实验中,根据对照组及Bifido.组样本差异基因筛选结果,获得pathway通路注释,发现Wnt3A信号通路、EGF信号通路、TGF-β信号通路在Bifido.组明显上调,q PCR验证发现Bifido.组干细胞增殖信号分子Wnt3A、TGF-βm RNA表达明显增加。结论:WAS可引起大鼠肠上皮增殖活性下降,肠屏障功能损伤,潘氏细胞抗菌肽溶菌酶表达减少,肠道菌群失调,导致内脏高敏感,B.Longum干预能有效增强肠上皮细胞增殖活性、改善肠屏障功能、调控潘氏细胞溶菌酶表达及肠道菌群紊乱,减轻大鼠内脏高敏感。体外试验也证实长双歧杆菌具有促进enteroids中细胞增殖活性。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2019-05-22）
胡永婷,李彦明,李颖靓[9]（2019）在《酵母培养物降低黄曲霉毒素和呕吐毒素对猪生长性能、器官健康和免疫状态影响的研究》一文中研究指出文章旨在评估酵母培养物对饲喂毒素污染日粮断奶猪生长性能、器官健康和免疫状态的影响。试验选择体重为(8.75±0.38)kg,28 d断奶的叁元杂交猪500头,随机分为5组,每组5个重复(20头/重复),试验共开展42 d。对照组为未加毒素污染原料,处理1组含150μg/kg黄曲霉B1毒素+1100μg/kg呕吐毒素,处理2组在处理1组中添加2 mg/kg蒙脱石,处理3组在处理1组中添加1.0 mg/kg蒙脱石和0.5 mg/kg酵母培养物复合物,处理4组在处理1组中添加0.5 mg/kg蒙脱石和0.5 mg/kg酵母培养物复合物。结果显示:日粮污染降低了仔猪日增重,通过增加单核细胞和免疫球蛋白来改变免疫系统。霉菌毒素可引起肝、胆管增生和核肿大等组织损伤。毒素污染日粮添加2 mg/kg蒙脱石或1.0 mg/kg蒙脱石和0.5 mg/kg酵母培养物复合物降低了霉菌毒素对免疫系统和肝脏的影响,改善了仔猪生长性能。结论 :日粮添加2 mg/kg蒙脱石或1.0 mg/kg蒙脱石和0.5 mg/kg酵母培养物复合物对饲喂毒素污染日粮猪的健康和生长性能具有改善作用。(本文来源于《中国饲料》期刊2019年10期）
吴显培[10]（2019）在《椎间盘器官培养模型中白藜芦醇抑制压应力所致退变与ERK表达的相关性研究》一文中研究指出第一部分椎间盘退变髓核细胞中ERK的表达评估目的:研究椎间盘退变组织中细胞外调节蛋白激酶(ERK)的表达情况。方法:(1)组织学观察并对比椎间盘退变组织和椎间盘正常组织中髓核的形态;(2)采用实时荧光定量PCR的方法检测椎间盘退变组织和椎间盘正常组织细胞中ERK的mRNA表达情况;(3)采用Western blot检测椎间盘退变组织和椎间盘正常组织细胞中ERK蛋白的表达水平。结果:(1)在椎间盘退变组织中髓核细胞的形态和数量发生变化,髓核细胞的改变与椎间盘退变同步进展;(2)在椎间盘退变组织中ERK的表达明显升高;(3)Western blot显示随着椎间盘退变程度的加重,ERK蛋白表达明显增加。结论:(1)在椎间盘退变组织中,髓核细胞的形态和数量发生变化,即髓核细胞的改变与椎间盘退变同步进展;(2)在椎间盘退变组织中ERK的表达升高,ERK的表达与椎间盘退变程度相关。第二部分椎间盘器官培养模型中高压力负荷下椎间盘退变髓核细胞中ERK的表达评估目的:制作椎间盘器官的培养模型,并在此基础上进行施加压力负荷促退变试验,检测培养模型髓核细胞中ERK的表达情况。方法:(1)制作大鼠椎间盘器官培养模型,并施加高压力负荷促使其椎间盘退变;(2)检测培养模型中椎间盘髓核细胞的成活率;(3)采用实时荧光定量PCR的方法检测培养结束后的椎间盘退变组织细胞中ERK的mRNA表达情况;(4)采用Western blot检测在培养第7天和第14天时,对照组和加压组两组椎间盘组织细胞中ERK蛋白表达情况。结果:(1)随着培养时间延长,椎间盘培养模型中的组织退变逐渐明显加重,高压力作用能加速此过程;(2)施加高压力负荷组中椎间盘髓核细胞活力低于施加较小压力组(P<0.05);(3)施加高压力负荷组的椎间盘髓核细胞中ERK基因表达水平升高(P<0.05);(4)施加高压力负荷组的椎间盘髓核细胞中ERK蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:(1)随着受到的压力增大以及作用时间延长均会增加椎间盘髓核细胞的凋亡;(2)施加较大压力组的细胞活力明显低于施加较小压力组;(3)施加较大压力组中ERK的基因和蛋白表达水平比施加较小压力组明显升高。第叁部分白藜芦醇抑制高负荷压应力所致椎间盘退变与ERK表达的相关性研究目的:研究白藜芦醇(RES)对高压力负荷下椎间盘培养器官的影响。方法:制作雄性SD大鼠椎间盘器官培养模型,随机分为对照组、椎间盘退变组和白藜芦醇药物干预组,每组各10只。(1)比较白藜芦醇对高压力负荷下椎间盘培养器官中组织变化的影响;(2)比较叁组大鼠椎间盘器官培养在各时间点时细胞的存活率;(3)比较叁组大鼠椎间盘器官培养在各时间点时细胞的凋亡情况;(4)比较叁组大鼠椎间盘器官培养模型髓核细胞中ERK的mRNA的表达情况;(5)比较叁组大鼠椎间盘器官培养模型髓核细胞中ERK蛋白表达水平。结果:(1)在高压力负荷作用下椎间盘培养器官组织退变明显,而白藜芦醇药物干预可减轻退化程度;(2)白藜芦醇药物干预组的细胞存活率介于对照组和椎间盘退变组之间。(3)椎间盘退变组的细胞凋亡较重,对照组较轻;而白藜芦醇药物干预组介于两者之间;(4)ERK的mRNA表达在椎间盘退变模型组、白藜芦醇药物干预组以及对照组依次降低,叁组相比较存在差异(P<0.05);(5)ERK的蛋白表达水平在椎间盘退变模型组、白藜芦醇药物干预组以及对照组中逐渐降低,叁组相比较存在差异(P<0.05)。结论:白藜芦醇可减轻压力负荷导致的细胞凋亡,从而起到保护椎间盘的作用,其作用可能与抑制ERK过度表达有关。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
器官培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建肺、肝、脾、肾多种精密组织切片培养的微流控芯片平台。利用芯片平台研究唾液腺腺样囊性癌(简称SACC)相对高转移SACC-LM和相对低转移SACC-83两种细胞系的细胞外囊泡对大鼠多种组织的影响。材料方法:精密组织切片(简称PTS)培养方法,是在活体状态下迅速取出组织,用徕卡活组织震动切片机将组织切成200微米的薄片,从而开展各项实验,目前,PTS培养技术已广泛应用于药理学、毒理学、病理学、生理学等多领域。微流控芯片技术有微型化、集成化、自动化、快速分析、低消耗等优势。结果:针对大鼠的肺、肝、脾、肾精密组织切片进行石蜡切片HE染色观察组织结构形态,Rh-123、Hoechest 33342和PI联合染色观察组织内细胞活性,经过0小时组和6小时组对比观察发现培养6小时组的肺、肝、脾、肾组织无明显解离,形态结构完整;并且保持良好的细胞活性;观察芯片模型内SACC-LM、SACC-83对肺、肝、脾、肾组织的黏附情况,发现不同细胞系来源的细胞对不同的组织的趋向性明显不同。结论:基于微流控芯片的精密组织切片培养技术可以在一定程度上保持组织的形态结构、组织活性及器官功能;唾液腺腺样囊性癌细胞对肺、肝、脾、肾组织趋向性明显不同。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
器官培养论文参考文献
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[2].马红娟,刘婷姣.多种精密组织切片共培养平台的构建及其在唾液腺腺样囊性癌多器官转移中的应用[C].2019年中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第十叁次全国口腔病理学术会议论文汇编.2019
[3].胡影,曹云芳,樊琼,王灏琦.酵母培养物对鹌鹑生长性能、免疫器官指数及肠道菌群的影响[J].中国农学通报.2019
[4].张鑫,张春容.培养学生以器官系统为中心的临床思维能力[J].检验医学与临床.2019
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[7].袁波.胆囊良恶性肿瘤类器官培养体系的建立及鉴定[D].中国人民解放军海军军医大学.2019
[8].周春华.小鼠胃、小肠类器官培养及在胃肠疾病研究中的应用[D].中国人民解放军海军军医大学.2019
[9].胡永婷,李彦明,李颖靓.酵母培养物降低黄曲霉毒素和呕吐毒素对猪生长性能、器官健康和免疫状态影响的研究[J].中国饲料.2019
[10].吴显培.椎间盘器官培养模型中白藜芦醇抑制压应力所致退变与ERK表达的相关性研究[D].广西医科大学.2019
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